核酸实验室管理的经验和体会(甘肃)汇总

1、核酸实验室管理经验和体会甘肃省血液中心检验科甘用省血液 中 心检验:科核酸实施室基本情况 核酸实验室验收日常管理的体会甘肃省血液中心检验科核酸实验室基本情况科华核酸检测系统 试剂j 乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒核酸检测 试剂盒（pcr一荧光法） 设施和设备一个实验室两套样本汇集提取（hamilton star系列一磁分离模块：样 本汇集、核酸提取）三台abi 7500荧光pcr仪：扩增检测甘肃省血液中心检验科核酸实验室基本情况汇集检测不超过48小时，拆分不超过72小时检测策略：两通酶兔+一遹核酸规划设置为集中化核酸检测实验:室（200公里以 内4家中/血站）基本情况2012年下

2、半年开始核酸检测2013年7月 通过甘油省临检中心核酸实雅室技 术雅收9核酸实验室验收194号医疗医疗机构临床基因会收依据：卫办医政发2010 机构临床基因扩增管理办法、 临未基因扩增检验工作导则、 扩增检验实验室技术验收表验收机构:验收方式：现场验收和盲样检测核酸实验室验收血站基 因 扩增检验实验室技术验收表1 .实验室设jt和设备2 .设3 .人员4 .设备管理和质控物5 .检测方法6 .标本管理7 .记录8 .报告9 .质量控制10 .抱怨日常管理的体会人员培训设施设备维护检测流程善理安全卫生管理17人员培训1 .轮岗培训2 .相对固定3 .科室定期培训4 .严格执行sop设施设备维护1

3、 . 实验定1、2、3三个区域内压力梯度应保持在5t0kpa, 依次 按照1区2区3区递减。各区级冲间压力恒定，与外关保搏 10t5kpa正压力差。2 .各区温度：20-26c二区湿度：40%3 .二区生物安全柜，开盖机，用于真空采血管的去帽。（无尘无纺布）4 .二区、三区应配备ups电源。5 ,各区间的传递窗？产物分析区空气流向扩增区空气流向缓冲间标本制备区空气流向专用走廊试剂准备区空气流向缓冲间工作流向检测流程管理1 .分离胶edta 2k抗凝管。采集后的充分混匀，一般颠倒5 10 次以上。（或按照采血管技术要求进行），样品离心：应采用大容量低温离心机，离心要充分，离&条件最 好2000g

4、、20分钟。2 .检测时间：采血后第二天，采集后48小时内完成混检，拆分72 小时内完成。安全卫生管理核酸实验室防污染的目的 核酸实验室的污染物核酸实验室被污染的后果 核酸实验室的防污染措施核酸实验室防污染的目的#预防和控制核酸残余污染及病源微生 物的传播，确保实验室生物安全与周 围环境安全。核酸实验室的污染物扩增产物（阳性核酸片段）天然基因组dna试剂污染标本间的交叉污染（气溶胶）19出现大量的假阳性结果。污染物短时间内不能消除。实验被迫暂停。备用实验室。案例：检测hbv 灰区样本120份，（s/c0 0. 5-1之间），汇集检测结果全部阳性，阴性对照结果阳性。1.清洁实验室完毕后，用l 7

5、m璃心管（用于配制反应液的管子）分别放置于以下位置：ttjt数量二区star1仪器内部载架放jt区域6支star2仪器内部载架放置区域3支三区abi仪 器仪器旁边，各摆1支共3支2 .过夜后，早上取双蒸水，约30-50u1 ,在1. 7nli离心管内反复吹吸多次后，取15日进入扩增板，作为模板，另加入15ul反应液。每个离心管配制3个复孔。3 .扩增板制备完毕后，放入扩增仪进行检测，最好做三项。结果：连续检测七天，第四天已经全部为阴性，第八天转为正常试验。23核酸实验室的防污染措施规范化的设置和管理产实验室的区域划分设置阴性质控严格的消毒措施防污染的消毒措施实验室仪器的消毒 实验室台面的消毒

6、实验室地面的消毒 传递窗的消毒 废液的消毒 空气消毒 实睑室通风 勤换手套25实验室仪器的消毒27样本处理模块:每天实验结束后用无纺布蘸75% 乙醇清洁工作台面，擦拭core-tip金属挡板, 酒精喷雾清洁样本载架。每周用75%乙醇清洁 试剂载架，枪头载架。核酸扩增模块：每周使用无纺布蘸清水润湿后 擦拭仪器表面。实验室仪器的消毒生物安全柜使用完后，用无纺布蘸75%乙醇擦拭安全柜台面及开盖机。2区实验结束后，打开生物安全柜内紫外灯消毒30分钟。移液器：使用完后用无纺布蘸75%乙醇擦拭。实验结束后，紫外灯消毒60分钟。实验室台面的消毒每天工作结束后，台面用含有效氯0. 5%含氯消毒液擦拭 1次、1

7、5分钟后用清水再擦拭1次。1区配制反应液的台面和2区的试剂准备区及样本准备区 用紫外灯照射60分钟。台面有明显污染或血液溅漏时，应用含有效氯0. 5%含氯消毒液喷洒于污染表面，并用无纺布蘸消毒液后覆盖污 染表面，保持15分钟以上，再用清水擦拭干净。每天工作结束后，地面应用含有效氯0.5%含氯消毒液拖擦1次、15分钟后用清水再拖擦1次。地面有明显污染或血液溅漏时，应用含有效氯0. 5%含氯消毒液喷洒于污染表面，并用无纺布蘸消毒液后覆盖污染表面，保持15分钟以上，再用清水拖擦。拖把等清洁工具各区专用，不得混用，用后洗净晾干传递窗的消毒实脆结束后，传递窗内用无纺布蘸75% 乙醇擦拭。擦拭完后，紫外灯

8、消毒30分钟。废液的消毒实验过程中产生的废液用含有效氯0. 5%含氯消毒液进行消毒。24h后方可倒入下水管道。空气消毒实验室台面、仪器、地面清洁消毒之后,75%乙醇喷雾实验室内空气。每天试验全部结束后，打开实验区及缓冲区 的紫外灯消毒60分钟。空气消毒消毒时实验台面必须整洁，不得有纸张等其 他覆盖物，以免影响消毒效果。灯管表面应经常（一般2周左右1次）用酒精棉 球轻轻擦拭，除去上面灰尘与油垢，以减少对紫外线穿透的影响。33避免消毒“过度”探讨：1 .设备发生故障频率增加？2 .假阴性率升高？37区消毒方案实验结束后，使用喷方75%酒精无纺布擦拭实验桌面，每天使用清水拖地, 每二天便用500mg/l方效轴拖地，紫外灯杀菌1小时；二区消毒方案实验结束后，使用喷方75%酒精无妨布擦拭star1k舞台面； 及tip头金属挡板，使用75%酒楮喷酒实验台面； 喷洒标本载架；及75%喷洒生物安全柜, 然后使用无妨布擦拭生物安全柜；每天使用500mg/l方效氯拖地，拖地结束后，使用 紫外消 毒车紫外消毒1小时;三区消毒方案使用啧洒方75