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文档简介
1、CK及其同工酶的特点及其同工酶的特点 磷酸肌酸激酶磷酸肌酸激酶(CK)(CK)是由脑型(是由脑型(brainbrain,B B) 和肌型(和肌型(musclemuscle,M M)两种亚基组成的二聚)两种亚基组成的二聚 体,形成三种同工酶:体,形成三种同工酶:CK-BBCK-BB、CK-MBCK-MB、CK-CK- MMMM。 CK及其同工酶的特点及其同工酶的特点 CK-BBCK-BB主要存在于脑组织中;主要存在于脑组织中; CK-MBCK-MB和和CK-MMCK-MM主要存在于各种肌肉组织中,主要存在于各种肌肉组织中, 骨骼肌中骨骼肌中98%98%99%99%是是CK-MMCK-MM,1%1
2、%2%2%是是CK-CK- MBMB;心肌中;心肌中CKCK含量仅次于骨骼肌和脑,其含量仅次于骨骼肌和脑,其 中约中约80%80%是是CK-MMCK-MM,15%15%25%25%是是CK-MBCK-MB,CK-CK- MBMB在心肌的相对含量为所有组织中最高。在心肌的相对含量为所有组织中最高。 CK-MB测定方法及原理测定方法及原理 方法:免疫抑制法。方法:免疫抑制法。 原理:原理: 1) CK-MM + CK-M抗体 CK-MM被抑制 CK-MB + CK-M抗体 50CK-MB被抑制 2)无活性的CK-MB 有活性的CK-MB 3)磷酸肌酸 + Mg-ADP 肌酸 + ATP D-葡萄糖
3、 + ATP 葡萄糖-6-磷酸 + ADP 葡萄糖6-磷酸 + NADP+ G-6-PDH 6-磷酸葡萄糖酸 + NADPH + H+ HK:己糖激酶, G-6-PDH:葡萄糖6-磷酸脱氢酶 N-乙酰半胱氨酸 HK CK-MB CK-MB测定方法及原理测定方法及原理 抑制抑制CK-MMCK-MM、CK-MBCK-MB中中M M亚基后,测定亚基后,测定B B亚基亚基 活性,活性, 由于血清中由于血清中CK-BBCK-BB含量极少(含量极少( 5U/L)5U/L)可忽略不计,测得的可忽略不计,测得的B B亚基活性乘以亚基活性乘以2 2, 间接计算出间接计算出CK-MBCK-MB的活性。的活性。 抗
4、抗M CK M M CK M B CK M M CK M B 抗抗M 抗抗M 抗抗M CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 临床检验中常发现临床检验中常发现CK-MBCK-MB活性异常升高,其活性异常升高,其 数值甚至超过总数值甚至超过总CKCK活性的情况,从逻辑上活性的情况,从逻辑上 不好解释,给临床诊断造成困惑。分析其不好解释,给临床诊断造成困惑。分析其 中原因,有以下几种可能:中原因,有以下几种可能: CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 1.1. CK-BBCK-BB升高升高 某些病理情况下某些病理情况下CK-BBCK-BB活
5、性升高,应用本法测定的活性升高,应用本法测定的 CK-MBCK-MB活性实际上等于活性实际上等于2 2倍倍CK-BBCK-BB与实际与实际CK-MBCK-MB活性活性 之和。导致之和。导致CK-BBCK-BB活性升高的疾病有:胃癌活性升高的疾病有:胃癌, ,肺癌肺癌, , 绞窄性肠梗阻绞窄性肠梗阻, ,急性心肌梗死急性心肌梗死, ,各种心血管手术各种心血管手术, ,前前 列腺癌列腺癌, ,肿瘤广泛转移时等;在脑损伤时,血脑屏肿瘤广泛转移时等;在脑损伤时,血脑屏 障通透性增加,其血清障通透性增加,其血清CK-BBCK-BB也可明显升高。也可明显升高。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增
6、高的原因分析及临床意义 2.2. 巨型巨型CKCK(M-CKM-CK)的出现:)的出现: 血清中的巨型血清中的巨型CKCK有两种:巨有两种:巨CKCK1 1、巨、巨CKCK2 2 。此两。此两 种巨种巨CKCK不可被抗不可被抗CK-MCK-M亚基抗体抑制,导致亚基抗体抑制,导致CK-CK- MBMB活力的假性升高(假阳性)。活力的假性升高(假阳性)。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 巨巨CKCK1 1: 巨巨CKCK1 1是是CKCK同工酶与血中免疫球蛋白聚合的复合物,同工酶与血中免疫球蛋白聚合的复合物, 多多为为CK-BBCK-BB与与IgGIgG或或Ig
7、AIgA的复合物,也有少数为的复合物,也有少数为CK-MMCK-MM与与 IgGIgG或或IgAIgA的复合物,的复合物,巨巨CKCK1 1在妇女和老年人中发现,在妇女和老年人中发现, 多见于风湿、心脏病和肌炎患者。多见于风湿、心脏病和肌炎患者。一般认为一般认为CKCK1 1是良是良 性现象,与自身免疫性疾病无明显关系,发现巨性现象,与自身免疫性疾病无明显关系,发现巨CKCK1 1 的患者血清中免疫球蛋白及其组分并无明显的改变。的患者血清中免疫球蛋白及其组分并无明显的改变。 甚至有的在明显健康人血中也检出了巨甚至有的在明显健康人血中也检出了巨CKCK1 1。 CK-MB假性增高的原因分析及临床
8、意义假性增高的原因分析及临床意义 巨巨CKCK2 2: 巨巨CKCK2 2是一种低聚的线粒体是一种低聚的线粒体CKCK,又称,又称CK-MtCK-Mt( mitochonriamitochonria CK-Mt CK-Mt),存在于细胞线粒体膜),存在于细胞线粒体膜 上,当线粒体崩解时,线粒体膜的小碎片进入上,当线粒体崩解时,线粒体膜的小碎片进入 血液,故血液,故CK-MtCK-Mt成低聚状态。成低聚状态。它与恶性肿瘤密它与恶性肿瘤密 切相关,切相关, 可认为是潜在的肿瘤标志物,常见可认为是潜在的肿瘤标志物,常见 于恶性肿瘤、成人肝病(如肝硬化)及儿童心于恶性肿瘤、成人肝病(如肝硬化)及儿童心
9、 肌病。肌病。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 3.3. 溶血:溶血: 红细胞中不含红细胞中不含CKCK及及CK-MBCK-MB,但红细胞中含有,但红细胞中含有ADK(ADK( 腺苷酸激酶腺苷酸激酶) ),此物质能直接参与,此物质能直接参与CKCK的第二步反的第二步反 应,使应,使NADPNADP+ +还原至还原至NADPHNADPH, 引起引起CKCK及及CK-MBCK-MB假阳假阳 性结果。一般厂家会在试剂中加人控制剂性结果。一般厂家会在试剂中加人控制剂5-5-磷酸磷酸 二腺苷来抑制二腺苷来抑制ADKADK的干扰,但抑制率仅为的干扰,但抑制率仅为90%9
10、0% 95%95%,对正常标本而言只升高不到,对正常标本而言只升高不到5%5%可视为允许可视为允许 误差,但对极端标本其误差值可超出线性范围。误差,但对极端标本其误差值可超出线性范围。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 3.3. 溶血:溶血:(续)(续) 临床上大部分心梗病人为危重病人,多次反复抽临床上大部分心梗病人为危重病人,多次反复抽 血可造成血管壁破坏,而且大量集中药物治疗,血可造成血管壁破坏,而且大量集中药物治疗, 容易引起各种不明原因的标本溶血,特别是儿科容易引起各种不明原因的标本溶血,特别是儿科 的心肌炎患者,其标本微溶血就可导致结果高度的心肌炎患
11、者,其标本微溶血就可导致结果高度 误差。误差。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 4.4. 生理因素:生理因素: 由于儿童的生理因素,其血清中由于儿童的生理因素,其血清中CK-BBCK-BB含量可高含量可高 于成人,于成人,因此用免疫抑制法测得的因此用免疫抑制法测得的CK-MBCK-MB活性也活性也 就随之增高。如果直接引用成人参考值标准,势就随之增高。如果直接引用成人参考值标准,势 必会造成很多假阳性报告。有学者建议,临床对必会造成很多假阳性报告。有学者建议,临床对 儿童血清儿童血清CK-MBCK-MB活性,不要直接引用成人标准,活性,不要直接引用成人标准,
12、 以免造成误诊。以免造成误诊。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 5.5. 其它影响因素:其它影响因素: l 各种骨骼肌疾病和中枢神经系统疾病各种骨骼肌疾病和中枢神经系统疾病 l 甲状腺功能紊乱甲状腺功能紊乱 点击查看相关内容点击查看相关内容 点击查看相关内容点击查看相关内容 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 l 各种骨骼肌疾病和中枢神经系统疾病各种骨骼肌疾病和中枢神经系统疾病 某些骨骼肌病尤其是肾衰时的尿毒性肌病者,出某些骨骼肌病尤其是肾衰时的尿毒性肌病者,出 现心肌损伤样现心肌损伤样CKCK和和CK-MBCK-MB改变,称
13、胎儿样逆转(改变,称胎儿样逆转( fetal reversionfetal reversion)。产妇因分娩挤压胎盘,胎)。产妇因分娩挤压胎盘,胎 儿血液回流至母体以其他肌肉损伤,都会出现心儿血液回流至母体以其他肌肉损伤,都会出现心 肌损伤样肌损伤样CKCK和和CK-MBCK-MB改变。改变。 返返 回回 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 l 甲状腺功能紊乱甲状腺功能紊乱 甲低病人血清甲低病人血清CKCK和和CK-MB CK-MB 都有不同程度的增高。都有不同程度的增高。 而甲亢病人血清而甲亢病人血清CKCK和和CK-MBCK-MB显著降低,发生心肌显著降低,
14、发生心肌 损伤时,不会显著升高。因此,用血清损伤时,不会显著升高。因此,用血清CKCK和和CK-CK- MB MB 诊断诊断AMIAMI时,甲低者易出现假阳性,甲亢者易时,甲低者易出现假阳性,甲亢者易 漏诊。漏诊。 返返 回回 CK-MB假性增高的鉴别方法假性增高的鉴别方法 免疫抑制法测定免疫抑制法测定CK-MBCK-MB可作为一项初筛试验,在可作为一项初筛试验,在 排除排除AMIAMI后,如果后,如果CK-MBCK-MB超过总超过总CK30%CK30%以上,一般以上,一般 要注意鉴别要注意鉴别CK-MBCK-MB的假性升高的假性升高( (假阳性假阳性) ),同时要,同时要 警惕巨警惕巨CKC
15、K的存在,应进一步做的存在,应进一步做电泳法电泳法鉴定鉴定CKCK同工同工 酶,或用酶,或用免疫法测定免疫法测定CK-MBCK-MB质量质量,以明确病因及,以明确病因及 诊断。诊断。 CK-MB假性增高的鉴别方法假性增高的鉴别方法 CKCK同工酶及巨同工酶及巨CKCK的电泳区带位置示意图的电泳区带位置示意图 CK-BB CK-MB CK-MM 巨CK1 巨CK2 CK-MB假性增高的鉴别方法假性增高的鉴别方法 CKCK同工酶及巨同工酶及巨CKCK的电泳图谱(实例)的电泳图谱(实例) CK及其同工酶的特点及其同工酶的特点 CK-BBCK-BB主要存在于脑组织中;主要存在于脑组织中; CK-MBC
16、K-MB和和CK-MMCK-MM主要存在于各种肌肉组织中,主要存在于各种肌肉组织中, 骨骼肌中骨骼肌中98%98%99%99%是是CK-MMCK-MM,1%1%2%2%是是CK-CK- MBMB;心肌中;心肌中CKCK含量仅次于骨骼肌和脑,其含量仅次于骨骼肌和脑,其 中约中约80%80%是是CK-MMCK-MM,15%15%25%25%是是CK-MBCK-MB,CK-CK- MBMB在心肌的相对含量为所有组织中最高。在心肌的相对含量为所有组织中最高。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析及临床意义 3.3. 溶血:溶血: 红细胞中不含红细胞中不含CKCK及及CK-MBCK-
17、MB,但红细胞中含有,但红细胞中含有ADK(ADK( 腺苷酸激酶腺苷酸激酶) ),此物质能直接参与,此物质能直接参与CKCK的第二步反的第二步反 应,使应,使NADPNADP+ +还原至还原至NADPHNADPH, 引起引起CKCK及及CK-MBCK-MB假阳假阳 性结果。一般厂家会在试剂中加人控制剂性结果。一般厂家会在试剂中加人控制剂5-5-磷酸磷酸 二腺苷来抑制二腺苷来抑制ADKADK的干扰,但抑制率仅为的干扰,但抑制率仅为90%90% 95%95%,对正常标本而言只升高不到,对正常标本而言只升高不到5%5%可视为允许可视为允许 误差,但对极端标本其误差值可超出线性范围。误差,但对极端标本其误差值可超出线性范围。 CK-MB假性增高的原因分析及临床意义假性增高的原因分析
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