血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定作业指导书

1、血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定作 业指导1. 实验原理：国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。L-天门冬氨酸+-酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸L-苹果酸 +NAD+fO草酰乙酸+ NADH +H + MDH苹果酸脱氢酶2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。3. 标本存放：3天内的活性损失：28 C保存：8%;1525 C保存：10%;标本稳定性：-20 C保存至少可 稳定3个月。4. 标本运输：常温条件下保存运输。5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本6. 实验材料6.1试剂：奥林巴斯AST测定试剂盒 试剂1 :

2、;试剂2：6.1.1 试剂准备： 试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮存试剂保存于28 C ,若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示： 当试剂有看得见的微生物生长， 有 浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质， 不能继续使用。6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。 不可入口！避免接触皮肤及粘膜。 应采取必要的 预防措施使用试剂。6.2 校准品： 使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动 分析仪进行校准， 具体参见生化检验校准品和 质控 品 .SOP 文 件 。6.3 质 控 品 ： 具 体 参 见 生 化 检 验 校 准 品 和 质 控 品

3、 .SOP 文件。7. 仪 器 ： 奥 林 巴 斯 AU2700 生 化 分 析 仪8. 操 作 步 骤8.1 项目基本参 数： 参见生化检验奥林巴斯 AU2700 生 化 分 析 仪 项 目 测 定 参 数 .SOP 文 件8.2 仪器操作步 骤： 参见生化检验奥林巴斯 AU2700 生 化 分 析 仪 操 作 规 程 .SOP 文 件9. 检 验 结 果 的 判 断 与 分 析10. 质量控制 ：在每一批标本中都应把非定值血清水 平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控 警 告 限 ， 3S 为 失 控 限 ， 绘 制 质 控 图 ， 判 断 是 否 在 控 。 质控规则参见生化室

4、室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以 TruCal U 复合校准品 AST 校准值 校准仪器后， 在病人结果可报告范围内， 仪器直接报 告可靠的检测结果。不使用校准品进行AST活力检测， 可以直接使用 A/min均值乘以计算因子得到结果， 但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。 计算 ALT 活 力 的 计 算 因 子 见 下 表 ： A/min x 因子 =AST 活力U/L底物起始的反应（37 C ） 样品起始的反应（ 37 C ）340 nm21431745334 nm21841780365 nm3971323512. 参考值范 围 4不 含 磷 酸 吡 哆 醛 含 磷

5、酸 吡哆醛女性31U/L10 -35U/L男性37U/L10 -50U/L参 考 值 因 性 别 、 年 龄 、 饮 食 和 地 域 的 不 同 而 有 所 差别。根据好的 实验室经验，每个实 验室应 建立自己 的 参 考 值 。13. 临 床 意 义 1,2丙氨酸氨基转移酶（ALT ）旧称谷丙转氨酶（GPT）, 天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨 基从氨基酸转移给-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升 高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝 组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测 用于

6、鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率 可用于肝病的鉴别诊断。比率1预示中度的肝损伤； 比率1和严重肝病有关，常见慢性肝病。14.操作性能14.1 线性范围 2-800U/L 。14.2精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准 方法，AU2700批内精密度小于3%,总精密度小于3%。 用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的 规则。不含磷酸吡哆醛批内精密xsCV天间精密xsCV度n=20(U/L)(U/L)(%)度n=20(U/L)(U/L)(%)样品125.10.823.25样品125.71.134.40样品251.31.573.06样品248.60.671.38样品31160.900.77样品31150.800.69含磷酸吡哆醛批内精密 度n=20x(U/L)s(U/L)CV(%)天间精密度n=20X(U/L)s(U/L)CV(%)样品143.61.102.51样品144.01.593.61样品274.51.792.41样品277.03.053.97样品31743.181.83样品31873.371.8014.3 方法学