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文档简介
1、 化学发光检测有非常高的灵敏度,用比较简 单的设备就可对缺乏生色团和荧光团的物质 进行检测。 由于化学发光现象一般比较短暂且随时间变 化大,使用间歇式手工操作较难取得良好精 度,FIA系统却极适用于这类反应。 FI-CL分析所用装置比较简单,灵敏度高,线 性范围宽,分析结果重现性高。 1,反复改变溶液的流动方向来提高混合效 率和发射强度。 2,溶液快速通过阻力较小的方向时检测区 域相对较大的腔室会延迟最大发射的发生, 溶液混合不均匀残留在周围区域。 3,通道刻蚀在不透明的白色聚合物中并用 透明的薄片封接,将光的损失降到最小。 4,通常混合管或通道在检测区域入口之前 以便反应达到最大发射强度时在
2、光电检测器 之前,但是在反应非常迅速的化学发光反应 体系下,将溶液与反应区域合并起来或许更 为优越。 在本篇文章中,作者比较了一系列的流通池, 每个流通池都具有一个或几个上述的优势, 并将它们分别用于流动分析检测。 Flow cell A:采用传统流通池。透明的 PTFE-PFA管子(0.8mm id)盘绕薄的金属 板(3.55cm)上,直径3cm。 Flow cell B:在铝制平台上加工出具有半球 形轮廓的螺旋通道,把管子粘合在螺旋通道 之中。 Flow cell C:将通道建造在聚碳酸酯芯片上, 并用透明的环氧酯膜封合。正面具有蜿蜒形 状的通道,通道入口位于背面交汇点上方。 将镜子结合到
3、装置背面是检测器接收到更多 光信号。 Flow cell D:通道加工在乙缩醛芯片上,装 置背面没有镜子,其余与C类似。 Flow cell E:通道加工在聚四氟乙烯芯片上, 通道以蛇形排列。包含一个商业化的GloCel 检测器。溶液入口与出口在芯片背面并通过 钻孔与检测器对齐。 Flow cell F:在E的基础上进行修改,在芯片 上设置两个溶液入口,并将其位置调整在芯 片背面。 Flow cell G,H:对应E,F,用25%玻璃微球浸渍 的聚四氟乙烯制作芯片,希望能够提高装置 的透光性。 Flow cell I:在商业化的硅硼酸盐芯片上构 建螺旋形通道,并用热结合技术封合。交汇 点位于螺
4、旋通道入口的下方,镜子安装在装 置背面。 Flow cell J:与I类似,不同在于所有表面用铝箔包裹, 而不是暴露在PMT下。 试剂:“标准型”酸性高锰酸钾试剂(0.001 M高锰 酸钾溶于1%多聚磷酸钠中,并用硫酸调节pH致2.5) “增强型”酸性高锰酸钾试剂(0.0019M高 锰酸钾溶于1%多聚磷酸钠中,并用硫酸调节pH致 2.5 ,加入0.6mM硫代硫酸钠) 实验部分 FIA:采用吗啡和阿莫西林在酸性高锰酸钾中化学 发光反应,以水为载体。分别比较了在十种不同流 通池中酸性高锰酸钾在正常水平和增加酸性高锰酸 钾量两种不同情况下流通池的性能。 A是传统FIA的流动单元,由图可知,当提 高反
5、应物的量时,F,H其性能有显著提高, 作者认为反应物在检测区域混合使得反映发 出的光更易被检测器接收。 B中管子被固定在一个有反射性的平台上, 通过加快高锰酸钾的反应可提高其信号强度。 E-H使用了Gol-Cle检测器提供了一个相对廉 价的商业化选择。 F,H通道建立在用玻璃微珠浸渍过的铁氟龙 上,信号强度提高了大约23%。 D相对于其他装置有较大优越性,作者认为 这是由于用薄的透明材料的密封和检测器与 芯片位置的作用。 C,I通道构建在透明材料上,不少光在发射 过程中散失,造成检测器接收到的信号较少。 J在四周包裹一层铝箔,提高了检测器接收 的信号强度。但其信号相较于其他流通池还 是较低。 用流通池D可以得到较理想的化学发光强度, 其检出限(910-8M)率低于传统流通池 的检出限(210-7M),若增加反应试剂 量,其检出限可达到3
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