动物细胞融合.ppt

1、2021/3/111 专题二细胞工程专题二细胞工程 乌苏高二生物乌苏高二生物 2021/3/112 动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞融合 核移植技术核移植技术 动物动物 细胞细胞 工程工程 常用常用 技术技术 胚胎移植技术胚胎移植技术 单克隆抗体技术单克隆抗体技术 2021/3/113 细胞贴壁过程 2021/3/114 2021/3/115 2021/3/116 2021/3/117 动物细胞能否融合呢？动物细胞能否融合呢？ 细胞细胞A A细胞细胞B B 杂种杂种 细胞细胞 细胞细胞A A细胞细胞B B细胞细胞B B细胞细胞A A细胞细胞B B细胞细胞A A细胞细胞B B 杂种

2、杂种 细胞细胞 细胞细胞A A细胞细胞B B细胞细胞A A细胞细胞B B 杂种杂种 细胞细胞 细胞细胞A A细胞细胞B B 2021/3/118 资料 太空中的太空中的“婚礼婚礼” 2003年1月5日，“神舟”四号准备着陆。这次历时 6天零18个小时的太空飞行，开展了多项在轨研究，其 中有一项被媒体描述成“太空婚礼”的生物实验。不过， “婚礼”中的“新郎”和“新娘”是一些体细胞：动物 细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，植物细 胞“新人”是有液泡的黄花烟草原生质体和脱液泡的革 新一号烟草原生质体。作为“新房”的是一个黑色的小 盒子-电融合仪。这是科技工作者在空间微重力条件 下进行的细胞融

3、合实验。160min后，中国首批“太空 娃娃”终于顺利诞生。 2021/3/119 一、动物细胞融合一、动物细胞融合 1.1.概念：概念： 2.2.结果：结果： 3.3.原理：原理： 4.4.诱导方式诱导方式 指两个或多个动物细胞结合形成一个指两个或多个动物细胞结合形成一个 细胞的过程。细胞的过程。 形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 物理法：离心、振动、电激物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEG)PEG) 生物法：灭活的病毒生物法：灭活的病毒 2021/3/1110 5.5.过程：过程： 注意：注意：动物细胞的融合也需要把多个两种

4、动物细胞的融合也需要把多个两种 细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛 选杂交细胞选杂交细胞 细胞细胞A细胞细胞B 杂种细胞杂种细胞 灭活的病毒灭活的病毒 物理法、化学法物理法、化学法 仙台病毒仙台病毒 疱疹病毒疱疹病毒 新城鸡瘟病毒新城鸡瘟病毒 2021/3/1111 细胞核细胞核 病毒颗粒病毒颗粒 细胞核细胞核 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 病毒颗粒病毒颗粒 黏附在细黏附在细 胞表面胞表面 病毒颗病毒颗 粒穿通粒穿通 细胞膜细胞膜 细胞膜连接细胞膜连接 结束的标志结束的标志 2021/3/1112 6.6.意义：

5、意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交 （种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7. 7. 应用：应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗 体体 2021/3/1113 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合 细胞融合原理细胞融合原理 细胞融合的方法细胞融

6、合的方法 诱导方法诱导方法 用途用途 2021/3/1114 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合 细胞融合原理细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞融合的方法细胞融合的方法 诱导方法诱导方法 用途用途 2021/3/1115 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合 细胞融合原理细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性细胞膜的流动性

7、细胞融合的方法细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导去除细胞壁后诱导 原生质体融合原生质体融合 使细胞分散后诱使细胞分散后诱 导细胞融合导细胞融合 诱导方法诱导方法 用途用途 2021/3/1116 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合 细胞融合原理细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞融合的方法细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导去除细胞壁后诱导 原生质体融合原生质体融合 使细胞分散后诱使细胞分散后诱 导细胞融合导细胞融合 诱导方法诱导方法物理（离心、振荡、物

8、理（离心、振荡、 电刺激）电刺激） 化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇） 物理、化学方法物理、化学方法 （同左）（同左） 灭活的病毒灭活的病毒 用途用途 2021/3/1117 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合 细胞融合原理细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞融合的方法细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导去除细胞壁后诱导 原生质体融合原生质体融合 使细胞分散后诱使细胞分散后诱 导细胞融合导细胞融合 诱导方法诱导方法物理（离心、振荡、物理（离心、振荡、 电

9、刺激）电刺激） 化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇） 物理、化学方法物理、化学方法 （同左）（同左） 灭活的病毒灭活的病毒 用途用途获得杂种植株获得杂种植株制备单克隆抗体制备单克隆抗体 2021/3/1118 1.1.什么是抗体？什么是抗体？ 2.2.抗体是由何种细胞产生的？抗体是由何种细胞产生的？ 抗体是具有免疫作用的蛋白质。抗体是具有免疫作用的蛋白质。 B B淋巴细胞受抗原刺激后，增殖分化为淋巴细胞受抗原刺激后，增殖分化为 浆细胞，浆细胞可以产生抗体。浆细胞，浆细胞可以产生抗体。 问问 题题 2021/3/1119 1 1）. . 每一个每一个B B淋巴细胞只分泌一种淋巴细胞只分泌一种 特异性

10、抗体。特异性抗体。 2 2）. .每种抗体只能与特定的抗原发每种抗体只能与特定的抗原发 生结合反应。生结合反应。 3、抗体有哪些特点？、抗体有哪些特点？ 4 4、传统的抗体生产方法及缺陷是什、传统的抗体生产方法及缺陷是什 么？么？ 问问 题题 2021/3/1120 常规抗体的缺陷常规抗体的缺陷 抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯 筛选单一浆细胞筛选单一浆细胞 特异性差、纯度低；特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏产量低、反应不够灵敏 浆细胞浆细胞 抗体抗体动物体动物体 刺激刺激 抗原抗原 不能增殖产生大量抗体不能增殖产生大量抗体 2021/3/1121 5、怎样才能获得单克隆抗体？、怎样才能

11、获得单克隆抗体？ 提示提示1 1：仅用细胞培养技术可行吗？仅用细胞培养技术可行吗？ 提示提示2 2：我们所学的哪种细胞是可以无我们所学的哪种细胞是可以无 限增殖的？限增殖的？ 提示提示3 3：有什么方法能使有什么方法能使B B细胞产生抗体细胞产生抗体 的能力和肿瘤细胞无限增殖能的能力和肿瘤细胞无限增殖能 力同时具备呢？力同时具备呢？ 2021/3/1122 5、怎样才能获得单克隆抗体？、怎样才能获得单克隆抗体？ 设计方案：设计方案： 一个一个B B淋巴细胞淋巴细胞 只分泌一种特异性抗体只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖能无限增殖 杂交细胞杂交细胞 既能产生一种特异性

12、既能产生一种特异性 抗体，又能无限增殖抗体，又能无限增殖 2021/3/1123 二、单克隆抗体二、单克隆抗体 由单个由单个B B淋巴细胞经过无性繁殖（克淋巴细胞经过无性繁殖（克 隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞 群所产生的群所产生的化学性质单一、特异性强化学性质单一、特异性强的抗体的抗体 称为单克隆抗体。称为单克隆抗体。 1 1、单克隆抗体的概念、单克隆抗体的概念 2021/3/1124 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 单克隆抗体单克隆抗体 2 2、单克隆抗体制备过程、单克隆抗体制备过程 筛选筛选, ,继续培养继续培养 足够数量的、能产生足够数量的、能产生

13、特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群 细胞培养细胞培养 细胞融合、筛选细胞融合、筛选 骨髓瘤骨髓瘤 细胞细胞 体体 外外 培培 养养 注注 射射 到到 小小 鼠鼠 腹腹 腔腔 B B淋巴淋巴 细胞细胞 注射抗原注射抗原 具有两个亲本的特性，具有两个亲本的特性， 即能迅速大量增殖，即能迅速大量增殖， 又能产生足够数量的又能产生足够数量的 单一抗体。单一抗体。 2021/3/1125 免疫原理，细胞融合原理和动物细免疫原理，细胞融合原理和动物细 胞培养原理胞培养原理 1.1.本过程利用了哪些原理？本过程利用了哪些原理？ 2.2.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B B细胞融合？细胞融

14、合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双 亲细胞的遗传物质，不仅具有亲细胞的遗传物质，不仅具有B淋巴细胞淋巴细胞 分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增分泌特异性抗体的能力，而且还有无限增 殖的本领，因而可获得大量单克隆抗体殖的本领，因而可获得大量单克隆抗体 思考：思考： 2021/3/1126 三、单克隆抗体的应用三、单克隆抗体的应用 单克隆抗体的单克隆抗体的优点：优点：特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 2、用于、用于 运载药物：运载药物：制成制成“生物导弹生物导弹” 治疗疾病：治疗疾病：主要用于癌症治疗主要用于癌症治疗 优点：优点：准确、高效、简易、快速准确

15、、高效、简易、快速 优点：优点：疗效高、毒副作用小疗效高、毒副作用小 1、作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与、作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与 抗原特异性结合抗原特异性结合 2021/3/1127 小结小结 两个过程两个过程 动物细胞融合过程动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程 三个三个“一一” 一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒 一个新细胞杂交瘤细胞一个新细胞杂交瘤细胞 一个优势单克隆抗体特异性一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势强、灵敏度高的优势 2021/3/1128 1、动物细胞工程技术的基础是：（）、动物细胞工程技术的基础是：（） A动物细胞融合动物细胞融合 B胚胎移植胚胎移植 C动物细胞培养动物细胞培养 D核移植核移植 2021/3/1129 在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正 确的是（）确的是（） A结果是相同的结果是相同的 B杂种细胞的形成过程基本相同杂种细胞的形成过程基本相同 C操作过程中酶的作用相同操作过程中酶的作用相同 D诱导融合的手段相同诱导融合的手段相同 2021/3/1130 豆丁巴巴，发现在线分享文档 价值的平台 http:/ 编辑：