DNA重组技术的基本工具整理PPT学习教案

1、会计学1 DNA重组技术的基本工具整理重组技术的基本工具整理PPT课件课件 设想二设想二 第1页/共35页 这些定向改造基因的设想这些定向改造基因的设想 能实现吗？能实现吗？ 基因工程基因工程 经过多年的努力，科学家终于在经过多年的努力，科学家终于在2020 世纪世纪7070年代创立了可以定向改造生年代创立了可以定向改造生 物的新技术物的新技术 第2页/共35页 专题一专题一 基因工程基因工程 第3页/共35页 第4页/共35页 抗虫棉的抗虫棉的培育有哪些培育有哪些关键步骤关键步骤 ？ 第5页/共35页 第6页/共35页 第7页/共35页 DNA DNA 重组技术的基本工具重组技术的基本工具

2、1-1 DNA1-1 DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具 “分子手术刀分子手术刀” 限制酶限制酶 “分子缝合针分子缝合针” DNADNA连接酶连接酶 “分子运输车分子运输车” 基因进入受体细胞的载体基因进入受体细胞的载体 第8页/共35页 黏性末端黏性末端 平末端平末端 4 4、切割方式：、切割方式：错切和平切错切和平切 第9页/共35页 A T G C A T G C 限制酶切割磷酸二酯键限制酶切割磷酸二酯键 第10页/共35页 第11页/共35页 1 1、大肠杆菌的一种限制酶（大肠杆菌的一种限制酶（ EcoR)EcoR)能识别能识别GAATTCGAATTC序列，并在序列，并在G G

3、 和和A A之间切开形成之间切开形成黏性黏性末端。末端。 2 2、SmaSma能识别能识别CCCGGGCCCGGG序列，序列， 并在并在C C和和G G之间切割形成之间切割形成平平末端末端 。 常见的两种限制酶 第12页/共35页 黏性末端黏性末端 黏性末端黏性末端 第13页/共35页 第14页/共35页 第15页/共35页 第16页/共35页 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶

4、切用同种限制酶切 割割 第17页/共35页 A T G C A T G C 连接酶连接连接酶连接磷酸二酯键磷酸二酯键 DNADNA连接酶的作用过程：连接酶的作用过程： 二、分子缝合针二、分子缝合针DNA连接酶连接酶 第18页/共35页 T 1 23 4 5 1 2 3 4 5 A 第19页/共35页 作用部位：作用部位： （扶手）（扶手） （梯子）（梯子） 第20页/共35页 连接连接黏性黏性末端末端 连接连接黏性黏性末端和末端和平平末端末端 分类分类 作用作用 E.coli DNA连接酶连接酶 连接酶种类：连接酶种类： T4DNA连接酶连接酶 第21页/共35页 DNA聚合酶聚合酶和和DNA

5、连接酶有何相同点连接酶有何相同点 和不同点？和不同点？ DNA连接酶连接酶DNA聚合酶聚合酶 连接连接DNA链链 及参与的生理及参与的生理 过程或应用过程或应用 连接部位连接部位 双链双链 基因工程基因工程 在两在两DNADNA片片 断断之间形成之间形成 磷酸二脂键磷酸二脂键 单链单链 DNADNA的复制的复制 将将单个单个核苷酸加核苷酸加 到已存在的核酸到已存在的核酸 片断片断33末端形成末端形成 磷酸二脂键磷酸二脂键 第22页/共35页 1 1、基因工程的载体被喻为、基因工程的载体被喻为：分子运输车分子运输车 2 2、基因工程的载体来源、基因工程的载体来源： 作为基因工程的载体需要怎样的条

6、件呢？作为基因工程的载体需要怎样的条件呢？ 第23页/共35页 第24页/共35页 第25页/共35页 第26页/共35页 基因拼接技术基因拼接技术 DNA重组技术重组技术 基因基因 修饰改造修饰改造 定向地定向地 第27页/共35页 2、DNA 重组技术的基本工具重组技术的基本工具 “分子手术刀分子手术刀” “分子缝合针分子缝合针” “分子运输车分子运输车” 限制（性核酸内切）酶限制（性核酸内切）酶 DNA连接酶连接酶 基因进入受体细胞的载体基因进入受体细胞的载体 第28页/共35页 原核生物中分离纯化出来原核生物中分离纯化出来 特定的核苷酸序列特定的核苷酸序列 磷酸二酯键磷酸二酯键 黏性末端黏性末端 平末端平末端 第29页/共35页 1、种类：、种类： 2、作用部位：、作用部位： 两类两类 连接黏性末连接黏性末 端端 Ecoli DNA连接酶连接酶 T4 DNA连接酶连接酶 磷酸二酯键磷酸二酯键 连接黏性末端和平末端连接黏性末端和平末端 第30页/共35页 质粒质粒 噬菌体衍生物噬菌体衍生物 动植物病毒动植物病毒 天然质粒天然质粒 人工改造人工改造 的的 能自我复制；有切割位点；有遗传标记基因；对受体细能自我复制；有切割位点；有遗传标记基因；对