细菌负荷定量检测的临床意义精编版

1、 2 PCR检测技术简介 聚合酶链反应(PCR)已经成为现代分子生物学实验中最重要的工具， PCR的出现为分离基因、DNA测序等提供了一种快捷、高效的方法 PCR的原理和细胞内发生的DNA复制过程十分相像，可以使DNA分子在 数小时(2-4小时)内扩增230倍以上，使之达到可以检测的水平 在临床实验中，PCR已用于病原体的检测和流行病学研究，本法对于传 统培养等检测方法繁复，灵敏度低，特异性差，或尚未建立可靠检测方 法的微生物尤为适用 31.Waterer G et al. Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:137141 MI: 1.

2、5627 治疗社区获得性肺炎(CAP)时为何应检测细菌负荷量? 4 细菌负荷量的检测可预测患者预后 既往研究提示，伴脓毒症风险的CAP患者，其 治疗方案不同于其他患者 最近研究表明细菌负荷量高的CAP患者愈后较 差，这些发现改变了脓毒症的治疗模式，细菌 负荷量与患者是否应进行脓毒症相关治疗、是 否转入ICU、是否需要进行更多的侵入性操作 等密切相关 PCR检测技术可准确检测血液中的细菌负荷量 以及部分特殊病原体的负荷量 细菌负荷量不仅能预示患者的预后，而且这些 数据对重度脓毒症的发病机理及临床最佳抗生 素的选择具有重要的意义 1.Waterer G et al. Current Opinion

3、 in Infectious Diseases 2011;24:137141 5 肺炎链球菌肺炎疾病严重程度与细菌负荷量相关 MI: 6.0363 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 6 研究简介 研究目的 评估社区获得性肺炎(CAP)患者细菌负荷量与患者脓毒性休克及预后的 相关性 研究方法 一项前瞻性研究，患者均为住院的CAP患者 细菌负荷量检测：采用rt-PCR技术测定血标本中肺炎链球菌的细菌负荷 量 主要研究终点：脓毒性休克的发生率及需行机械通气的患者比例 次要研究终点：急性肾功能衰竭(AKI)、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的 发生率及院内死

4、亡率 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 7 患者细菌负荷量分布 肺炎链球菌肺炎患者细菌负荷量分布 患者百分比(%) (log10拷贝/mL) 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 8 细菌负荷量影响患者脓毒性休克的发生率 随着肺炎链球菌细菌负荷量的增加，患者脓毒性休克的发生率明显上升 脓毒性休克的发生率(%) P0.05 (log10拷贝/mL) 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 9 细菌负荷量影响需机械通气的患者比例 高细菌负荷量的患者需要机械通气 的比例明显

5、高于低负荷患者 需机械通气的患者比例(%) P=0.001 数据显示，细菌负荷量每增加 1log10拷贝/mL，需机械通气的患 者比例则增加2倍 log10拷贝/mL 可能需机械通气的患者比例 3/66 9/27 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 10 细菌负荷量影响患者预后 高细菌负荷量的患者出现AKI和ARDS的比例明显高于低负荷患者 患者百分比(%) P0.001 10/66 15/27 1/66 5/27 P=0.007 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 11 细菌负荷量影响患者死亡率 患者死亡

6、率(%) P=0.012 4/66 7/27 高细菌负荷量的患者死亡率明显高于低负荷患者 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 12 研究结论 随着细菌负荷量的增加，感染患者出现脓毒性休克的比例 及需机械通气的比例明显上升 感染患者细菌负荷量影响患者预后：高细菌负荷量的患者 出现AKI、ARDS的比例及死亡率明显高于低负荷患者 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 13 脑膜炎球菌感染疾病严重程度与细菌负荷量相关 3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 20

7、09; 48:58794 MI: 5.835 14 研究简介 研究目的 评估脑膜炎奈瑟菌细菌负荷量与感染患者住院时间的相关性 以及影响患者死亡风险的高危因素 研究方法 一项为期3年的临床研究，患者均为脑膜炎奈瑟菌感染的住 院患者 细菌负荷量检测：采用rt-PCR技术测定血标本中脑膜炎奈瑟 菌的细菌负荷量 评估宿主因素(如年龄、细菌负荷量等)对患者死亡率的影响 3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794 15 细菌负荷量影响患者预后 研究显示：细菌负荷量与患者住院时间、肾透析以及肢体缺失或皮肤移 植密切相关 细菌负荷

8、量(log10拷贝/mL) 是 否 是 否 是 否 P0.001 P0.001P=0.001 3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794 N=504 16 细菌负荷量影响患者死亡率 死亡组患者的细菌负荷量明显高 于存活组患者 细菌负荷量(log10拷贝/mL) P0.001 n=950 n=95 多因素回归分析显示：随着细菌 负荷量的增加，患者死亡风险明 显上升 变量 优势比 (95%CI) P值 年龄 (每增加1岁) 1.04 (1.021.06) 0.001 细菌负荷量 (每增加1log10 拷贝/mL) 2.

9、04 (1.532.71) 1288644256 PAB-CS7SHV-70.030.032561,02481281,0241,024264 PAB-C43TEM-430.030.06641,0241321612824 PAB-C12TEM-120.030.0632512412821628 PAB-C10TEM-100.030.032561,024412812851222 PAB-C-4TEM-40.030.03321284128326424 PAB-C3TEM-30.030.06322564128163224 研究显示，碳青霉烯类不存在接种物效应，三代和四代头孢菌素、单环内酰胺类及 内酰胺类

10、/内酰胺酶抑制剂均存在接种效应 碳青霉烯类：美罗培南；三代头孢：头孢他啶；四代头孢：头孢吡肟；单环内酰胺类：氨曲南； 内酰胺类/内酰胺酶抑 制剂：哌拉西林/他唑巴坦 接种效应的定义：在高接种菌量时(5*107CFU/ml) MIC值比标准接种菌量时(5*105CFU/ml)升高8倍 头孢菌素对大多数产ESBL肠杆菌显示接种物效应 5.吴娜等.中国感染与化疗杂志.2011;11(1):31-35 内酰胺类/内酰 胺酶抑制剂 三代头孢四代头孢碳青霉烯 测定不同抗菌药物对22株产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌在标准接种菌量(5*105CFU/ml)及高接种菌量(5*107CFU/ml) 的MIC值

11、，评估其接种效应 碳青霉烯类：美罗培南；三代头孢：头孢他啶；四代头孢：头孢吡肟； 内酰胺类/内酰胺酶抑制剂：哌拉西林/他唑巴坦 显示接种效应的菌株比例 头孢菌素对40-87%产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌显示接种效应 存在接种物效应的抗菌药物 治疗敏感或中介菌株感染时临床治疗失败率高 治疗失败率(%) 对32例产ESBL肠杆菌菌血症患者的调查分析，体外药敏试验显示，致病菌株对头孢菌素(头孢噻肟、头孢三嗪、头孢唑肟、 头孢吡肟、头孢他定)敏感或中介 6.PATERSON DL et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):2206221

12、2 头孢菌素治疗产ESBL菌株感染时，虽然药敏试验显示敏感但治疗失败率高 25 随着MIC值的增加， 头孢菌素治疗产ESBL肠杆菌感染的失败率逐渐上升 治疗失败率(%) 虽然药敏试验显示敏感(MIC8g/ml)，但随着MIC值的增加，头孢菌素治疗 产ESBL肠杆菌感染的失败率逐渐上升 6.PATERSON DL et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):22062212 对32例产ESBL肠杆菌菌血症患者的调查分析，体外药敏试验显示，致病菌株对头孢菌素(头孢噻肟、头孢三嗪、头孢唑肟、 头孢吡肟、头孢他定)敏感或中介 3/11 1/3

13、2/3 6/6 采用头孢菌素治疗， 增加产ESBL肠杆菌感染患者治疗失败率 采用头孢吡肟治疗，近1/3的产ESBL肠杆菌感染患者治疗失败 百分比(%) 一项多中心、随机对照研究，对其中23例产ESBL肠杆菌院内肺炎患者的亚群分析 N=23 4/130/10 7.Zanetti G et al. ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY. 2003;34423447 10/109/13 头孢菌素治疗产ESBL菌株感染，患者病死率高 8.NY Lee, WC Ko, PR Hsueh. Diagn Microbiol Infect Dis (accept) 碳青霉烯 非碳青霉烯 非头孢菌素 累积存活率 时间(天) 头孢菌素 累积存活率 时间(天) 碳青霉烯类治疗产ESBL菌株感染，患者30天内存活率在90%左右 但是，采用头孢菌素治疗产ESBL菌株感染，患者30天内存活率50% 28 u ESBLsESBLs u