蛋白酶磷酸酶抑制剂

1、来源：原创，转载请注明发布时间：2009-10-20查看次数：21在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF Leupeptin亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂 NaF氟化钠，Na3VO4原矶酸钠，BETA-glycerophosphate甘油磷酸钠，Na2P2O4焦磷酸钠等。对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。蛋白酶

2、抑制剂PMSF特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如 胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶， 也抑制半胱 氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）。溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果10mg/ml。在水溶液中不稳定。在 100%异丙醇，+25 C时稳定至少9个月分子量：使用：贮存浓度：200mM工作浓度：1mMLeupept in 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。4C一周稳定，分成小份冷冻在-20 C至少6个月分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2

3、O:使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度ug/ml (1mM)Aproti nin 抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。不抑制凝血酶或因子 X。溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如，tris，）。pH约7-8的溶液 在4C可保存1周，分装保存在-20 C可至少保存6个月。避免反复冻融,pH的 碱性环境可使其灭活。分子量：6,512使用：贮存浓度:1mg/ml,工作浓度：-ug/ml - uM）Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶，肾素，组织蛋白酶D,凝乳酶，许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲

4、醇约1mg/m； 可溶于乙醇，过夜溶解可达到 1 mg/ml ；在6当 量乙酸中溶解度为300ug/ml。4C稳定一周，分装储存于-20 C时可保存1个月 分子量：使用：贮存浓度：1mg/ml，使用浓度：卩g/ml（1卩M）EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至，在pH8-9的条件下，4 C稳定至少6个月分子量：使用：工作浓度：-mg/ml - mM），不需现用现配，在溶液 pH值调至8-9时再加入磷酸酶抑制剂NaF氟化钠溶解性：溶于水分子量：使用： 贮存液：5M工作浓度：10-20mMNa3VO4原矶酸钠分子量：溶解性：溶于水，我们购买过来的是原矶酸钠.原矶酸钠需要经过处理以后才能 成为激活的矶酸钠，激活的矶酸钠才具有抑制去磷酸化的作用原矶酸钠变成激 活的矶酸钠的过程是：100mMM矶酸钠激活储存液配制(1) .取克的原矶酸钠溶解于10ml的双蒸水中，加酸调节PH至10(颜色变黄)(2) .煮至无色(3) .室温冷却(4) .重调 PH至 10重复(1 )(2)(3)(4 )直至溶液保持无色，并且PH稳定于10,分装100ul/管,每10ml裂解液加一管.(终浓度为1mM),-20度保存.使用： 贮存液：100mM工作浓度：1mMBETA-glycerophosphate 甘油磷酸