血凝抑制实验常出现的错误

1、血凝抑制实验常出现的错误一、原理病毒能够与鸡红细胞发生凝集现象，这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所 抑制，即红细胞凝集抑制实验（HI）。二、应用由于血凝反应可被特异性抗体所抑制，抗体与病毒结合后，血凝素不能吸附于红细 胞表面的受体上，因此血凝抑制实验可以用于：1. 检测血清中的抗体水平。2. 鉴定病毒。3. 辅助诊断病毒性疾病。4. 作为适时免疫的辅助手段，能避免免疫失败、免疫空挡及重复免疫造成的损失。三、HA HI实验结果示意图平面裂HA、HI实验示意图A、C: HA实验：凝集到第9孔；凝集价512B、D: HI实验：抑制到第6孔；抗体水平6个滴度四、HI实验易出现的错误1、对照孔凝集（

2、如图1） 盐类凝集：所谓盐类凝集即稀释液中氯化钠达至一定高浓度时，即使没有血清 抗体也能发生凝集反应。 当生理盐水被细菌污染时也可出现对照孔凝集。 血清变质或受细菌污染。 图（1）2、全部凝集（如图2） 当红细胞受细菌污染或保存时间过长可出现此现象。 抗原滴加时出现失误，工作抗原效价过高。 生理盐水受细菌污染或其它因素.图（2）3、红细胞全部下滑（如图 3） 当配制抗原时，配制工作抗原效价过低，不足以凝集鸡红细胞。 加样时所有孔全部加成生理盐水亦出现下图现象。图（3）4. 工作抗原效价过高或过低对结果都有一定的影响。过高，测定抗体效价偏低；过低， 测定效价过高，甚至很高。（见图4）图（4）同一

3、血清A为工作抗原效价过低，第12孔抗原对照孔没有100%凝集，这样测定抗 体就过高（211以上）B为正确的工作抗原效价对照，实际抗体为 28C为工作抗原效价过高，测定抗体偏低，为 255. 不同来源、不同浓度的红细胞会使结果差异很大，所以红细胞来源一定要相同：一般需要3只或3只以上公鸡来提供红细胞，将 3只以上公鸡红细胞混合在一 起。也可由1只公鸡来提供红细胞，但必须经临床多次使用证明是可行的。有 抗体鸡提供的红细胞需要更多次数洗涤。但要注意有时不同的公鸡提供的红细 胞对禽流感H5亚型抗体测定，效价差异很大。不同浓度的红细胞对抗体测定也 有影响。6. 温度对实验结果也有影响，一般要求在室温 2

4、5-37 C进行实验，当实验温度低于4C 时红细胞有时会发生自凝现象。7. 抗原与抗体作用时间过长或过短对结果影响较大：过短出现凝集不完全；过长出现 洗脱现象。8.96孔V型板是否洗净，是否光滑也会影响实验结果。以上所述都是平时操作中容易出现的错误，所以进行实验时一定要严格操作，每次 测定应有严格的温度范围和作用时间，出现错误时要认真查找原因，以免类似错误再次 出现。另外，所用抗原应是稳定性好，效价高的浓缩抗原。清代 红顶商人”胡雪岩说： 做生意顶要紧的是眼光，看得到一省，就能做一省的生意；看得到天下，就能做天下的生意；看得到外国，就能做外国的生意。”可见，一个人的心胸和眼光，决定了他志向的短浅或高远；一个人的希望和梦想，决定了他的人生暗淡或辉煌。人生能有几回搏，有生不搏待何时！所有的机遇和成功，都在充满阳光，充满希望的大道之上！我们走过了黑夜，就迎来了黎明；走过了荆棘，就迎来了花丛；走过了坎坷，就走出了泥泞；走过了失败，就走向了成功!一个人只要心存希望，坚强坚韧，坚持不懈，勇往直前地去追寻，去探索，去拼搏，他总有一天会成功。正如郑板桥所具有的人格和精神:皎定青山不放松，立根原在破岩中。千磨万击还坚劲，任尔东南西北风。梦想在，希望在，人就有奔头；愿奋斗，勇拼搏，事就能成功。前行途中，无论我们面对怎样的生活，无论我们遭遇怎样的挫折，只要坚定执