病理学基础电镜

1、电子显微镜技术电子显微镜技术 及其在病理诊断上的应用及其在病理诊断上的应用 一、电子显微镜技术： 也称电子显微技术 或电子显微术 电子显微镜技术电子显微镜技术 电电 镜镜 样品制备样品制备 发明背景：发明背景： 电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束 行径，在上述理论的指导下发明使用。行径，在上述理论的指导下发明使用。 电子显微镜的类型：电子显微镜的类型： 透射电子显微镜：观察样品内部超微结构。透射电子显微镜：观察样品内部超微结构。 扫描电子显微镜：展示样品表面形貌。扫描电子显微镜：展示样品表面形貌。 扫描电镜和透射电镜比较扫描电镜和透射电镜比较 项目项目

2、扫描电镜扫描电镜透射电镜透射电镜 分辨本领分辨本领70100 2 发大倍数发大倍数2040万倍万倍100万倍万倍 加速电压加速电压150 kv几十千伏几百千伏几十千伏几百千伏 图像特点图像特点景深长、三维立体结构景深长、三维立体结构景深小、两维平面结构景深小、两维平面结构 样品制备样品制备固定固定-脱水脱水-临界点干燥临界点干燥-喷涂金属喷涂金属固定固定-脱水脱水-包埋包埋-超薄切片超薄切片-重金属染色重金属染色 样品尺寸样品尺寸1cm350100nm切片切片 样品损伤样品损伤光斑直径只有几十埃的电子束在光斑直径只有几十埃的电子束在 样品上扫描，对样品损伤极小样品上扫描，对样品损伤极小 大约大

3、约1m直径电子束打到样品上，造成一直径电子束打到样品上，造成一 定程度损伤定程度损伤 样品成像信号样品成像信号二次电子、背散射电子二次电子、背散射电子透射电子透射电子 发大倍数调节发大倍数调节用衰减器改变扫描线圈电流，进用衰减器改变扫描线圈电流，进 行放大率调节行放大率调节 调整中间镜电流改变放大率调整中间镜电流改变放大率 决定分辨率决定分辨率 因素因素 入射电子束直径决定图像分辨率。入射电子束直径决定图像分辨率。 加速电压、透镜缩小率、电源稳定加速电压、透镜缩小率、电源稳定 度及像差决定电子束斑直径度及像差决定电子束斑直径 加速电压、电源稳定度、像差、样品厚度加速电压、电源稳定度、像差、样品

4、厚度 等影响分辨率等影响分辨率 样品的制备样品的制备 透射电镜样品制备的常用方法：透射电镜样品制备的常用方法：包括超包括超 薄切片、冷冻复型、负染色等。薄切片、冷冻复型、负染色等。 扫描电镜样品制备：扫描电镜样品制备：除保存样品表面形除保存样品表面形 貌结构外，只要求样品干燥并能导电，貌结构外，只要求样品干燥并能导电， 不需包埋和切片。不需包埋和切片。 二、电子显微镜技术二、电子显微镜技术 在病理诊断上的应用在病理诊断上的应用 神经内分泌颗粒：神经内分泌颗粒：神经内分泌肿瘤神经内分泌肿瘤 黑色素小体：无色素性黑色素小体：无色素性黑色素瘤黑色素瘤 langerhanslangerhans细胞颗粒

5、：细胞颗粒：组织细胞增生症组织细胞增生症 weibel-paladeweibel-palade小体：小体：血管内皮瘤及肉瘤血管内皮瘤及肉瘤 肌微丝：肌微丝：肌源性肿瘤肌源性肿瘤 细胞质内晶体：细胞质内晶体：腺泡状软组织肉瘤腺泡状软组织肉瘤 板层小体：板层小体：肺泡细胞癌肺泡细胞癌 成簇糖原颗粒：成簇糖原颗粒：ewingsewings瘤瘤 ( (一一) )特异性超微结构特异性超微结构 neurosecreting granules size and shape of melanosome of stage， langerhans cell :rod-shaped and tennis-racke

6、t-shaped alveolar soft part sarcoma:crystalloids （二）细胞膜及其特化物（二）细胞膜及其特化物 细胞外形细胞外形 纤毛纤毛 微绒毛微绒毛 细胞连接细胞连接 基板和外板基板和外板 malignant pleural mesothelioma: microvilli junction complexjunction complex desmosomes desmosomes 粘液粘液颗粒：粘液性上皮（单位膜包低、中电子颗粒：粘液性上皮（单位膜包低、中电子 密度的颗粒密度的颗粒oror网状物质，偶见电子密度的核心网状物质，偶见电子密度的核心“ 牛眼状牛

7、眼状，bulls eye type”bulls eye type”） 酶元酶元颗粒：腺泡细胞来源（唾液腺癌、胰腺外颗粒：腺泡细胞来源（唾液腺癌、胰腺外 分泌腺癌、胃癌）单位膜包电子密度高分泌腺癌、胃癌）单位膜包电子密度高 apudapud颗粒（神经内分泌颗粒）：颗粒（神经内分泌颗粒）： apudomaapudoma与溶酶体与溶酶体区别区别 溶酶体：大小、形状差异大溶酶体：大小、形状差异大 神经内分泌颗粒：较规则神经内分泌颗粒：较规则 （三）细胞合成产物（三）细胞合成产物 mucous cystadenoma of ovary: bulls-eye granules mucous cystade

8、noma of ovary: granules with reticular pattern acinic cell carcinoma:zymogen granules 例例1 1： 男男,39,39岁岁, ,发现右侧颈部无痛肿物发现右侧颈部无痛肿物1 1年余年余, ,花生花生 米大米大, ,取肿物做活检。光镜取肿物做活检。光镜: :增大的淋巴结增大的淋巴结, ,结构紊结构紊 乱乱, ,但仍残留滤泡与淋巴窦但仍残留滤泡与淋巴窦, ,窦腔及淋巴索充以大窦腔及淋巴索充以大 量胞质丰富的嗜伊红细胞量胞质丰富的嗜伊红细胞, ,直径约直径约20m20m。核圆。核圆, ,卵卵 圆或扭曲状。间有增生的淋巴

9、细胞及嗜酸性粒细圆或扭曲状。间有增生的淋巴细胞及嗜酸性粒细 胞。电镜胞。电镜: :大细胞排列疏松、无连接、胞质宽广大细胞排列疏松、无连接、胞质宽广, , 见有似网球拍或柄的双膜结构见有似网球拍或柄的双膜结构(birbeck (birbeck 颗粒颗粒) ,) , 证明光镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞证明光镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞 。 病理诊断：病理诊断：淋巴结朗格汉斯细胞组织细胞增淋巴结朗格汉斯细胞组织细胞增 生症。生症。 朗格汉斯细胞组织细胞增生症朗格汉斯细胞组织细胞增生症 双模构成的似网球拍状的双模构成的似网球拍状的birbeck 颗粒。颗粒。 em 10 000 例例2 2： 男男

10、, ,因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活 检检, ,病理诊断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又病理诊断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又 肿大肿大, ,再次淋巴结再次淋巴结( (颌下颌下) ) 活检病理诊断为恶性淋活检病理诊断为恶性淋 巴瘤巴瘤( (免疫母细胞型免疫母细胞型) ) 。电镜。电镜: :瘤细胞大、多边形瘤细胞大、多边形 或不规则形或不规则形, ,核质比大核质比大, ,核膜弯曲核膜弯曲, ,不规则或奇特的不规则或奇特的 内陷内陷, ,核常染色质丰富核常染色质丰富, ,网栏状大核仁。少许胞质网栏状大核仁。少许胞质 突突, ,胞质内核糖体丰富胞质内核糖体丰富

11、, ,其他细胞器稀少。质膜间其他细胞器稀少。质膜间 见发育不良的桥粒样连接。见发育不良的桥粒样连接。 病理诊断病理诊断: :颌下淋巴结转移癌。随后临床发颌下淋巴结转移癌。随后临床发 现鼻咽癌原发灶。现鼻咽癌原发灶。 转移癌转移癌 瘤细胞大，胞核大，核膜不平滑瘤细胞大，胞核大，核膜不平滑，显著增大的核质比，质膜间有桥粒样连接显著增大的核质比，质膜间有桥粒样连接， 胞质含少许欠发达的细胞器胞质含少许欠发达的细胞器，网栏状大核仁。网栏状大核仁。em 10 000 例例3 3： 男男,30 ,30 岁岁, ,肝穿活检。光镜诊断肝穿活检。光镜诊断: :慢迁肝。虽慢迁肝。虽 未见典型碎屑样坏死未见典型碎屑

12、样坏死, ,但不除外活动性变化。电镜但不除外活动性变化。电镜 见肝细胞大见肝细胞大, ,疏松疏松, ,细胞周围间隙加大细胞周围间隙加大, ,有微绒毛化有微绒毛化, , 滑面内质网增生滑面内质网增生, ,内含管状体内含管状体, ,肝窦内充塞胶原纤肝窦内充塞胶原纤 维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶, ,周围有淋周围有淋 巴细胞浸润。巴细胞浸润。 电镜诊断电镜诊断: :慢性迁延性乙型病毒性肝炎有轻慢性迁延性乙型病毒性肝炎有轻 微活动。微活动。 慢性迁延性乙型病毒性肝炎慢性迁延性乙型病毒性肝炎 滑面内质网增生滑面内质网增生, ,腔内含量多的乙肝表面抗原管状体。腔内含量多的乙肝表面抗原管状体。em em 8 0008 000 国内外对电镜诊断的价值国内外对电镜诊断的价值, ,在肿瘤应用方面在肿瘤应用方面 报道较多报道较多, ,占占65%65%。 涉及病原学的诊断涉