直投式乳酸菌剂对便秘模型小鼠肠道功能的影响

1、直投式乳酸菌剂对便秘模型小鼠肠道功能的影响摘 要：探讨直投式乳酸菌剂（direct vat set lactobacillus，DVSL）对便秘模型小鼠肠道功能的影响。小肠运动实验：将50 只清洁级昆明雄性小鼠按体重随机分为 5 组，每组 10 只，即空白组，模型组和低、中、高剂量组。低、中、高剂量组小鼠每天分别灌胃 2.09、4.17、8.34107CFU/mL DVSL 水悬液， 空白组和模型组 灌胃 蒸馏 水 ， 每只 小鼠 的 灌胃体积 为0.2mL/10g 体重，均自由摄食饮水，每周测定空腹体重 1 次。第 15d 空白组给予蒸馏水，其余四组小鼠灌胃浓度为 5mg/kg 复方地芬诺酯

2、悬液，0.5h 后各组均灌胃墨汁，观察各组小鼠的小肠推进率；小鼠排便实验：方法同上，不同的是实验 19d 时复方地芬诺酯灌胃浓度为 10mg/kg，测定指标为首次黑便时间、6h 内黑便粒数及其重量。各时间点各组小鼠体重均无统计学差异（P0.05）；模型组小鼠小肠推进率、6h 内黑便粒数及其重量均低于空白组，首次黑便时间延长，两组间差异均有统计学意义（P0.01），说明小鼠便秘模型建立成功；中剂量小鼠小肠推进率、6h 内黑便粒数均高于模型组（P0.05），高剂量组小鼠 6h 内黑便粒数及其重量均高于模型组（P0.01），而首次黑便时间短于模型组（P0.05）. And the intestina

3、lpropulsive rate， the time of the first black feces， the amount of feces within 6 hours and its weight had statisticaldifferences in mice of control group and model group （P0.01）， which suggested that mice constipation model wassuccessfully established. The intestinal propulsive rate and the amount

4、of feces within 6 hours of mice in middledosage group were higher than that of model group （P 0.05）， and the amount of feces within 6 hours and itsweight of mice in high dosages group were higher than that of model group （P 0.01）， while time of the firstblack feces was shorter （P0.01）. According to

5、the Technical Standards for Testing & Assessment of Health Food（2003 edition）， the solution of direct vast set lactobacillus has the regulation of intestinal function in mice withconstipation.Key words： direct vat set lactobacillus（DVSL）； constipation； intestinal functiondoi：10.3969/j.issn.1674-506X

6、.2013.05-007邹华军等：直投式乳酸菌剂对便秘模型小鼠肠道功能的影响 年第 5 期图2 直投式乳酸菌剂对各组小鼠的6h内黑便粒数的影响Fig.2 The effect of DVSL on the amount of feces within6 hours of mice in each group注：*表示与空白组比较，P0.01；#表示与模型组比较，P0.05；表示与模型组比较，P0.01空白组 模型组 低剂量组中剂量组高剂量组01015202530356h内黑便粒数/粒*图1 直投式乳酸菌剂对各组小鼠的小肠推进率的影响Fig.1 The effect of DVSL on int

7、estinal propulsive rateof mice in each group0405060708090小肠推进率/%空白组 模型组 低剂量组中剂量组高剂量组*注:*表示与空白组比较，P0.01；#表示与模型组比较，P0.05。图3 直投式乳酸菌剂对各组小鼠的6h内黑便重量的影响Fig.3 The effect of DVSL on the weight of feces within6 hours of mice in each group*1.00.80.60.40.20.06h内黑便重量/g空白组 模型组 低剂量组中剂量组高剂量组注：*表示与空白组比较，P0.01； 表示髙剂量

8、组与模型组比较，P0.01。墨汁，低、中、高剂量组分别给予含受试样品的墨汁。25min 后，立即脱颈椎处死小鼠，之后剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下式计算墨汁推进率：小肠推进率/%墨汁推进长度（cm）/小肠总长度（cm）1001.2.2.2 小鼠排便实验给予直投式乳酸菌剂的水悬液 19d 后，各组小鼠禁食不禁水 16h。空白对照组给予蒸馏水，模型组和 3 个剂量组小鼠给予复方地芬诺酯（10mg/kg）。给予复方地芬诺酯 0.5h 后，空白组和模型组小鼠灌胃墨汁，低、中、高剂量组分别给予含受

9、试样品的墨汁，小鼠均单笼饲养，正常摄食饮水。从灌胃墨汁开始，记录每只动物首次黑便时间、6h 内黑便粒数及其重量。1.2.3 统计学分析采用 SPSS17.0 进行统计分析，所有指标组间比较做单因素方差分析；对非正态或方差不齐的数据采用秩和检验。数据以均数标准差（x軃s）表示，P0.05）。模型组小鼠小肠推进率低于空白组，两组间差异有统计学意义（P0.01），说明小鼠便秘模型成功建立； 中剂量组小鼠小肠推进率高于模型组（P0.05）。 模型组小鼠的首次黑便时间、6h 内黑便粒数及其重量低于空白组， 两组间差异均有统计学意义（P0.01），说明小鼠便秘模型成功建立。中剂量组小鼠的 6h 内黑便粒数

10、高于模型组（P0.05）；高剂量组小鼠的 6h 内黑便粒数及其重量均高于模型组而首次黑便时间短于模型组， 两组间差异均具有统计学意义（P0.01）；低、中、高剂量直投式乳酸菌剂对便秘模型小鼠 6h 内黑便粒数及其重量的影响呈剂量效应关系，见下图 2。3 讨论小肠运动有 3 种方式，即张力收缩、分节运动和28第 49 卷（总第 177 期）图4 直投式乳酸菌剂对各组小鼠的首次黑便时间的影响Fig.4 The effect of DVSL on the time of the first black fecesof mice in each group*空白组 模型组 低剂量组中剂量组高剂量组30

11、02502001501000首次黑便时间/分注：*表示与空白组比较，P0.01； 表示与模型组比较，P0.01。蠕动，主要以蠕动推动肠内容物运动为主要方式20。本实验经口灌胃给予小鼠的复方地芬诺酯是一种便秘模型造模常用药物，其作用主要是直接作用于肠道平滑肌，通过抑制肠黏膜感受器，消除局部肠黏膜蠕动反射而使肠道蠕动减慢，使肠内容物通过延迟，致使小鼠排便困难，与便秘临床症状相近21。便秘是消化道最常见症状之一，其主要诊断症状是一般每周少于 3 次排便，并伴有排便困难、粪便干结、排便时间延长和次数减少等22-23。肠道内缺乏益生菌可导致功能性便秘，而适当地补充益生菌，能及时调节和改善肠道菌群失调，防

12、止便秘的发生13。本研究结果显示小鼠便秘模型成功建立，剂量组的小肠推进率、 首次黑便时间、6h 内黑便粒数及其重量与模型组间差异有统计学意义，可见直投式乳酸菌对便秘模型小鼠具有促进肠道蠕动、调节肠道功能的作用，其可能的机制是：（1）直投式乳酸菌在体内被分解后，其有效成分可被人体吸收，或者短乳杆菌代谢产生乳酸杆菌素24，两者均有增强人体免疫力，促进肠道菌群的活动。（2）直投式乳酸菌菌体内的多种酶类物质可通过代谢途径对葡萄糖进行酵解，产生乳酸和极少量甲酸、丙酸等有机酸类物质的代谢产物，这些物质对人体的肠壁神经有良好的刺激作用，可促进肠管蠕动及增加肠管内渗透压使水分分泌亢进，由于粪便中水分的增高而产

13、生通便功效，起到通便功能25。（3）直投式乳酸菌代谢产生乳酸及醋酸等会使肠内保持弱酸性，同时对病原菌具有限制性营养素的竞争能力，来抑制病原菌的生长，调节肠道微生态的组成，形成生物学屏障26。这些机制尚需要进一步研究来证实。4 结论本次研究结果表明， 中剂量组小鼠的小肠推进率、6h 内黑便粒数高于模型组； 高剂量组小鼠的 6h内黑便粒数及其重量均高于模型组， 而首次黑便时间短于模型组；低、中、高剂量直投式乳酸菌剂对便秘模型小鼠 6h 内排黑便粒数及其黑便重量的影响呈剂量效应关系。根据保健食品检验与评价技术规范（2003 版）结果判定原则，可判定直投式乳酸菌对便秘模型小鼠具有调节肠道功能的作用。参

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