临床检验技士-临床免疫学和免疫检验讲义25

1、第二十五章 免疫增殖性疾病及其免疫检测免疫增殖性疾病是指由于淋巴细胞异常增殖所引起的疾病。浆细胞功能异常导致免疫球蛋白异常增殖性疾病分为良性增殖病和恶性增殖病两大类疾病。第一节免疫球蛋白异常堆殖性疾病的概念及分类免疫球蛋白异常增殖性疾病是指由于浆细胞的异常增殖而导致的免疫球蛋白的异常增加，引起机体病 理损伤的一组疾病。通常多克隆增殖的免疫球蛋白多为良性反应性增殖或继发某一疾病,如肝病、结缔组织病及急性感染 等。单克隆免疫球蛋白增殖多呈恶性发展趋势,故免疫球蛋白异常增殖性疾病多专指单克隆免疫球蛋白异 常增第二节免疫球蛋白异常増殖性疾病的免疫损伤机制异常的免疫细胞增殖，不具有免疫活性,其本身将造成

2、免疫系统的直接损害或通过分泌有关物质进一 步损害正常的免疫细胞和其他组织，最终导致疾病。一、浆细胞异常增殖是指单克隆浆细胞异常增殖并伴有单克隆免疫球蛋白或其多肽链亚单位合成异常。如骨髄瘤。二、正常体液免疫抑制正常的体液免疫中，IL-4启动B细胞进入DNA合成期；IL-5促进B细胞继续增殖；IL-6促使B细胞分 化成浆细胞，及反馈抑制IL-4控制B细胞的增殖分化过程。另外，大量的浆细胞瘤分泌无活性的Ig,其Fc段与正常B细胞等有Fc受体的细胞结合，将Fc受体封 闭，影响对其他生物信息的接收，并可阻断B细胞的增殖、发冇和影响抗原提呈。三、异常免疫球蛋白增殖所造成的病理损伤单克隆的浆细胞异常增殖产生

3、大量的单克隆异常免疫球蛋白或免疫球蛋白片段，这些异常免疫球蛋白 或片段不具有正常抗体功能，但英在组织的沉淀可造成组织变性和淋巴细胞浸润，进而导致相应器官的功 能障碍。单克隆免疫球蛋白浓度过髙，甚至可以导致血液黏稠度增加，产生一系列直接或间接的病理损害。四、溶骨性病变浆细胞瘤大多伴有溶廿性破坏。患者体内髙水平IL-6是使破件细胞数量增多的重要因子，溶计性破坏 与浆细胞的恶性增殖有非常密切的关系,是计髓瘤患者疾病恶化的重要原因之一。第三节常见免疫球蛋白增殖病单克隆免疫球蛋白增殖病是指患者体内存在异常增多的单克隆免疫球蛋白的一类疾病。免疫球蛋白电 泳位豊在丙种球蛋白区域，故亦称丙种球蛋白增殖病。其产

4、生的免疫球蛋白理化性质十分均一，但无免疫 活性，所以称这类免疫球蛋口为M蛋口。M蛋口的轻链由于分子量较小，可通过肾小球从尿中排出，这种在 尿中检出的免疫球蛋白的轻链称本-周蛋白。一、多发性骨髄瘤多发性竹髓瘤也称浆细胞瘤。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。本病可以岀现血沉增快，血中检岀M蛋白和不明原因的蛋白尿。件痛和贫血常作为多发性件髓瘤的首发症状和就诊原因，感染和肾功能衰竭是本病的重要死因。多发性计髓瘤的特点可归纳为： 血淸中有大量单克隆M蛋白或尿中有大量本-周蛋白检岀； 骨骼发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤； 原发性的溶件性损害或广泛骨质疏松。确诊多发性骨髓瘤必须要做进一步免疫学

5、检查和分型。二、巨球蛋白血症巨球蛋白血症是以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。好发于老年男性。本病件髓浸润、 骨质破坏，但竹痛、竹折等表现较少。在实验室检査时，血清呈胶冻状难以分离，电泳时血清有时难以泳动，集中于原点是该病的电泳特征。将血淸做适当稀释后可检出髙水平的IgM型H蛋白，结合临床症状可以诊断本病。三. 重链病重链病是突变的浆细胞所产生的重链异常堆多或质量异常不能与轻链装配,导致血淸重链过剩，致使 血淸中和尿中出现大量游离的无免疫功能的免疫球蛋白重链所引起的疾病。以Y、a、u型为多见。四、轻链病轻链病是变异的浆细胞产生大虽的异常轻链，过多的轻链在肾脏和其他内脏组织沉积，导致肾

6、损害和 淀粉样变性。本病血液和尿中可查到大量的轻链蛋白，分为入型和K型，入型肾毒性较强。血淸中免疫球蛋白水平仅轻度降低或处于正常低限，但免疫球蛋白K/X型比值明显异常，血淸和尿中 往往可同时检测出免疫球蛋白轻链。五、良性单克隆丙种球蛋白血症是指血淸中出现髙水平免疫球蛋白，但并无浆细胞恶性增殖的疾病。一般无临床症状，体检时发现血 中有H蛋白，但其并不呈进行性增加。部分患者有恶变可能，如果血中或尿中出现本一周蛋白，很可能是 危险信号。第四节 免疫球蛋白异常增殖常用的免疫检测目的是早期发现疾病、监控病情和判断预后。一、血淸区带电泳血淸区带电泳是测左M蛋白的一种左性实验，常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳

7、两种方法。单克隆丙种球蛋白增高时常在Y区，呈现浓密狭窄的蛋白带,经扫描显示为高尖蛋白峰（高:宽2:1） 0 多克隆丙种球蛋白增高时，如慢性感染、自身免疫病和肝病等,Y区带宽而浓密，扫描图显示为宽大 的蛋白峰。有些轻链病，或重链病的M蛋白II冷并不明显，富含类风湿因子的血淸、溶血标本，有些却可出现类似M 蛋白峰的电泳区带。免疫电泳血淸标本先行区带电泳分成区带，继而用特左的抗血淸进行免疫扩散，蛋白将在适当的部位形成异常 沉淀弧。正常人血清形成的沉淀线是均匀的弧形，而M蛋白的沉淀线或沉淀弧较宽，呈弓形或船形。有时M蛋白的四级结构会影响轻链与抗体结合，需在血淸中加入2-蔬基乙醇（10ul/ml）。否则

8、轻链 不能检出，可能会误诊为重链病。将尿标本与血标本一同进行免疫电泳分析会减少检验误差。三.免疫固定电泳是血淸区带电泳与免疫沉淀反应相结合的立性实验，具有更髙的灵敏性。固宦电泳后分别在电泳条上 加入不同类型的单克隆抗体，相应的抗原将与抗体在某一区带形成抗原抗体复合物，经漂洗和染色可淸晰 地显示出抗原抗体反应带。M蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界限明确的区带，而多克隆増殖或正常血清Y蛋白区带则比较弥散。四、血清免疫球蛋白定量免疫球蛋白及轻链的立量分析对诊断免疫球蛋白异常增殖性疾病具有重要价值，以免疫比浊分析法为 主。若患者有某一类型免疫球蛋白明显高出正常值，应考虑血淸中有M蛋白的存在。正常血淸中

9、k/A比例 约为2:1,当K/入比例大于4:1或小于1:1时应考虑K型或入型M蛋白血症。第五节 异常免疫球蛋白测定及应用是指理化和生物学性质发生改变的免疫球蛋白，主要包括血液中M蛋白、血液和尿中轻链蛋白。一、M蛋白的检测M蛋白有3种存在形式：由轻链和重链组成的完整的IgG. IgA或IgM：只有游离的k或入轻链： 只有游离的三类重链中的某一类。血清区帶电泳时可检出M蛋白，但不能检出是哪类型；而免疫电泳 和免疫固定电泳可检出M蛋白的类型，但不能确定其含量。二、尿液轻链蛋白的检测尿中的免疫球蛋白轻链即为本-周蛋白。此蛋白在4060C的条件下发生沉淀，在100C时沉淀消失。 故将尿液标本置56C水浴

10、15分钟，如有混浊或沉淀，再将试管放入沸水中煮沸3分钟，如混浊变淸则提示 本-周蛋白阳性。对疑为本-周蛋白阳性的标本可以直接对尿中k链和入链进行肚量分析，也可将尿液透析浓缩50倍后 做免疫固圧电泳分析。三、异常免疫球蛋白检测的应用原则对有可疑临床表现者，一般先进行区带电泳分析、免疫球蛋口定量检测和尿本周蛋口定性检测作为初 筛实验。对于阳性者宜进行免疫电泳.免疫固定电泳、免疫球蛋白亚型和血清及尿中轻链蛋白的定量检测 作为确证实验。实战演练良性单克隆丙种球蛋白病常岀现A. 贫血B. 血中Ig升高C. 本周蛋白D. 卄损害E. 游离轻链正确答案B答案解析良性单克隆丙种球蛋白病主要是异常免疫球蛋白的增髙。关于多发性件髓瘤不正确的是A. 是单株浆细胞异常增生的恶性肿瘤B. 是免疫球蛋白增殖病C. 患者造血干细胞无异常改变D. 患者有竹质破坏E患者预后不良，感染和肾功能损害为本病的死因正确答案CI答案解析多发性骨腌瘤会导致B淋巴细胞的异常增殖，其造血干细胞有异常改变。不是免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测是A. 血淸区带电泳B. 免疫固左电泳C. 免疫电泳D. 免疫复合物测左E. 尿中轻链蛋白测赵正确答案D答案解析对有可疑临床表现者，一般先进行区带电泳分析、