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文档简介
1、 企业经营管理金针菇工厂标准化管理 金针菇工厂标准化生产周雯编著现场标准化管理体系导论绿色农产品标准化生产技术标准生产操作,轻松管理工厂2013 年元月 标准化生产体系金针菇标准化生产需要从:人、机、料、法、环、测六个方面进行管理,在金针菇生产方面首先需要确定的是:法及环,而其它方面都是围绕而展开的标准化管理,所以先从环境开始进行阐述。第一章:环境工厂化生产金针菇是全天候不间断进行,对外界的环境变化都有相应的控制管理方法,但有两个重点是需要事先进行设计的:1、工厂位置;2、用水情况;一、工厂位置在工厂化生产金针菇需要处于污染少的地区,并最好是在山林的东北面/西北面,可利用较好的通风条件的地方,
2、或者在山脚与河流交界处,这样可以有两大好处:1、 相对湿度较低,空气中含菌机率较少;2、 相对氧气含量较高,有利于金针菇的健康生长;3、 污染相对较少,有利于环境的控制;三、 用水情况因生产需要大量的洁净水,最好是地下水为主,也可以是无污染的河水,这样在木屑发酵、装瓶拌料、搔菌、出菇管理中才能使产品品质有保障。采用自来水的话会出现 1、水费成本高;2、因自来水含漂白粉及氯,对产品品质会有损害。3、停水会带来生产损伤。所以自来水只能做为紧急对应及普通生产/生活用水,不可做为生产主导用水。四、厂房周围厂房选择不可在有空气污染地进行建设,有地下水污染的地域更不适宜进行建厂, 尤其是垃圾场、养殖场、化
3、工厂、石灰厂等等有空气污染的工厂边,不可设厂。厂房周围也不可以是高楼地区,也不可以在小盆地中央;需要通风透气,对流较好的地域,山与河之间是最佳的选择。第二章菌种的工艺方法金针菇工厂化生产最重要是技术加科学的管理方法,并应用标准化管理,才能生产出健康、品质优良的产品。从菌种的优选到菌种的培养、使用;从材料的测试到装瓶的控制,从接种的管理到培养的检查(因菌种是生产源头,所以菌种的检查必须非常严格,必须是有经验的专业技术人员进行管理及检查,菌种的生长情况及污染管理是工厂的根本),从搔菌的检查到出菇的管理等等都需要标准的作业流程及严格的测试检查。以下就各环节作出说明:(一) 金针菇的分类地位金针菇又名
4、冬菇、朴菇、构菌、毛柄金钱菌,商品又称金针菇、银针菇、白金针菇、金菇等,英文名称 Enokimushroom。在真菌分类中隶属于菌物界、真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白磨科、金针菇属。(二) 形态特征金针菇主要由菌丝体和子实体两大部分组成。1、菌丝体菌丝体(图 2.1)是金针菇的营养器官,具有分解、吸收、储藏、运输营养的作用。金针菇菌丝白色至灰白色,绒毛状,气生菌丝较弱。在光学显示中,菌丝管状,具间隔和分支,粗细不均,菌丝间隔处有锁状联合。菌丝生长速度较快,在 25环境下 810 天可以长满试管斜面。菌丝生长后期菌丝断裂形成粉孢子,菌落具粉质感。有研究表明,金针菇菌丝阶段的粉孢子多少与金
5、针菇的质 量有关,粉孢子多的菌株质量都差,菌柄基部颜色较深。在斜面基上极易形成子实体。2、子实体子实体是金针菇的繁殖器官,主要由菌盖和菌柄两部分组成。人工栽培的金针菇包括黄色金针菇和白色金针菇两种。由于采用特殊的栽培管理措施,人工栽培的子实体颜色淡黄甚至纯白色,菌柄细长,菌盖较小,菌柄基部淡黄色甚至纯白色。以下主要介始的是白色金针菇的种植方法,当然也可以用于黄色金针菇的种植管理。(三) 金针菇的生活史金针菇为双因子控制的四极性异宗结合的食用菌。也就是说,不亲和因子作用是由 A 因子和 B 因子任意控制的,生活史较复杂。金针菇的有性繁殖产生担孢子,每个担子产生 4 个担孢子,4 个后孢子的交配型
6、分别是 AB、ab、Ab、aB 种。只有极性不同的具有亲和力的单核菌丝之间进行细胞配合,形成每一个细胞有两个异核的双核菌丝。双核菌丝经过一定时间的发育后,就扭结形成原基,并发育成子实体。随着子实体逐渐面熟,在菌褶表面形成无数的担子,异核在担子中进行核配形成二倍体核,之后二倍体核经过减数分裂形成 4 个单倍体的核,每个单倍体核通过孢子小梗,在每个担子尖端形成 4 个担孢子,从而完成金针菇生活史的有性循环。(四) 金针菇生长对营养的需求营养是金针菇一切生命活动的物质基础。金针菇属于木腐菌,属于异养生物,在生长发育过程中,需要不断从基质中吸收营养来满足其生命活动的需要,这些营养物质包括碳源、氮源、无
7、机盐和生长因子四大类。后面在介绍生长工艺时具体 说明。第一节 母种工艺选择母种是根据当地需求进行培育,母种从大类上来分:黄色、浅黄色、纯白色等等;还可细分多种。一、菌种的概念及分级1、 菌种的概念:菌种是人工培育的纯菌丝体及其培养基的混合体。也可以说,菌种是在一定容器中,以适当的培养料为基质,培养获得的纯菌丝体及其培养基质。2、 菌种的分级:公司采用母种、原种、栽培种三级扩大繁育程序培育金针菇菌种。通过母种扩接成原种、原种扩接成栽培种,可以实现菌种数量的扩大,以满足生产对菌种的需要,同时提高菌种对培养料的适应性。a) 母种:采用纯种分离或转管获得,在含有琼脂的培养基上生长的,具有结实能力的纯菌
8、丝体。培养用的容器一般为玻璃试管。金针菇纯种分离采用组织分离,分离部位以菌柄顶端的菌肉最好,一般第个菇分离一管。也可采用孢子分离或基内菌线分离获得母种。可以通过转管扩大繁殖母种,但转代次数不宜过多。母种一般用于原种的接种及用于保藏菌种。b) 原种:是将母种接种到培养基上培养获得的具有结实能力的菌丝体及培养基质,培养用的容器一般玻璃或塑料制成的菌种瓶。通常一瓶母种可转接 58 瓶原种。原种一般用于栽培种的接种,当栽培量不大时,可以用原种直接栽培。另:原种可制备成液体菌种,直接用于生产;这样可以降低污染率,提高菌丝的活度,并极大降低的生产周期及成本。c) 栽培种:是将原种接种到培养基上培养以获得具
9、有结实能力的菌丝体及培养 基质,培养用的容器一般为塑料瓶,也可用塑料袋。通常一瓶原种可以接种 3050 瓶栽培种。栽培种一般用于生产,栽培时用种量为 35%左右。二、母种标准化生产的工艺流程母种标准化生产一般都包括培养基的制备、接种及培养三个主要环节。1母种的培养基是母种制备的关键步骤,通常工厂化生产以以下几个方案为主:序号品名配方一配方二配方三配方四有 需 要 请 联 络 :12各种配方较常用配方一,菌丝生长营养丰富,利于后期的生产品质及产量。2.培养基的制备方法;准备工具:量杯 1000ml,漏斗,试管 100 支(20*180mm),酒精灯,手术刀,长勾或长镊子 200mm,炉子,锅子,
10、四层纱布,棉花制成塞子,高压灭菌炉,无菌接种箱,恒温箱、冰箱等;准备物质:配方内材料,做种的金针菇一束或已制备的一级母种 10 管;工艺过程如下:(注意需要无菌化操作)工艺序1工艺流程方法说明设备ST名称消毒工作对所有使用的器皿进行消毒处理,1、人体;2、台面;3、环境;(无菌作业)无菌台 20量杯、22烧水量 1000ml 水进行烧水炉、锅 土豆去皮土豆削去表皮,并处理表面芽状物,并在白纸上切成 1CM 见方小块,倒入锅中煮开至 20 分钟后,倒出到量杯中,并用四层纱布过滤,并加水至 1000ml;3456刀5过滤拌料分装量杯20过滤后的液体再倒入干净的锅中,加入琼脂搅拌溶化,再倒入其它配料
11、搅拌;玻璃棒 3把煮好的培养基用漏斗分装到试管中, 漏斗;10每管装至 1/5 处,并塞上棉花球塞;试管把试管 5 个一捆用双层报纸捆上上半部,放入高压灭菌炉内,压力 0.05MPa 时放 高压灭出冷气,在 0.120.15MPa,120 度下灭 菌菌 30 分后,降压至 0.05MPa 下取出;把出炉后的试管放成在 1525 度的斜面上,使斜面至试管 2/3 左右为宜,等管内液体冷却到 20 度自然凝固;7灭菌89预冷母种20准备品质最好的金针菇,用手术刀取其菌盖与菌柄连接处(或已制备一级母种) 无菌台 2约 5mm 作为种母种 在无菌接种台内,把准备好的种母种接入试管内(长勾每次要消毒冷却
12、),一株 长勾,金针菇接一管,而原一级母种取 5mm 见 酒精灯 1/支方的菌块及培养基;放在培养基的斜面1/2 处轻压;10 接种把接种好的试管放在贴上制作时间及级别,放入 20的恒温箱进行培养,每天 恒温箱 10D检查其发菌情况;需培养 10 天左右11 培养当菌丝长满至 90%95%时立即进行冷藏保管,剪去长出试管棉塞,用塑料膜包冷藏12冰箱90D保管口或换用胶塞,放入冰箱 4左右可保存三个月正常母种的菌丝应该生长整齐,呈现淡白或较浓白,菌丝长满后应该呈现白色,菌丝较纤细,与棉花丝差不多13 检查3母种注意事项:一是从母种试管的菌丝上去判断好坏,正常母种的菌丝应该生长整齐,呈现淡白或较浓
13、白,菌丝长满后应该呈现白色,菌丝较纤细,与棉花丝差不多;二是在保存母种时应该在菌丝快要长满时放入电冰箱,不要等母种菌丝完全长满后才低温保存,因为这样极易促使母种在低温环境下快速现蕾,让母种失去使用价值;三是在扩繁母种时应该选用没有现蕾的原始母种使用,如果现蕾,应该选用 小菇蕾没有开伞的使用,完全开伞的母种应该坚决弃之不用,否则可能引起金针菇产量的大幅度降低。四是转接母种不可过多,在转接及制备的过程中要保证不受污染;转接最多以三种母种为宜,超过三级无法保证污染传播。五是选择市场上优质的菇种做为母种对象,或是直接购买优质母种进行生产后,自己再进行母种配制。市场上母种分类如下:1) 纯白色金针菇88
14、01,89092) 淡黄色金针菇3) 黄色金针菇4.主要生产设备:高压灭菌炉,无菌接种台第二节原种工艺原种按工艺分为;固体原种及液体原种,本文先介绍固体原种的制作工艺,再对液体原种进行研讨,因为液体原种以其周期短、成本低、污染少是日后工厂化生产的趋势,最终工厂必须按液体菌种进行投资生产。一、 固体原种1. 固体原种的培养料配比管理序号 品名配方名称配方一配方二配方三配方四123注意:木屑需要用发酵后(36 月)的非新鲜木屑,加水发酵及 15 天翻堆一次, 使用时含水率应在 70%左右,以阔叶木屑或杉木屑加 20%阔叶木屑较好。同时棉籽壳需要提前一天预湿堆积。木屑使用前进行筛料,保证粗细搭配好,
15、2-3 粗据末占 20%,1.5mm 以下细锯末占 80%。2工艺流程工艺序1工艺流程方法说明设备ST名称配料按配方进行配料,并对需要处理的材料预先进行处理,如发酵加湿;配料车 1D拌料机 20一次拌料对配料依次均匀倒入,先进行干拌(手工或小拌料机),并搅拌均匀为止;对干拌料逐步加入溶糖后洁净水,进行加湿拌料,并拌至用手紧握有水珠但不滴为止,松开手料即散;2二次拌料310测含水率三次拌料用含水测试仪对料的含水率进行测试, 含水测4535达到 67%2%为宜试仪对不达标的培养料再次进行加湿或加干拌料,直到达到标准含水率对拌好的料进行 PH 值测试,达到 6.3测试670.1 为宜,不合格不可使用
16、,可用少量石 PH 仪灰进行调整;但差异太大需重新配料;对测试 OK 的培养料手工装入瓶中,边装边压紧,直到装满整瓶为止35PH 值手工装瓶 对装好料瓶进行称重,重量要求在 330350g,需在装瓶前称好瓶的重量后,再 电子称 1在装满后称重相减所得,并适量增减89称重压实用偏心圆形对装好的料进行压实处理, 偏心压2压至表面料距瓶口:约 4CM 左右杆用直径约 2CM 的圆锥木棒在料中心处打 圆锥木10 打孔11 清洁12 盖棉塞2孔,可轻摇下压,直到瓶底棒用清水对瓶身及瓶口内没有料的地方进行清洁,完全清理直至无残留;用医用棉花做成的盖子,塞上棉花塞,要求塞紧压实;101把塞好的培养瓶放入小型
17、的高压灭菌炉13 灭菌内进行高压灭菌;条件:123/1.5H, 灭菌炉 3H0.150.18MPa 压力下灭菌灭菌完成后,需要把培养瓶立即移入预冷室进行预冷 10H,并在使用前用紫外线 预冷室 10H进行 30 分以上的杀菌消毒14 预冷试管母种用来苏儿溶液擦洗后放置于接种箱内,第一箱用甲醛加高锰酸钾熏蒸无菌工准备15消毒,从第二箱开始及接下来的几箱都可用气雾消毒盒(剂)812g 消毒,消毒 30min 后方可接种40接种作台 用母种对原种培养料进行接种,在无菌工作台上,每瓶手工接入:用接种针稍微刮掉斜面上的菌丝,将斜面母种分成六小块;瓶口靠近火焰,用接种针把小块的培养基再分成成一个小块和一个
18、大块,并勾入菌瓶内,塞上棉花球。接种完毕后,进行摇瓶,使小块的掉入孔穴中,大块的在培养料上面手工接种16接种针 3放置于温度为 15菌种培养房中,二氧化碳浓度低于 1000ppm,培 养 25D 菌丝可走满整个菌瓶恒温培17 培养25D养室在培养过程中,每天进行培养情况检查,并记录温度/湿度/Co2 浓度,在培养中发现异常立即分析,当菌丝走满 95%左右可用于生产或用于栽培种的接种。培养181D检查提倡二级制菌,不提倡三级制菌。一般菌种可以作如下分级,母种试管是一级,用试管繁殖的玻璃瓶菌种等是二级种,再用二级种繁殖的玻璃瓶等菌种我们称之为三级种。经验证明,用试管母种繁殖的二级种直接接种生产出菇
19、袋,菌丝发育良好,成功率高,污染率低,后期的金针菇产量明显高、质量明显好;而用三级菌种接种生产出的菇袋在各方面的表现都明显不如前者。究其原因,一是一级母种的纯化程度很高,菌龄很短,一般要 10 天左右即可长成,没有隐性污染,不存在老化情况,用它接种的二级原种菌龄一致,再接种生产出菇袋,效果自然很好;二是用二级原种再接种三级生产种时,如果挑选不严,极有可能选入带有细菌等 隐性污染的菌种,用这些二级原种再接种三级菌种,极有可能造成细菌性污染的扩大化,严重影响金针菇的产量。因此在这里建议采用二级制菌方式,二级制菌的生产流程可以简单概括为母种试管接种原种玻璃瓶,原种瓶接种出菇瓶,出菇瓶菌丝发育成熟直接
20、出菇。对于原种的管理是需要进行每日检查,从而总结出菌丝发育的全过程,并严格控制发菌过程中出现的异常,及时分析处理;保证生产源头的稳定性,是整体生产的关键环节。原种也可以用 1100ml 的聚丙烯进行生产(主要是用于二级菌种生产方式),但接种量及接种方式需要进行研讨实验。3.固体原种的注意点:一是:生产过程中瓶身的清洁很重要,必须细致地进行,使不是培养料部分完全无残留的物质;同时灭菌过程要严格管理,并记录以保证不会因为设备问题导致灭菌无效(灭菌效果需要检查,即灭菌后直接放在培养房内 23 天无变异视为合格)。二是:接种过程中消毒很重要,人员进入接种室时需要进行消毒处理,所以需要建设无菌车间及风淋
21、室,需要更换无菌工作服;而培养瓶需要用苯扎溴铵稀释溶液进行清洁消毒处理。三是:接种室要求室温在 1516,而培养室温与接种室温一样管理;湿度要求在 65%左右,而二氧化碳浓度要求在 1000ppm 以下(通风很重要),培养在黑暗环境下进行,避免强光照射。四是:发菌检查,发菌情况需要进行记录,并与前几次进行对比管理,是否出现发菌情况不一致及发菌速度不一样时,需要开会检讨问题的存在,并进行及时的改善。应该在 25 天内完成 95%以上的菌丝布满,如未能完成,可能需要进行废弃 处理。4.使用的主要设备:无菌接种台、灭菌炉;无菌车间,无菌培养房等二、液体原种的制备金针菇生产过程中,通常工厂会采用三级固
22、体菌种进行生产,但随之而来的问题是:污染增加,另因转接过多,会导致菌种部分变弱,使生产品质及产量下降;如用二级菌种生产,而原种的数量不足会导致生产量不足。现在一般大型的食用菌生产厂家,都会采用二级液菌种进行生产,其好处是:(1)成本低:制种成本是固体的三十分之一;(2)时间短:制种时间是固体的 1/10;(3)萌发快:接种后 6 小时萌发,24 小时菌丝布满接种面;(4)生长快:栽培养菌时间比固体缩短 1/2;(5)纯度高:设备完全密闭运行,菌种纯度高、活力强;(6)污染少:菌种萌发速度快,杂菌几乎没有侵染机会;(7)菌龄短:菌包上下菌龄一致,出菇齐、产量高;(8)自动化:按键操作,自动化程度
23、高。常规制备液体菌种多采用“母种一级瓶种二级瓶种培养(发酵)器”的生产工艺,环节多,操作复杂,周期长。全禾菌业研制的 CQY 系列液体菌种培养器及其配技术,将母种经过提纯、活化制备成大量的“液体菌种专用母种”,直接接种到培养器中培养。使用液体专用母种,解决了液体菌种生产及使用上的一系列难题。传统的生产从一级瓶、二级瓶到培养器一个生产周期需 50 天,而专用种直接接到培养器上到生产出成品液体种只需 24 天时间,使得液体菌种自身的生产周期大大缩短。同时节约了投资和生产 成本,减少了中间环节的污染;菌球量大,菌龄一致。液体菌种制种工艺流程如下:清洗和检查培养基配制上料装罐培养基灭菌降温冷却接入专用菌种发酵培养接出菌种。1液体菌种的优势液体菌种是采用生物培养(发酵)设备,通过液体深层培养(发酵)的方式生产食用菌菌球,作为食用菌栽培的种子。其液体菌种是相对固体菌种(木屑、棉壳、麦麸、枝条等)的物理性状而言的。液体菌种具有固体菌种不可比拟的优势:其一是制种快:在液体菌种培养罐内菌体细胞处于最适温度、酸碱度、氧气、碳氮比等条件下,以动态方式培养,菌丝分裂迅速,在短期内能获得大量菌丝体(球)。固体菌种培养,其菌丝体是以自然数的速度自上而下匀速生长;而液体菌种培养,其菌体细胞是以几何数字的倍数加速增殖。采用大连全禾菌业有限公司的液体菌种培养器生产液
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