高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒的含量

1、高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒的含量?1218?安徽医药anhuimedicalandpharmaceuticaljournal2011oct;15(10)高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒的含量邵超,沈黎(安徽省阜阳市食品药品检验所,安徽阜阳236015)摘要:目的建立对乙酰氨基酚颗粒含量的高效液相测定方法.方法色谱柱为waterssuufirec柱(4.6mm150mill,5m),流动相为磷酸盐缓冲液(ph4.5)一甲醇(80:20),流速为1.0ml?min,检测波长为254am,柱温为30c.结果对乙酰氨基酚在0.050.40g?l浓度范围内呈良好线性关系(r=1.0),平均加样

2、回收率为99.9%(n:5),rsd为0.59%.结论该方法准确,可靠,可用于对乙酰氨基酚颗粒的含量测定.关键词:高效液相色谱法;对乙酰氨基酚颗粒;含量测定determinationofparacetamolgranulesbyhplcsha0chao,shenli(instituteforfoodanddrugcontrol,fuyang,anhui236015,china)abstract;ainltoestablishanhplcmethodforthedeterminationofparacetamolgranules.methodswaterssunfireci8column(4.6

3、millx150mm,5ixm)wasusedwitilphosphatebufferingsolution(ph4.5)一methanol(80:20)asthemobilephase.theflowratewas1.0ml?min.theuvdetectionwavelengthwas254nm.andthecoumntemperaturewas30c.resultsthecalibrationcurveofparacetamolwaslinearintherangeof0.050.40gl(r:1.0).theaveragerecovery(n=5)was99.9%andrsdwas0.

4、59%.conclusionthemethodisaccurate,reliable,andcanbeusedforthedeterminationofparacetamolgranules.keywords:hplc;paracetamolgranules;determination对乙酰氨基酚颗粒是目前临床中常用的一种解热镇痛药,适用于感冒,发烧等症状.中国药典2010年版j,对乙酰氨基酚颗粒的含量测定采用紫外分光光度法,该方法繁琐影响因素较多.本文建立了高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚颗粒含量的方法,并进行了方法学考察,同时用高效液相色谱法与中国药典规定的检验方法进行比较,结果一致.本方法

5、操作简便,专属性高,重现性好,可以替代紫外分光光度法.1仪器与试药waterse2695高效液相色谱仪,waters2998紫外检测器,empower色谱数据处理系统(美国waters公司).对乙酰氨基酚对照品(批号:100018200408,中国药品生物制品检定所),对乙酰氨基酚颗粒,规格为0.1g(某制药有限公司,批号:101001;100806;100413).甲醇为色谱纯,磷酸二氢钠,磷酸氢二钠等均为分析纯.2方法与结果2.1色谱条件及系统适应性试验色谱柱为waterssun-firec.柱(4.6mm150mill,5m);流动相为磷酸盐缓冲液(ph4.5)(取磷酸二氢钠二水合物15

6、.o4g,磷酸氢二钠0.0627g,加水溶解并稀释至1000ml,调节ph值至4.5)一甲醇(80:20),流速为1.0ml?min,检测波长为254nm,柱温为30,进样量为10l.在此条件下,理论塔板数按对乙酰氨基酚峰计算不低于5000,与其他峰的分离度符合要求.见图1.o.o01.oo2.003.004.005.00/min0.001.002.003.004.005.00/minab图1对照品及样品色谱图注:a.空白溶液色谱图;b.对照品溶液色谱图;c.样品溶液色谱图;1对乙酰氨基酚准上升国家标准,第16册,2003:173.4孙旌文.hplc法测定醋酸地塞米松片含量的不确定度分析j.药

7、物分析杂志,2010,30(9):177780.5孙莉.hplc法测定药物含量的不确定度分析j.安徽医药,2010,14(7):77677.6崔冬梅.hplc测定诺氟沙星胶囊含量的不确定度评定j.安78徽医药,2010,14(12):1398400.范文莉,刘会艳.hplc法测定叶酸片含量的测量不确定度评定j.中国医药导报,2010,7(26):489.孙莉.hplc法测定炔诺酮片含量及含量均匀度的不确定度分析j.中国药房,2009,20(4):2946.(收稿日期:20110225)安徽医药anhuimedicalandpharmaceuticaljournal2011oct;15(10)?

8、1219?2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液精密称取对乙酰氨基酚对照品25mg,置5oml容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精取5m1,置25m1容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液.2.2.2供试品溶液取本品10袋内容物,混合均匀,精密称取适量(约相当于对乙酰氨基酚25mg),置50ml容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液5ml,置25ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,取续滤液作为供试品溶液.2.2.3空白溶液按处方工艺要求配制不含主药的阴性样品,同供试品溶液的制备方法制成空白溶液后进样.结果表明,空白溶液对测定无干扰.2.3方法学考察

9、线性关系考察:按上述色谱条件,取对照品溶液,分别进样5,10,15,20,25,30,401,注入液相色谱仪,记录色谱图.测得的峰面积分别为1577456,3243281,4909373,6562990,8207217,9882370,13189794,以浓度(c)为横坐标,峰面积(a)为纵坐标进行线性回归.得回归方程为a=33167813.8c一74407,r=1.0.结果表明,对乙酰氨基酚在0.050.40g?i浓度范围内,其浓度与峰面积呈良好的线性关系.进样精密度试验:按上述色谱条件,取对照品溶液,重复进样6次,每次10,注入液相色谱仪,记录色谱图,其峰面积分别为3245227,3231

10、728,3248963,3244262,3250063,3242289,测得rsd值为0.21%.结果表明,本方法精密度良好.稳定性试验:按上述色谱条件,取对照品溶液,分别在0,3,6,9,12,24h,每次l0l,注入液相色谱仪,记录色谱图,其峰面积分别为3244262,3229452,3217395,3222396,3218215,3184652,测得rsd值为0.62%.结果表明,对乙酰氨基酚在24h内稳定.精密度一重现性试验:精密称取同一样品(批号为101001)5份,按上述色谱条件测定.按供试品溶液的制备的方法操作,测得其峰面积分别为3038957,3044185,3006901,3

11、038600,3005220,3036015,rsd为0.58%.结果表明,本方法重现性良好.加样回收率试验:精密称取已知含量的样品(批号为101001)细粉适量(约相当于对乙酰氨基酚25mg)5份,置50ml容量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,滤过,精密量取续滤液5m1,置5oml容量瓶中,再分别精密加入浓度为0.5g?l的对照品溶液5ml,加流动相稀释至刻度,摇匀.按上述色谱条件,每次1o1,注入液相色谱仪,记录色谱图,测定加样回收率,结果见表1.表1对乙酰氨基酚加样回收率试验2.4样品含量测定的对比试验分别取3批样品(批号:101001,100806,100413),按上述溶液的制备方法

12、操作,取对照品溶液与样品溶液各10l,注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算含量,并与中国药典规定的紫外分光光度法(uv法)测定的结果比较.结果见表2.表2样品测定结果比较3讨论本文建立了hplc法测定对乙酰氨基酚颗粒含量的方法,重现性好,准确度高.该高效液相色谱条件是参考相关文献对乙酰氨基酚泡腾片而确定的.曾对流动相用0.05mol-l醋酸铵溶液一甲醇(85:15)检测波长257nm进行多次比较,本文流动相在254nm波长处溶剂峰千扰小,主峰吸收强,此流动相比例能使主峰在较短时间内出峰,且分离度好,最后确定使用本文流动相.本文使用的检测器为二极管阵列检测器,采用高效液相色谱法,操作

13、简单易行,线性关系良好,提高了含量测定结果的准确度,与中国药典紫外分光光度法测定的结果无明显差异,可用于对乙酰氨基酚颗粒的含量测定.参考文献:1国家药典委员会.中国药典:二部s北京:中国医药科技出版社,2010:237.2国家药典委员会.中国药典:二部s.北京:中国医药科技出版社,2010:236.3田磊.hplc法同时测定复方银翘氢敏胶囊中维生素c及对乙酰氨基酚的含量j.安徽医药,2010,14(9):10267.4甄录旭,吴海林,方宗华,等.hplc法测定对乙酰氨基酚维生素c分散片中的对乙酰氨基酚和维生素c含量j.安徽医药,2007,11(9):7924.5夏方亮,王青青.hplc法测定复方感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚和绿原酸的含量j.中国药事,2009,23(10):100910.6胡海廷,敬永升,王莹.hplc法测定治感佳胶囊中对乙酰氨基酚的含量jj.河南大学,20