第四章中药鉴定

1、第四章 中药鉴定一、中药鉴定的依据二、中药鉴定的一般程序 三、中药鉴定方法 四、中药质量标准的制定 第一节 中药鉴定的依据中华人民共和国药典共八版中华人民共和国卫生部药品标准共22册中成药部颁标准 共20册进口药材部颁标准 其它转正标准、地方标准等 药典记载中药质量标准内容 1. 名称：中文名、汉语拼音、中药拉丁名2. 基源：科名、植（动）物名、拉丁学名、药用部位、采收季节、加工3. 性状：形状、大小、表面、颜色、 质地、断面、气、味4. 鉴别：显微（组织、粉末、显微化学） 理化（一般理化、TLC）药典记载中药质量标准内容5. 检查：杂质、水分、灰分、浸出物6. 含量：主成分测定方法及限量7、

2、炮制：方法及炮制品8、 性味归经：9、功能主治：10、用法用量：11、注 意：禁忌和副作用123、贮 藏： 中成药质量标准内容药品名称 处方制法 性状鉴别 检查含量测定 功能主治用法用量 规格注意 贮藏第二节 中药鉴定的一般程序分三步 1. 取样 2. 鉴定 3. 结果一、取样（一） 取样原则。w 有代表性w 均匀性w 留样保存（二）取样的要求与方法 w 取样前检查品名、产地、规格、等级及外包装w 按5%取样，超过1000件，超过部分按1%取样；不足5件及贵重药材逐件取样w 粉末状或lcm药材，每件不同部位抽取23份，包件少，抽取实验用量3倍；包件多，每件一般药材100500g；粉末状药材25

3、g；贵重药材510g。w 存样保留l年w 对角取样二、鉴定按药材标准逐项检验。 (一)、 真实性鉴定 中药的真实性鉴定，包括性状、显微、理化等项目，在有条件时应与标准中药作对照比较。（二）、 杂质检查 有机杂质和无机杂质种类及其数量。（三）、 含量测定 中药中有效成分、浸出物或挥发油的含量是评价中药品质优良度的主要依据。 有效成分(或主要成分)的含量测定； 浸出物含量； 挥发油的含量测定； 生物效价测定其药理作用强度。 三、给出结果试验过程要有详细记录。根据实验结果对检品的真实性、纯度或品质优良度下结论：“合格或不合格”、“符合或不符合规定” “能否供药用” 。 检定项目必须有完整的、真实的和

4、原始的检验记录，以备审核。经部门主管审核后，签发报告书，并做好检品留样工作。 药品检验机构签发的报告书具有法律责任。如果送检单位对该检验结果有疑问或经检定合格的中药在使用过程中发生了中毒、死亡等医疗事故，则需将留样观察之样品送上一级药品检验机构作仲栽检验。 第三节 中药鉴定方法四大鉴别方法一、来源（基源） 二、性状 三、显微 四、理化 一、来源鉴定 应用植（动、矿）物的分类学知识，确定中药的正确学名。分三步：采集实物，观察形态,核对文献，对照鉴定,核对标本，确定学名 二、 性状鉴定（经验鉴别） 通过眼观、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试的方法，鉴别药材的真伪优劣。也叫经验鉴定十要素：形状 大小 颜

5、色 表面 质地断面 气 味 水试 火试 “看”，就是仔细观察中药的性状、大小、色泽、表面和断面特征等，并以一些简单的词语来形容。 狮子盘头：指党参的根头部膨大，并有多数疣状突起的地上茎痕或芽痕聚集成头状，习称狮子盘头.。川木香：根头偶有黑色发粘的胶状物，习称“油头”或“糊头”菊花心：指药材断面有细密的放射状纹理，形如一朵开放的菊花，习称菊花心。“过桥杆”：黄连根茎的中段常有细长光滑的节间，习称“过桥杆”或“过江枝”。 “摸”，就是用手触摸中药，以判断中药的表面、质地及折断现象。通常用光滑、粗糙；硬软、结松、轻重、韧脆、弹柔以及粉质、角质、油润、绵性、柴性、粘性等词来形容。甘草、茯苓、猪苓“闻”

6、或“嗅”是直接嗅闻完整的中药，或于剥碎、搓揉、折断时所能闻到的气感。气无，气微，气微香、气香、气香浓郁，气清香。气特异。 “尝”是用舌尖接触中药表面，或取少量入口咀嚼能感觉到的味感。 甘、酸、苦、辣、咸、涩、淡7味。 舌尖对甜的、舌根对苦的、两前侧对酸的、两后侧对咸的较为敏感。 同心纹：指异形维管束排列成同心性环纹。举例：（1）水试法鉴别药材举例（2）火试法鉴别药材举例三、显微鉴别.定义利用显微镜来观察药材的组织构造、细胞形状及内含物，鉴定药材品种和质量包括两种：组织鉴定粉末鉴定.组织鉴定：通过观察药材的切片鉴别其组织构造特征，适合：完整药材或粉末特征相似的同属药材的鉴别.粉末鉴定：通过观察药

7、材的粉末制片鉴别其细胞分子及内含物的特征。适合：破碎、粉末状药材或中成药的鉴别。（一）组织构造与细胞形态鉴别制片类型、横切片和纵切片目的：观察组织构造。常用横切片三、显微鉴别1.切片方法：.解离组织片、表面片、粉末片目的：鉴定药材和以原粉入药的中成药方法：水合氯醛透化片粉末少许，加水合氯醛加热透化2-3次，加稀甘油，封片。透化目的： 溶解淀粉粒、蛋白质、叶绿体、树脂、挥发油等；使已收缩细胞膨胀。水合氯醛是优良透明剂。稀甘油目的：避免析出结晶；保新。 粉末片要求粉末细度：药材80-100目，成药一般120目，粉碎时应全部过筛。、花粉粒与孢子制片、矿物药制片（二）细胞内含物和细胞壁检测：、细胞内含

8、物（）淀粉粒：醋酸甘油或蒸馏水装片偏光镜观察；（）糊粉粒：甘油装片加碘显棕或黄棕色，加硝酸汞显砖红色（）菊糖：70%乙醇或水合氯醛液不加热立即观察（形成球形结晶）（）草酸钙结晶：加硫酸渐溶，析出针状结晶；（）碳酸钙（钟乳体）：加稀盐酸溶解，有气泡产生；（）硅质细胞：硫酸不溶；（）粘液细胞：钌红显红色；（）脂肪油、挥发油或树脂：苏丹橘红、红色或紫红色；乙醇脂肪油不溶解，挥发油溶解。、细胞壁性质检查（）木质化：间苯三酚及盐酸显红色或紫红色；（）木栓化或角质化：加苏丹，放置或微热呈橘红至红；（）纤维素：加氯化锌碘试液或加碘再加硫酸液蓝或紫色；（）硅质化：加硫酸无变化。（三）显微测量测定某一特征的大小

9、，如：草酸钙结晶；显微定量。 （四）电子显微镜四、理化鉴定 利用物理的或化学的方法对中药中所含的主要化学成分或有效成分或特征性成分进行定性分析，用于中药的真伪鉴定。（一）物理常数测定 包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸点、凝固点、熔点等的测定。这对挥发油、油脂类、树脂类、液体类（蜂蜜）、和加工品（阿胶）等。 药材掺有其他物质时物理常数会改变。如蜂蜜掺水，比重会降低，掺蔗糖旋光度会改变。 正品：（含蔗糖约5）为左旋， 掺蔗糖的蜂蜜：（含蔗糖20）为右旋。05版药典中的物理常数：如蜂蜜的相对密度在1.349以上，薄荷油为0.8880.908；冰片的熔点为205 210 ；肉桂油的折光率

10、为1.062-1.614等。天竺黄粉末（过4号筛）轻轻装入量筒内，其体积不少于35ml。（二）常规检查1、水分测定方法：四种；烘干法、甲苯法、减压干燥法、气相色谱法如：牛黄含水量不得过.2、灰分测定：高温灼烧。总灰分限度、酸不溶性灰分 3、膨胀度检查 膨胀度:是药品膨胀性质的指标，系指按干燥品计算，每1g药品在水或其他规定的溶剂中，在一定的时间与温度条件下膨胀后所占有的体积(ml)。主要用于含黏液质、胶质和半纤维素类的天然药品。 药材中含有的黏液质、果胶、树胶等成分，有吸水膨胀的性质，其吸水膨胀的程度和其所含的黏液等成正比关系，可通过测定膨胀度进行鉴别。 南葶苈子和北葶苈子外形不易区分，北葶苈

11、子膨胀度不低于12，南葶苈子膨胀度不低于3。 4、酸败度检查 酸败度:是指油脂或含油脂的种子类药材，在贮藏过程中发生复杂的化学变化，产生游离脂肪酸、过氧化物和低分子醛类、酮类等分解产物，因而出现异臭味，影响药材的感观和内在质量。 通过酸值、羰基值或过氧化值的测定，以检查药材的酸败程度。 药典规定郁李仁的酸值不得过100、 羰基值不得过30、 过氧化值不得过005。 5、色度检查 色度检查在贮藏过程中易变色、走油的药材，利用比色鉴别法检查药材在贮藏过程中有色杂质的限量，了解和控制其走油变质的程度。 中国药典2005年版一部白术项下规定白术的酸性乙醇提取液与对照液相比较显色不得较深。 6有害物质的

12、检查 中药的有害物质主要有内源性的有害物质和外源性的有害物质。 (1)内源性的有害物质 主要为严重危害人体健康的毒性成分。如： 肾毒性成分马兜铃酸，主要存在于马兜铃科马兜铃属的关木通、广防己、青木香、马兜铃、天仙藤、朱砂莲等药材中。 肝毒性成分吡咯里西啶生物碱，主要存在于农吉利、千里光、款冬、佩兰、猪屎豆等药材中。 对中药中马兜铃酸和吡咯里西啶生物碱常用的检测方法是高效液相色谱法、高效毛细管电泳及其与质谱联用的技术。中国药典2005年版一部已取消了广防己、关木通、青木香的药用标准，并将细辛由全草入药改为以根和根茎入药，因细辛的地上部分含马兜铃酸。 (2)外源性的有害物质 中药中的外源性有害物质

13、主要是重金属及有害元素、残留的农药、黄曲霉毒素和二氧化硫等。农药残留量测定黄曲霉毒素检查重金属检查砷盐检查农药残留量测定 根据有关规定，生药材生产过程中不得使用农药，施用过农药的土地，5年内不准种植生药材。但目前滥用农药的现象极其普遍，特别是某些长效、剧毒、积蓄性的杀虫剂，如六六六和DDT，由于它们在土壤和生物体中长期残留和积蓄，对人类的危害极大。这些杀虫剂虽已停止生产，但私自使用的情况仍然存在。中药中有机氯类农药残留量的分析，一般用气相色谱法测定。中国药典2005年版一部规定使用GC-ECD法测定中药中3类共9种有机氯类农药残留量，并对甘草和黄芪明确规定了有机氯农药残留量六六六(总BHC)不

14、得超过千万分之二；滴滴涕(总DDT)不得超过千万分之二；五氯硝基苯(PCNB)不得超过千万分之一。有机磷农药残留量的测定：有机磷农药常见的有敌敌畏、对硫磷、乐果、二嗪农、久效磷等12种。中国药典2005年版一部规定使用气相色谱法检测中药中有机磷农药的残留量。拟除虫菊酯类农药残留量的测定：中国药典2005年版一部规定用气相色谱法检测氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯在中药中的残留量。黄曲霉毒素检查 中药在贮藏过程中，如果含水量超过一定限度，则易生霉变质。其中危害最大的是黄曲霉菌。黄曲霉菌含多种黄曲霉毒素，有强烈的致肝损害和致癌作用； 世界各国对食品和药物中黄曲霉毒素的限量均作了严格的规定。 检测方法：

15、主要是根据黄曲霉毒素中毒性最大的成分黄曲霉毒素B1、B2和G1、G2的理化性质而设计的。 能溶于氯仿和甲醇而不溶于己烷、乙醚和石油醚，在紫外光(365nm)下分别显蓝色和黄绿色荧光。 中药粉末经氯仿或甲醇提取，提取液浓缩后进行薄层色谱分离，以已知浓度的黄曲霉毒素标准品作对照，根据斑点大小和荧光强度来判断是否超过规定的限度。 准确定量：可采用薄层色谱-紫外分光光度法或荧光光度法、薄层扫描法等。重金属检查 中国药典对某些生药规定了重金属、砷盐或其它金属盐的限度检查。主要是矿物药如石膏（不得超过百万分之三十） 挥发油类如薄荷油（不得超过百万分之十） ，加工品如阿胶（不得超过百万分之三）等。测定的方法

16、和含量限度可按中国药典有关规定进行.砷盐检查 中国药典 2005年版一部用古蔡氏法或二乙基二硫代氨基甲酸银法两种方法，并规定玄明粉含砷盐不得过百万分之二十；芒硝含砷盐不得过百万分之十；石膏含砷盐不得过百万分之二；阿胶含砷盐不得过百万分之三。 中国药典2005年版一部对有害元素砷元素规定用原子吸收分光光度法和电感耦合等离子体质谱法进行测定。并规定甘草、黄芪、丹参、西洋参、白芍、金银花含砷不得过百万分之二。 二氧化硫的检查： 不少中药材在加工或储藏中常使用硫黄熏蒸以达到杀菌防腐、漂白药材的目的。 目前世界上许多国家对药品和食品中残留的二氧化硫均作了严格的限量。其检测方法有酸蒸馏碘滴定法和离子色谱法

17、。 我国法定药品标准目前尚未对药材中二氧化硫作限量检查。（三） 一般理化鉴别1.显色反应：可将适当的试剂直接加到药材表面或切片上。如：加1%钒酸钠的硫酸溶液于番木鳖胚乳切片上迅显紫色(番木鳖碱反应)。 用适当溶剂和方法将中药中的某类成分提取出来，再将提取液置于试管中，加入适当的试剂使产生颜色反应或也可将中药提取液滴于白瓷点滴板上、滤纸片或薄层板上，加入1滴试剂观察其颜色反应。2.沉淀反应： 例如含生物碱类成分中药的酸水提取液，加入生物碱沉淀剂应产生相应的沉淀反应。3、泡沫指数和溶血指数 利用皂苷的水溶液振摇后能产生持久性的泡沫和溶解红细胞的性质，测定皂苷类药材的泡沫指数和溶血指数作为质量指标。

18、4. 微量升华： 利用中药中含有的某些化学成分，在一定温度下能升华（固态-气态）的性质获得升华物，在显微镜下观察其形状、颜色以及化学反应。例如，大黄、牡丹皮、薄荷、班蝥、儿茶、茶叶均可用微量升华方法得到不同形状的升华物。升华物的结晶形状与升华温度有关。5. 显微化学反应：将干粉、徒手切片或浸出液少量，置于载玻片上，滴加某种试剂使产生结晶或产生特殊的颜色，在显微镜下观察，如： a.直立百部鲜块根切片，滴加氯化金试液装片，在皮层中有微黄色玫瑰花状结晶（生物碱）； b.丁香切片滴加3%氢氧化钠的氯化钠饱和液装片，油室有针状丁香酚钠结晶析出； c.黄连粉末或醇提液加稀HCl，可见针簇状小檗碱盐酸盐结晶

19、析出。显微化学法鉴别药材举例6. 荧光分析： 利用中药中所含某些化学成分，在紫外光或常光下能产生一定颜色荧光的性质，作为中药真伪鉴别的一种简易方法。通常可直接取中药的切片、断面或粉末在紫外光灯下观察荧光反应。黄连断面木部显金黄色荧光，大黄粉末显深棕色荧光，浙贝母亮绿色荧光，秦皮水浸液天蓝色荧光。 有些中药本身不产生荧光，但以酸或碱，或经其它化学方法处理后，可使某些成分在紫外光下产生荧光。芦荟溶液与硼砂共热，所含芦荟素即起反应显黄绿色荧光；枳壳的乙醇浸液点于滤纸片上，干后喷0.5%醋酸镁甲醇溶液，烘干后显淡蓝色荧光。 荧光显微镜观察： 沉香与土沉香粉末极相似，荧光显微镜下观察：沉香：部分颗粒显竹

20、篁绿色荧光，部分颗粒显枯绿色荧光；土沉香：部分颗粒显海蓝色荧光，部分颗粒显灰绿色荧光。 可利用荧光显微镜观察中药的荧光以确定化学物质存在的部位。荧光分析法鉴别药材举例（四）. 色谱法（层析法） ： 是分离天然化学物质和合成有机物质的一种重要方法。 由于不同中药中所含化学成分的种类和数量存在差异，故可通过比较不同中药间或待鉴定中药与标准中药间的色谱图，或通过鉴定中药中主要化学成分的存在，用于中药的真实性鉴定。 根据色谱分离的原理可分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱(凝胶渗透色谱)等。 吸附色谱： 是利用被分离物质在吸附剂上被吸附的能力不同，用溶剂或气体洗脱，使组分达到分离。吸附剂有

21、氧化铝、硅胶、聚酰胺等。 分配色谱： 是利用被分离物质在两相中有不同的分配系数（溶解度）而使组分分离。其中一相为液体，涂布或使之键合在固体载体上，称为固定相；另一相为液体或气体，称为流动相。载体有硅胶、硅藻土等。 离子交换色谱： 是利用被分离物质对离子交换树脂上的离子亲和力程度的不同使组分分离。不同强度的阳、阴离子交换树脂，流动相有水、缓冲液等。按照色谱方法不同可分为：纸色谱、薄层色谱、柱色谱、气相色谱、高效液相色谱等。 1.纸色谱与薄层色谱法 *纸色谱(paper chromatography, PC)是以层析滤纸为载体，以纸上所含水分或其它物质为固定相，以单一或混合有机溶剂为流动相进行展开

22、的一种。分配色谱法。 主要用于糖类、甙类、氨基酸类等水溶性成分的分离。常用的展开剂是正丁醇-醋酸-水。由于纸色谱所需的展开时间较长、分离效果较差、斑点易扩散和拖尾、亦不能使用腐蚀性显色剂等缺点，现已较少应用。 *薄层色谱(thin layer chromatography，TLC) 是将吸附剂或载体涂布于大小适宜的玻璃板或铝箔上，使成一均匀 薄层，层析过程在薄层上进行。待点 样展开后，与适宜的对照物（对照品或中药）按同法同板所得的色谱图作对比，用于鉴定中药的真伪。 纸色谱和薄层色谱中被分离成 分在色谱图中的位置是定性的基础，通常用比移(Rf)值来表示。 比移值(Rf)=原点中心至斑点中心的距离

23、/原点中心至流动相前沿的距离。 相对比移值(Rst)=原点中心至斑点中心的距离/原点中心至参考物质斑点中心的距离。 相对比移值可消除不少系统误差，具有较好的可比性。 薄层色谱法也可选用适当的条件用薄层扫描仪绘制薄层扫描图谱 2. 气相色谱法(gas chromatography, GC) 主要用于含挥发性成分的中药的鉴定，其分离效果、精密度和重现性均较薄层色谱法好。 可用于中药鉴定的数据主要是保留时间(tR)和相对百分峰面积。 应用气相色谱/质谱联用仪则可同时对被分离的色谱峰进行分析，通过计算机检索，可快速鉴定成分。 是含挥发油中药真伪鉴别和品质评价不可缺少的手段。 例如，对各种砂仁及其混淆品

24、的气相色谱/质谱分析发现，正品砂仁如阳春砂仁、绿壳砂仁和缩砂所含挥发油成分相似，主要成分为柠檬烯、芳樟醇、樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯，但含量不同，色谱峰也有明显区别。 3. 高效液相色谱法(high performance liguid chromatography, HPLC) 具有快速、分离效率高、仪器化等特点，而且其适应范围广、流动相可选择范围宽、色谱柱可反复使用以及组份易收集等优点，已成为天然药物成分分离和定性、定量分析不可缺少的工具。 根据中药中主要化学成分的性质，制备适宜的样品溶液，选择适当的色谱柱和分析条件即可进样分析。 高效液相色谱图中各色谱峰的保留时间、相对百分峰面积以及主要色谱

25、峰的紫外吸收光谱等，均可作为中药真实性鉴定的指纹资料。HPLC实例：4.凝胶（蛋白）电泳色谱法 是利用带电粒子在电场的作用下，迁移的速度不同这一原理进行分离的技术。 聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳是指以为支持介质的电泳分离方法。操作简便，重现性好，电泳谱带稳定可靠。人参、西洋参及伪品鉴别1）.样品的制备及凝胶系统的选择： 新鲜样品，低温干燥（t60 )，取样品0.5g，冰箱内固定1小时，捣碎，过40目筛，加电极缓冲液研磨成匀浆，3500rpm离心10分钟，上清液再5000rmp离心10分钟，取上清液备用。 凝胶：分离胶7.5,浓缩胶2.5。电极缓冲为tris甘氨酸 pH8.3缓冲液。2).加样与电泳：

26、每凝胶管加样品液100ul,表面小心覆盖电极缓冲液，上槽负极缓冲液中加2滴溴酚蓝指示剂，接通电源，调节电流至每管1mA，当样品进入分离胶后（约20分钟），加大电流至每管2mA,待溴酚蓝到达距末端1cm时，停止电泳。3).固定、染色与脱色：电泳完毕后，取出凝胶于12.5三氯乙酸中固定30分钟，然后浸入含2的考马斯亮蓝的12.5三氯乙酸中染色2小时，再用7醋酸漂洗脱色至背景清晰为止。4).结果：谱带分为四级，色深者为一级，色浅者为二级，色极浅者为三级，谱带扩散者为扩散带。（五）光谱法物质溶液对于不同波长的光线的吸收能力是不同的，利用分光光度计将不同波长的单色光连续通过该溶液，就可得到该物质的吸收光谱。每种物质都有其特定的吸收光谱，是天然化合物结构鉴定的重要依据之一。1、紫外分光光度法2、比色法3、红外分光光度法4、