组织病理切片以及HE染色

1、精品好文档.推荐学习交流仅供学习与交流.如冇侵权请联系网站刑除谢谢1组织病理切片以及HE染色()实验原理：苏木素伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE染色)能较好地显示组织结构和细胞形态，可 用于观察、描述正常和病变组织的形态学，而且HE切片可 较长时间保存，被称为常规染色方法。(二) 实验步骤：一、制作切片1、取材、固定：取小鼠肾脏组织适当大小，并且放入盛有 固定液的小瓶中保存。2、组织的脱水、透明、浸蜡与包埋 组织固定后还需经过脱水、透明、浸蜡等过程才能制成 蜡块，进行石蜡切片。脱水是指用某些溶媒置换组织内水分 的过程。组织脱水后，必须经过一种既能与酒精相混

2、合又能 溶解石蜡的溶剂，通过这种溶剂的媒介作用，使石蜡浸入组 织块。在此过程中，因组织块中的水分被溶剂所取代，组织 块变得透亮，因此称之为透明。组织染色后也要进行透明。最常用的透明剂为二甲苯，处理时间为30min左右。组织经透明后在溶化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。用其 他浸透剂(如火棉胶、碳蜡和明胶等)渗入组织内部的过程 称为浸透或透入。为使石蜡充分渗入组织块中，常需经过3 小时的浸渍，期间需更换3次石蜡。一般用于浸蜡的石蜡熔 点为 52-56Co组织块经过浸蜡或浸透，用包埋剂（石蜡、火棉胶、碳 蜡和树脂等）包起的过程称包埋，包埋后便制成含组织的块。 这种包埋块可使组织达到一定的硬度和韧度，有利

3、于切成薄 片。石蜡包埋是病理日常工作中最常用的包埋方法。用于包 埋的石蜡熔点一般为60C左右。但在有些情况下，如某些酶 染色时，则需采用低温石蜡包埋，以保存组织内酶的活性。3. 切片、制片石蜡切片常用的切片机有轮转式切片机和平推式切片 机，以前者为多用。切片厚度一般为3-5pnio切片时先将组 织片平摊于一块玻璃上，迅速滴加30%的酒精水溶液使组织 片完全展开，再移入40C恒温热水器中。也可直接将组织切 片移入40C的恒温热水器中，待组织片完全展开后将其贴附 于载玻片上，经56-60C烤片30-60min后即可进行染色。二、HE染色1. 二甲苯脱蜡2x10 min；2. 无水乙醇洗去二甲苯2x

4、5min；3.95%、80%乙醇各10 min,自来水洗1 min （不要让急水直 接冲至载玻片上的组织），蒸馆水洗lmim4. 苏木素染色4 min,自来水洗2 min；5. 1%盐酸酒精分化20 s （镜下控制），自来水洗2 min；6. 1 %稀氨水返蓝30s （镜下控制），自来水洗2分钟，蒸锚水洗lmin；7.伊红染色90s；8.80%乙醇脱水10s, 95%酒精10s,无水乙醇5min；9. 无水乙醇lOmin；10. 二甲苯 2x10 min；11中性树胶或加拿大树胶封片。（三）实验结果：细胞核呈蓝色；细胞浆、肌肉、结缔 组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种 微生物

5、也可染成蓝色或紫蓝色。（四）实验分析：HE染色时病理学中常用的一种诊断 方法，通常将病理切片染色后再在显微镜下观察组织的病理 学变化，从而做岀病理学诊断。纸船寄母亲冰心我从不肯妄弃了一张纸，总是留着留着，叠成一只一只很小的船儿，从舟上抛下在海里。有的被天风吹卷到舟中的窗里，有的被海浪打湿，沾在船头上。我仍是不灰心地每天地叠着，总希望有一只能流到我要它到的地方去。母亲，倘若你梦中看见一只很小的白船儿，不要惊讶它无端入梦。这是你至爱的女儿含着泪叠的，万水千山，求它载着她的爱和悲哀归去。一九二三年八月二十七日雨后冰心 嫩绿的树梢闪着金光， 广场上成了一片海洋！ 水里一群赤脚的孩子， 快乐得好像神仙一样。小哥苛使劲地踩着水，把水花儿溅起多高。他喊：“妹，小心，滑！ ”说着自己就滑了一跤！他拍拍水淋淋的泥裤子，嘴里说：“糟糕糟糕！” 而他通红欢喜的脸上， 却发射出兴奋和骄傲。小妹妹撅着两条短粗的小辫，紧紧地跟在这泥裤子后面，她咬着唇儿，提着裙儿，轻轻地小心地跑，心里却希望自