2019最新新人教版生物选修1课题2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》学案

1、2019 最新新人教版生物选修1 课题 2多聚酶链式反应扩增 DNA片段学案片段学习目标：1、了解 PCR技术的基本操作2、理解 PCR的原理3、讨论 PCR的应用重点： PCR的原理和PCR的基本操作难点： PCR的原理基础知识PCR技术扩增DNA的过程 , 与细胞内DNA复制过程 类似：1细胞内 DNA复制条件分析：条件组分作用模板DNA的两条单链提供复制的模板原料四种脱氧核苷酸合成 DNA子链的原料酶解旋酶打开 DNA双螺旋DNA聚合酶催化合成 DNA子链能量ATP为解螺旋和合成子链供能引物RNA为 DNA 聚合酶提供合成的 3端起点2细胞内 DNA复制过程的解析：解旋：解旋酶、 ATP

2、,DNA两条链打开 , 形成两条 DNA单链。引物结合：在DNA单链 3端与 DNA反向配对结合。DNA聚合酶结合： DNA聚合酶与模板链结合, 标志着单链合成开始。子链合成： DNA聚合酶从引物 3端开始 , 将配对的脱氧核苷酸连接起来。后续加工： DNA聚合酶 I 将引物切去 , 并合成空缺处的 DNA单链 , 再由 DNA连接酶将不连续的 DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链, 滞后链）子链合成特点：。思考 DNA分子能准确复制的原因有哪些？。3 DNA 分子复制的人工控制解开螺旋：在时 ,DNA 双螺旋打开 , 形成两条 DNA单链 , 称为变性。1 / 4恢复螺旋：在左右时 ,

3、两条 DNA单链重新形成双螺旋结构, 称为复性。复制条件：反应场所：（自动温度周期性调节）。思考缓冲液相当细胞内的什么成分？（核基质）4 PCR的反应过程变性复性延伸。变性：在时 DNA解旋复性：在时引物与DNA单链结合延伸：在时合成DNA子链（两个引物间的序列）实验操作（1） PCR反应体系：缓冲液、,、两种 RNA 引物 ,水（2） 实验操作步骤按照 PCR反应体系配方配制反应液；将 PCR反应体系50 L 用微量移液器转移到微量离心管（0.5mL）中；将微量离心管放到PCR仪中；设置 PCR仪的工作参数。DNA 在 PCR仪中大量扩增。2 4 水浴法：将微型离心管依次在、的恒温水浴锅中循

4、环处理相应时间。3实验注意事项（ 1）避免外源 DNA 污染：所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。（ 2）缓冲液和酶分装成小份 , 20 低温保存。（ 3 ）每添加一种反应成分 ,更换一个移液器的枪头。（ 4）混匀后离心处理 ,使反应 液集中在离心管底部。（三）课堂总结、点评多PCR原理DNA 的复制需要酶、原料、能量、引物聚DNA 的变性和复性受温度影响酶链式PCR过程变性复性延伸反应扩操作步骤配制 PCR反应体系移入离心管增2 / 4DNADNA 扩增设置工作参数放入 PCR片（五）巩固练习1 DNA 分 子复制时 ,解旋的两条链中（）A 仅一条作为复制模板B 两条链作为模板并复制出

5、两个不同的DNA 分子C 两条链作为模板并复制出两个相同的DNA 分子D 两条链作为模板,各自合成一条子链 ,然后两条母链重新结合为原来的双螺旋分子,两条新链结合成一个全新的DNA 分子2.下列关于 DNA 复制过程的正确顺序是（）互补碱基对之间氢键断裂互补碱基对之间形成氢键DNA 分子在解旋酶的作用下解旋以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对子链与母链盘旋成双螺旋状结构ABCD 3.下列各项过程中 ,遵循“碱基互补配对原则”的有（） DNA 复制 RNA 复制转录翻译逆转录ABCD4.实验室内模拟生物体DNA 的复制必需的一组条件是（）酶 游离的脱氧核苷酸 ATP DNA 分子 mRNA tR

6、NA 适宜的温度 适宜的酸碱度ABCD5.利用 PCR技术 ,把一个双链 DNA 分子当作第一代 ,经过 3 次循环 ,在第四代 DNA 分子中 ,有几条第一代脱氧核苷酸的长链？（）A 2B 4C8D16,6.关于 DNA 分子的叙述中 ,正确的是（）A .DNA 的两条链是极性相同,同向平行B.DNA的两条链是极性相同,反向平行C.DNA 的两条链中极性不同,反向平行的D.DNA的两条链是极性不同,同向平行7.假设 PCR反应中 ,只有一个 DNA 的片段作为模板 ,请计算在 30次循环后 ,反应物中大约有多少这样的DNA 片段（）A 215B230C 260 D2318.DNA 的合成方向

7、总是（）延伸。A 从 DNA 分子的左端向右端B 从 DNA 分子的右端向左端C 从子链的 5,端向 3,端D从子链的 3,端向 5,端9.要使 PCR反应在体外的条件下顺利地进行,需要严格的控制（）A 氧气的浓度B 酸碱度C 温度D 大气的湿度3 / 410.DNA 分子经 PCR反应循环一次后,新合成的那条子链的脱氧核苷酸的序列应与（）A 模板母链相同B 非模板母链相同C 两条模板母链相同D 两条模板母链都不相同11. 在（）的温度范围内 ,DNA 的双螺旋结构解开A. 10 20B. 80 100C. 20 30D. 40 6012. 关于 DNA的复制 , 下列叙述正确的是（）A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从 5端延伸DNA链B. DNA复制不需要引物C. 引物与 DNA母