交叉配血试验临床应用

1、交叉配血试验交叉配血试验 交叉配血试验交叉配血试验 一、实验目的一、实验目的 二、实验原理二、实验原理 三、实验步骤三、实验步骤 四四、方法学局限性、方法学局限性 五、临床意义五、临床意义 六六、临床新进展、临床新进展 实验目的实验目的 n掌握凝聚胺交叉配血试验的原理、方法、掌握凝聚胺交叉配血试验的原理、方法、 结果判读结果判读 n熟悉交叉配血试验的临床意义熟悉交叉配血试验的临床意义 实验原理实验原理 交叉配血试验分两管：交叉配血试验分两管： 主侧：受血者血清主侧：受血者血清+供血者红细胞供血者红细胞 次侧：供血者血清次侧：供血者血清+受血者红细胞受血者红细胞 实验原理实验原理 红细胞表面带有

2、大量的负电荷，悬浮在电解红细胞表面带有大量的负电荷，悬浮在电解 质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散 的双层离子云所围绕，形成的双层离子云所围绕，形成zeta电位。电位。 实验原理实验原理 n凝聚胺技术首先利用低离子溶液（凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低）降低 介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云，介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云， 如有红细胞抗原相应的血清抗体存在，则可促如有红细胞抗原相应的血清抗体存在，则可促 进红细胞抗原与血清抗体的特异结合。进红细胞抗原与血清抗体的特异结合。 实验原理实验原理 n再加入凝聚胺溶液，再加入凝

3、聚胺溶液， 溶解后产生很多正电溶解后产生很多正电 荷，中和红细胞表面荷，中和红细胞表面 带有的负电荷，红细带有的负电荷，红细 胞胞zeta电位降低，缩电位降低，缩 短红细胞距离，无论短红细胞距离，无论 是否有红细胞抗原相是否有红细胞抗原相 应的血清抗体存在，应的血清抗体存在， 主、次侧管均可产生主、次侧管均可产生 非特异性聚集。非特异性聚集。 实验原理实验原理 n最后加入悬浮液，具有中和凝聚胺阳离子的作最后加入悬浮液，具有中和凝聚胺阳离子的作 用，使正常红细胞的非特异性凝集散开，红细用，使正常红细胞的非特异性凝集散开，红细 胞抗原与相应血清抗体的特异性凝集仍然存在。胞抗原与相应血清抗体的特异性

4、凝集仍然存在。 实验步骤实验步骤 一、取出供血者血浆及红细胞，并将冰冻血一、取出供血者血浆及红细胞，并将冰冻血 浆放入浆放入37温箱解冻温箱解冻15分钟。分钟。 实验步骤实验步骤 二二、受血者抗凝全血标本离心备用、受血者抗凝全血标本离心备用 3000r/min，5min 实验步骤实验步骤 三、将受血者血浆三、将受血者血浆2滴加入主侧管，红细胞滴加入主侧管，红细胞 1滴加入次侧管滴加入次侧管 实验步骤实验步骤 四、剪下供血者血袋上的血辫，将供血者红四、剪下供血者血袋上的血辫，将供血者红 细胞细胞1滴加入主侧管，血浆滴加入主侧管，血浆2滴加入次侧管滴加入次侧管 实验步骤实验步骤 五、在主次侧各加入

5、低离子溶液各五、在主次侧各加入低离子溶液各0.65毫毫 升，混合均匀。升，混合均匀。 实验步骤实验步骤 六、在主、次侧管分别加入六、在主、次侧管分别加入2滴凝聚胺溶液，滴凝聚胺溶液， 混匀后混匀后3400r/min离心离心10秒，弃去上清，秒，弃去上清， 观察红细胞的非特异凝集现象。观察红细胞的非特异凝集现象。 弃 上 清 实验步骤实验步骤 七、最后各加入悬浮液七、最后各加入悬浮液2滴，轻轻转动试管滴，轻轻转动试管 混匀并观察结果。混匀并观察结果。 实验步骤实验步骤 八、如果在八、如果在60秒内，主、侧管凝集均散开，秒内，主、侧管凝集均散开， 说明是由凝聚胺溶液引起的非特异性凝集，说明是由凝聚

6、胺溶液引起的非特异性凝集， 配血相合。配血相合。 实验步骤实验步骤 九、如果凝集不散开，则为红细胞抗原抗体九、如果凝集不散开，则为红细胞抗原抗体 结合的特异性反应，配血结果不相合，如有结合的特异性反应，配血结果不相合，如有 疑问，可进一步镜检确认。疑问，可进一步镜检确认。 实验步骤实验步骤 十、同时对受血者十、同时对受血者ABO和和RH血型使用血型使用 玻片法进行复查。玻片法进行复查。 实验步骤实验步骤 十一、对受血者十一、对受血者ABO和和RH血型使用玻血型使用玻 片法进行复查。片法进行复查。 临床意义临床意义 一、保证输血安全一、保证输血安全 二、发现亚型和不规则抗体二、发现亚型和不规则抗体 方法学局限性方法学局限性 对罕见不规则抗体抗对罕见不规则抗体抗K敏感性低！敏感性低！ 临床新进展临床新进展 n流式细胞术流式细胞术 n基因分型技术基因分型技术 n卡式微柱凝胶法卡式微柱凝胶法 卡式微柱凝胶法卡式微柱凝胶法 卡式微柱凝胶法卡式微柱凝胶法 戴安娜全自动配血系统戴安娜全自动配血系统 n卡式微柱凝胶法可实现自动检测卡式微柱凝胶法可实现自动检测 二 实验原理 n 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在 ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种 抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型 鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清