RP―HPLC测定阿那曲唑的含量

1、RP HPLC测定阿那曲唑的含量【摘要】 目的 建立阿那曲唑含量测定的反相高效液相色谱（RP-HPLC ）法。方法 色谱柱 Agilent XDB-C18 柱（150 mm x 4.6mm,5 卩 m）;流动相为乙腈-水（44: 56）,流速1.0 ml/min，检测波长210 nm。结果 阿那曲唑在5.00 18.00卩g/ml范围内线性关系良好， r=0.9995。平均回收率 为99.69% , RSD为0.3% （n=6）。结论 本方法简便、准确， 可以用于阿那曲唑的定量分析。【关键词】 反相高效液相色谱；阿那曲唑；含量测定 阿那曲唑是本公司生产的抗肿瘤类原料药，其制剂是艾达（阿那曲唑片

2、） ， 主要适用于他莫昔芬及其它抗雌激素 疗法仍不能控制的绝经后妇女的晚期乳腺癌。本文参考原质 量标准 1和药典方法 2对测定阿那曲唑含量的方法进行了 研究及各项验证， 结果表明使用 RP-HPLC 方法可以简便、 准确测定阿那曲唑的含量。1 仪器与试药瑞士 Mettler Toledo XP205 电子分析天平， 美国安捷伦 公司高效液相色谱仪 Agilent1200 Series 等。阿那曲唑对照品 （批号为: 100770-200401）购于中国药 品生物制品检定所， 阿那曲唑（批号分别为:13070111，13080111， 13090111）， 试验用乙腈为色谱纯， 配制用水 为超纯

3、水。2 方法2. 1 系统适应性试验和色谱条件 色谱柱为：美国Agilent XDB C18 柱（250 mm x 4.6 mm ,5 卩 m）;流动相为：乙腈 -水（ 44：56）；流速 1.0 ml/min ；检测波长 210 nm； 柱温：30 C ；流速：1.0 ml/min。在此色谱条件下，理论板数以阿那曲唑峰计大于 2000， 溶剂不干扰测定， 此色谱条 件可行。2. 2 配制对照品溶液 称取阿那曲唑对照品适量， 用流 动相溶解并制成每1 ml含100卩g的对照品贮备液。2. 3 线性关系试验 分别精密吸取上述对照品贮备液适 量， 用流动相稀释制成浓度分别为：5、8、10、12、1

4、5、36卩g/ml的样品溶液，按上述色谱条件分别依次进样20卩l,横坐标（X）为阿那曲唑的浓度，纵坐标（丫）为峰面积积分值， 求得回归方程为： Y=60.88 X+9.859 相关系 数 r=0.9995。结果表明阿那曲唑的浓度和峰面积积分值在5.0018.00卩g/ml的浓度范围内呈良好的线性关系。2. 4 精密度试验 取阿那曲唑对照品溶液（ 0.01012 mg/ml）,进样体积为：20卩l,重复进样6次，结果阿那 曲唑峰面积 RSD 值为 0.1%。2. 5 稳定性试验 取浓度为 0.01015 mg/ml 的样品溶液， 在25 C下放置考察， 精密量取供试品溶液 20卩I,在放置 0、

5、2、4、6、8、12 h 后分别测定 1 次， 共测定 6 次， 记 录峰面积， 阿那曲唑峰面积均值为 618.17559， RSD 值为 0.4%， 结果表明供试品溶液在 12 h 内稳定。2. 6 重复性试验 取批号为 13120111的样品， 按照“ 2.8” 项下方法同法制备 6 份供试品溶液，结果阿那曲唑含量均值为 99.90% ， RSD 为 0.2%。2. 7 加样回收率试验 采用加样回收法。取已知阿那曲 唑含量的样品（ 13010111、13010211、13010311）适量， 分 别精密加入阿那曲唑对照品溶液 （0.02 mg/mI ）10 mI， 按照“2.8”项下方法同

6、法制备 6份供试液，分别依次进样20卩I， 计算得平均回收率为 99.69%， RSD 为 0.3%2. 8 样品含量测定 取本品， 精密称定适量， 置 100 mI 量瓶中， 加乙腈约 5 mI ， 振摇使阿那曲唑溶解， 加流动 相稀释至刻度，摇匀，制成每1 ml溶液中约含10卩g的溶液，用0.45卩m微孔滤膜滤过，分别依次进样20卩I,按外标法计算供试品中阿那曲唑的含量。3 小结作者分别选取了不同配置比例的流动相， 不同厂家和 规格的色谱柱进行分析验证， 验证结果表明选择最佳色谱 条件是：流动相：乙腈 -水（ 44：56）；色谱柱： Agilent XDBC18 (150 mm x 4.6 mm ,5 卩 m);柱温：30C ；流速：1.0ml/min ；波长： 210 nm。 参考文献1 国家食品药