各种培养基配方

1、1营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml，ph7.4。制法：按上述成分混合，溶解后校正ph，121高压灭菌15min。2营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000ml，ph7.2。制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正ph，加入琼脂，分装于烧瓶内，121，15min高压灭菌备用。3mrs培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，k2hpo42g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1ml，mgso4 .7h2o 0.58g，mnso4 4h2o 0.25g，（琼脂1520g），蒸馏水100

2、0ml。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调ph至6.26.4，分装于三角瓶中，121,灭菌15min。4脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。制法：将适量的牛奶加热煮沸2030min，过夜冷却，脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108条件下蒸汽灭菌1015min，即得脱脂乳培养基。5培养基a成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，nacl5.0g，琼脂15.0g，水1000ml。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调ph至7.07.2，分装于三角瓶中，121，灭菌15min。6ptyg培养基成分：胰

3、胨tryptone（oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1ml，琼脂1520g，l-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4ml。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调ph至6.87.0，分装于三角瓶中，115灭菌30min。盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，k2hpo41.0g，kh2po41.0g，mgso4 。7h2o 0.48g，naco3 10g，nacl 2g，蒸馏水1000ml，溶解后备用。7豆芽汁液体培养基成分：豆芽汁10ml，磷酸氢二铵1g，kcl 0.2g，mgso4.7h2o 0.2g，琼脂20g。制法：将以上成分

4、加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调ph至6.26.4，分装于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色5.26.8紫色）作为指示剂，115灭菌20min。豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽200g洗净，在1000ml中煮沸30 min，纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000ml。8麦芽汁琼脂培养基成分：优质大麦或小麦，蒸馏水，碘液。制法：取优质大麦或小麦若干，浸泡612h，置于深约2cm的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干。称取300g麦芽磨碎，加1000ml水，38保温2h，再升温至45，30min，再提高到50，30min，再升至60，糖化1

5、1.5h。取糖化液少许，加碘液12滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤。如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约20ml调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至10倍，调ph56，用于酵母菌培养；稀释至56倍，调ph7.2，可用于培养细菌，121灭菌20min。9查（察）氏培养基成分：nano3 2g，k2hpo4 1g，mgso4. 7h2o 0.5g，kcl 0.5g，feso4.7h2o 0.01g，蔗糖30g，琼脂1520g，蒸馏水1000ml，ph值自然。制法：加热溶解，分装后121灭菌20min。10马铃薯葡萄糖

6、琼脂培养基（pda）成分：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，水1000ml。制法：ph值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取200g加入1000ml蒸馏水，煮沸20min，用纱布过滤，滤液补足水至1000ml，再加入糖和琼脂，溶化后分装，121灭菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000ml培养基中，分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。11py基础培养基成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨 (trypticase) 0.5g，盐溶液 4.0ml，蒸馏水1000ml。盐溶液成分：cacl2 0.2g，mgso4.7h2o

7、 0.48g，k2hpo4 1.0g，kh2po4 1.0g，nahco3 10.0g，nacl 2.0g，蒸馏水1000ml。制法：加热溶解，分装后121灭菌20min。12甘露醇琼脂培养基（msa）成分：牛肉浸膏1g，月示胨no.3（difco）10g，d-甘露醇10g，nacl 75g，琼脂约13g，酚红0.025g，水1000ml，ph7.27.6制法：按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调ph至7.40.2。加1%的酚红溶液2.5ml，混匀。121高压灭菌15min13高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）可溶性淀粉20g，kno3 1g，nacl 0.5g，

8、k2hpo40.5g，mgso4.7h2o 0.5g，feso4.7h2o 0.01g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，ph7.27.4，121灭菌20min。14淀粉铵盐培养基 （主要用于霉菌、放线菌培养）可溶性淀粉10g，（nh4）2so4 2g，k2hpo4 lg，mgso4.h2o lg，nacl 1g，caco3 3g，蒸馏水1000ml，ph7.27.4，121灭菌20min。若加入1520g琼脂即成固体培养基。15麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）葡萄糖1.0g，kcl 1.8g，酵母汁2.5g，醋酸钠8.2g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，ph自然，0.7kg/cm2灭菌30mi

9、n。16高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用)硝酸钠2g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁（mgso4 7h2o）0.5g，氯化钾 0.5g，硫酸亚铁0.01g，氯化钠60g，蔗糖30g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，115灭菌30min。注：分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。17糖、醇类发酵基础培养基（1）一般细菌常以休和利夫森二氏培养基蛋白胨5g，nacl 5g，k2hpo4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g，琼脂56g，1溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝）3ml，蒸馏水1000ml，ph7.07.2，分

10、装试管，培养基高度约4.5cm，115灭菌20min。（2）芽孢菌培养基(nh4)2hpo4 1.0g，kcl 0.2g，mgso4.7h2o 0.2g，酵母膏0.2g，琼脂56g，糖或醇类10.0g，蒸馏水1000ml，溴甲酚紫（0.04）15ml，ph7.07.2，分装试管，培养基高度约45cm，112灭菌30min。（3）乳酸菌培养基蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐温80（tween 80）0.5ml，糖或醇10g，琼脂56 g，蒸馏水（自来水）1000ml，加入1.6溴甲酚紫溶液约1.4ml。以上调ph6.87.0，分装试管，112灭菌30min。18硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验

11、用）蛋白胨5.0g，kno30.2g, 蒸馏水1000 ml，ph7.4，每管分装45ml，121灭菌1520min。吲哚实验培养基：1胰蛋白胨，调ph7.27.6，分装1/31/4试管，115灭菌30min。19硫化氢试验（纸条法）培养基蛋白胨10g，nacl 5g，牛肉膏10g，半胱氨酸0.5g，蒸馏水1000ml，ph7.07.4，分装试管，每管液层高度45cm，112灭菌2030min。另外将普通滤纸剪成0.51cm宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用510的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。20尿素培养基(尿酶试验)成分：蛋白胨1.0g，葡萄糖1.0g，n

12、acl 5.0g，kh2po4 2.0 g，0.4酚红3.0ml，琼脂20.0g，20尿素100.0ml，ph7.17.4。制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正ph值，加入琼脂，加热熔化并分装于三角瓶，121灭菌15min，冷却至5055，加入过滤除菌的尿素溶液，分装于灭菌试管内，摆成琼脂斜面备用。21氮源利用基础培养基kh2po4 1.36g，nah2po4 2.13g，mgso47h2o 0.2g，feso4.7h2o 0.2g，cacl2 0.5g，葡萄糖10.0g，蒸馏水1000ml。将需要测定的氨基酸、氨态氮（如磷酸氢二氨）、硝态氮（如硝酸钾）加入到上述基础培养基中，使其终浓度

13、为0.050.1，如测定菌不能利用葡萄糖为碳源，可用其它碳源代替（终浓度为0.20.5），另做一份不加氮源的空白对照，调ph7.07.2，分装于试管，每管45ml，112灭菌2030min，制备出的培养基要求无沉淀。22甲基红培养基（m.r及v-p试验用）蛋白胨7.0g，葡萄糖5.0g，k2hpo4（或nacl）5g，水1000ml，ph7.07.2，每管分装45ml，115灭菌30min。23动力、靛基质、尿素（miu）综合培养基 （用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用）蛋白胨（含色氨酸）30 g，kh2po4 2g、nacl 5g、琼脂3 g、0.2%酚红酒精溶液2ml、尿素20g、蒸馏水1

14、000ml。分装于小试管，112灭菌15min，灭菌后液体应呈淡黄色。24半固体培养基（用于细菌的动力试验）牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，琼脂35g，蒸馏水1000ml，ph7.27.4，熔化后分装试管（8ml）121灭菌15min，取出直立试管待凝固。25m17琼脂培养基（分离、培养乳球菌等的选择培养基）植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗坏血酸0.5g，牛肉膏2.5g，mgso47h2o 0.01g，ß-甘油磷酸二钠19g，蒸馏水1000ml，121灭菌15min。26蛋白胨水溶液（靛基质试验用）蛋白胨20.0g，nacl 5.0g，蒸馏水1000ml，ph7.4，

15、121灭菌15min。27精氨酸双水解酶实验培养基成分：蛋白胨1g，氯化钠5g，k2hpo40.3g，l-精氨酸10g，琼脂10g，酚红0.01g，蒸馏水1000ml。制法：除酚红外，将以上各成分溶解，调节ph7.07.2，加入指示剂，分装试管，培养基高约45cm，121灭菌20min备用。28葡萄糖氧化发酵培养基成分：蛋白胨2g，氯化钠5g，1溴百里酚蓝水溶液3ml，琼脂56g，k2hpo40.2g，葡萄糖1，蒸馏水1000ml。制法：除溴百里酚蓝外，溶解以上各成分，调节ph值为6.87.0，分装试管，用115灭菌20min备用。29假单胞菌选择培养基（psa）基础成分：多价胨16g，水解酪

16、蛋白10g，硫酸钾10g，氯化镁1.4g，琼脂11g，甘油10ml，蒸馏水1000ml，ph7.10.2。cfc选择添加物：溴化十六烷基三甲胺10mg/l，梭链孢酸钠10mg/l，头孢菌素50mg/l。制法：先将基础成分加热煮沸使之完全溶解，121，15min条件下灭菌。冷却到50备用。当基础培养基冷却到50后加入溶解后过滤除菌的cfc补充物，完全混合后倒平板备用。30乳糖胆盐发酵培养基成分：蛋白胨20g，猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25ml，蒸馏水1000ml，ph7.4。制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正ph，加入指示剂，分装每管10ml，并放入一

17、个小倒管，115，15min高压灭菌.注：双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。31伊红美兰琼脂培养基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g，琼脂17g，2%伊红y溶液20ml，0.65%美兰溶液10ml，蒸馏水1000ml，ph7.1。制法：将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中，校正ph，分装于烧瓶内，高压灭菌121，15min备用。临用时，加入乳糖，并加热溶化琼脂，冷至5055，加入伊红和美兰溶液，摇匀，倾注平板。32乳糖发酵培养基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25ml，蒸馏水1000ml，ph7.4。制法：将蛋白胨、乳糖溶于水中，校正ph，加入

18、指示剂，按检验要求分装30ml、10ml或3ml，并放入一个小倒管，115，15min高压灭菌。33胰酪胨大豆肉汤成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化钠100g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000ml。制法：将上述成分混合，加热并轻轻搅拌溶液，分装后12115min高压灭菌。最终ph7.30.2。347.5%氯化钠肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠75g，蒸馏水1000ml，ph7.4。制法：将上述成分加热溶解，校正ph，分装试管，12115min高压灭菌。35豆粉琼脂成分：牛心消化汤1000ml，琼脂20g，黄豆粉浸液50ml，ph

19、7.47.6。制法：将琼脂加在牛心消化汤中，加热溶解，过滤。加入黄豆粉浸液，分装每瓶100ml，12115min高压灭菌。36血琼脂平板成分：豆粉琼脂100ml，脱纤维羊血（或兔血）510ml。制法：加热融化琼脂，冷至50，以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装灭菌试管，摆成斜面。37aird-parker氏琼脂平板成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏1g，丙酮酸钠10g，甘氨酸12g，氯化锂（licl6h2o）5g，琼脂20g，蒸馏水950ml，ph7.5。增菌剂的配法：3050%卵黄盐水50ml与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10ml混合，保存在冰箱内。制法：将各成分加到蒸

20、馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至25，矫正ph。分装每瓶95ml，121高压灭菌15min。临用时，加热融化琼脂，冷至50，每95ml加入预热至50的卵黄-亚碲酸钾增菌剂5ml，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。38肉浸液成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000ml，ph 7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后矫正ph7.47.6煮沸并过滤，分装烧瓶，

21、121，30min高压灭菌。39兔血浆成分：柠檬酸钠0.106 mol/l（31.3g na3c6h5o72h2o溶于1l蒸馏水中）制法：一份加兔血9份混合后离心2000rpm，10min吸取上清液即为兔血浆。40肠毒素产毒培养基成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化钠5g，磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，硫酸镁0.2g，菸酸0.01g，蒸馏水1000ml，琼脂1012g（固体透析培养用），ph7.27.4。41葡萄糖肉浸液肉汤成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，葡萄糖10g，蒸馏水1000ml，ph7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，

22、混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化钠和磷酸盐，溶解后校正ph，煮沸并过滤、分装，12130min高压灭菌。42牛心浸液成分：绞碎牛心500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000ml，ph7.47.6。制法：将绞碎牛心500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正ph，煮沸并过滤、分装，121，30min高压灭菌。43匹克氏肉汤 成分：含1%胰蛋白胨的

23、牛心浸液200ml，1：25000结晶紫盐水溶液10ml，1：800三氮化钠溶液10ml，脱纤维兔血（羊血）10ml。制法：将上述已灭菌的各种成分，无菌依次混合，分装于无菌试管内，每管2ml，保存冰箱内备用。44胰蛋白胨大豆胨琼脂（tsa）成分：胰蛋白胨15g，大豆胨5g，氯化钠5g，琼脂约13g，蒸馏水1000ml，ph7.17.5。制法：按量将各成分溶解，加热使完全溶解，调ph值，121，15min灭菌。45缓冲蛋白胨水(bp)培养基成分：蛋白胨l0g，nacl5g，na2hpo4.12h20 9g，h2po4 1.5g，蒸馏水1000ml，ph7.2。制法：121灭菌15min，沙门氏菌

24、前增菌使用。46氯化镁孔雀绿(mm)增菌液成分：甲液：胰蛋白胨5g，nacl 8g，kh2p04 1.6g，蒸馏水1000m1乙液：mgcl2 40g，蒸馏水100ml丙液：0.4孔雀绿水溶液制法：分别按上述成分配好后，121灭菌15min备用。临用时取甲液90ml、乙液9ml、丙液0.9ml以无菌操作混合即成。47四硫磺酸钠煌绿(ttb)增菌液成分：多胨或胨1g，caco3 10g，na2s203 30g，蒸馏水1000m1。制法：将各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100m1。分装时应随时振荡，使其中的caco3混匀。121灭菌15min备用。临用时每100m1培养基中加入碘溶液2m1

25、、0.1煌绿1m1。 48亚硒酸盐胱氨酸(sc)增菌液成分：蛋白胨5g，乳糖4g，亚硒酸氢钠4g，na2hpo4 5.5g，kh2po4 4.5g，l胱氨酸0.01g，蒸馏水1000m1，ph7.0。制法：将除亚硒酸氢钠和胱氨酸以外的各种成分溶解于900ml蒸馏水中，加热煮沸，冷却备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100ml蒸馏水中，加热煮沸，冷却，以无菌操作与上液混合。再加入1l-胱氨酸氢氧化钠溶液1m1。分装于灭菌瓶中，每瓶l00ml。49亚硫酸铋琼脂(bs)培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g，feso40.3g，na2hpo4 4g，煌绿0.025g，柠檬酸铋铵2g，na2so46

26、g，琼脂20g， 蒸馏水1000ml，ph7.5。制法：将前5种成分溶解于300ml蒸馏水中，再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50m1蒸馏水溶解。将琼脂于600ml蒸馏水中煮沸溶解，冷至80左右。将以上三液合并，补充蒸馏水至1000m1，校正ph，加0.5煌绿水溶液5ml ；摇匀。冷却至5055，倾注平板。注：此培养基不需高压灭菌。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。50dhl琼脂培养基成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g，乳糖10g，蔗糖10g，去氧胆酸钠1g，na2s2032.3g，柠檬酸钠1g，柠檬酸铁铵1g，中性红0.03g，琼脂20

27、g，蒸馏水1000ml，ph7.3。制法：除中性红和琼脂外，将其他成分溶解于400m1蒸馏水中，校正ph值。再将琼脂溶于600ml蒸馏水中，两液合并，加0.5中性红水溶液6ml，待冷至5055，倾注平板。51he琼脂培养基成份：月示 胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖g，水杨素2g，胆盐20g，nacl 5g，琼脂20g，蒸馏水1000m1，0.4溴麝香草酚蓝溶液16ml，andrade指示剂20ml，甲液20ml，乙液20m1。制法：将前七种成分溶解于400ml蒸馏水中。作为基础液，加入甲液和乙液，校正ph值为7.5，再加入指示剂；将琼脂溶于600m1蒸馏水中。二者合并，待冷至5055，

28、倾注平板。注：此培养基不可高压灭菌；andrade指示剂：酸性复红0.5g，1m naoh溶液16m1，蒸馏水100ml。制法为：将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如果复红退色不全，再加氢氧化钠溶液12ml。甲液：na2s203 34g，柠檬酸铁铵4g，蒸馏水100m1。乙液：去氧胆酸钠10g，蒸馏水100ml。52s.s.琼脂（1）基础培养基成分：牛肉膏5g，月示 胨5g，三号胆盐3.5g，琼脂17g，蒸馏水1000ml。制法：将牛肉膏、月示 胨和胆盐溶解于400ml蒸馏水中，将琼脂溶于500m1蒸馏水中，二液混合，121灭菌15min备用。 （2）完全培养成分：基础培养基10

29、00ml，乳糖10g，柠檬酸钠8.5g，na2s2038.5g，10柠檬酸铁溶液10m1，1中性红溶液2.5m1，0.1煌绿溶液0.33m1。制法：加热熔化基础培养基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均匀，校正ph值为7.0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。注：制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48h内使用；煌绿溶液配好后应在10d以内使用。53靛基质试验培养基成分：蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000ml，ph7.37.5。制法：称取各成分，加入水中加热溶化。用1mol/l naoh调至ph 7.47.5。分装小试管，每管约3ml，116，15min高压灭菌后410保存备用。5

30、4三糖铁琼脂（tsi）成分：蛋白胨20g，硫代硫酸钠0.2g，乳糖10g，蒸馏水1000ml，硫酸亚铁铵0.2g，蔗糖10g，酚红0.025g，氯化钠5g，牛肉膏5g，琼脂12g，葡萄糖1g，ph7.4。制法：将除琼脂和酚红以外的各种成分溶解于蒸馏水中，校正ph。加入琼脂，加热煮沸以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5ml，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121高压灭菌15min后放置高层斜面备用。55尿素琼脂成分：蛋白胨1g，葡萄糖1g，0.4%酚红溶液3ml，蒸馏水1000ml，氯化钠5g，磷酸氢二钾2g，琼脂20g，20%尿素溶液100ml，ph7.20.1制法：将除

31、尿素和琼脂以外的成分配好，并校正ph，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。121高压灭菌15min，冷至5055，加入经除菌过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%。最终ph为7.20.1。分装于灭菌试管内，放成斜面备用。56onpg培养基成分：邻硝基酚d-半乳糖昔(onitrophenyldgalactopyranoside) (onpg) 60mg，0.01mol/l磷酸钠缓冲液(ph7.5) 10ml，1%蛋白胨水(ph7.5) 30ml制法：将onpg溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm75mm试管，每管0.5ml，用橡皮塞塞紧。57氨基酸脱羧酶试验培养基（赖氨酸培养基）成分

32、：蛋白胨5g，酵母浸膏3g，葡萄糖1g，蒸馏水1000ml，1.6%滇甲酚紫乙醇溶液1ml，l氨基酸或dl氨基酸0.5或1g/100ml，ph6.8。制法：除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100ml，分别加入赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸等各种氨基酸。l氨基酸按0.5%加入，dl氨基酸按1%加入。再行校正ph至6.8。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内，每管0.5ml，上面滴加一层液体石蜡，115高压灭菌10min。58氰化钾(kcn)培养基成分：蛋白胨10g，氯化钠5g，磷酸二氢钾0.225g，磷酸氢二钠5.64g，蒸馏水1000ml，0.5%氰化钾溶液20ml，ph7.6。制法：将除

33、氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100ml培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0ml(最后浓度为110000)，分装于12mm100mm灭菌试管，每管约4ml，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4冰箱内，至少可保存两个月。同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。59丙二酸钠培养基成分：酵母浸膏1g，硫酸铵2g，磷酸氢二钾0.6g，磷酸二氢钾0.4g，氯化钠2g，丙二酸钠3g，0.2%溴麝香草酚蓝溶液12ml，蒸馏水1000ml，ph6.8。制法：先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正ph后再加入指示剂，分装试管，121高压灭菌15min。60氧

34、化酶试验试剂（1）1% 盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配制，干冰箱内避光保存。（2）1% 四甲基对苯二胺溶液：将四甲基对苯二胺1.0g溶于100.0ml蒸馏水即可。通常使用新鲜配制的试剂，如放置于冷藏库，可在配制后7天内使用。（3）1% -萘酚乙醇溶液。61亚硒酸盐煌绿增菌液 成分：蛋白胨5g，酵母膏5g，甘露醇5g，牛磺胆酸钠1g，20亚硒酸氢钠溶液20m1，0.25mol/l磷酸盐缓冲液(ph7.0) 100ml，2煌绿水溶液0.25ml，蒸馏水900m1。制法：将前三种成分溶于水中，调节ph值为7.0，加入牛磺胆酸钠，加热溶解调ph值（其中干鸡蛋白样品ph8.2土0.1；其它干蛋品ph

35、7.2土0.1，冰蛋品ph7.0土0.1）（具体数值如下）121灭菌15min，放冷备用，此为甲液；称取4g亚硒酸氢钠，溶于19ml蒸馏水中，即为20亚硒酸氢钠溶液20ml，12l灭菌15min，放冷备用，此为乙液；精确称取k2hpo4(无水)2.18g，kh2po4(无水)1.71g，溶解于蒸馏水中，定容至100ml。12l灭菌15min，放冷备用，此为丙液；称取煌绿(灿烂绿)0.2g溶于10ml蒸馏水中，即为2煌绿水溶液，此为丁液。用前将乙液和丙液依次加入甲液中，复查混合液的ph值，加入煌绿溶液。无菌操作分装于无菌烧瓶或试管内，每瓶150m1。培养基应在15d内使用。62gn增菌液成分：胰

36、蛋白胨20g，葡萄糖1g，甘露醇2g，柠檬酸钠5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸氢二钾4g，磷酸二氢钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml，ph7.0。制法：按上述成分配好，加热使溶解，校正ph。分装每瓶225ml，115高压灭菌15min。63苯丙氨酸培养基成分：酵母浸膏3g，di苯丙氨酸(或l苯丙氨酸1g ) 2g，磷酸氢二钠1g，氯化钠5g，琼脂12g，蒸馏水1000ml，制法：加热溶解后分装试管，121高压灭菌15min，使成斜面。64西蒙氏柠檬酸盐培养基成分：氯化钠5g，硫酸镁(mgso47h2o) 0.2g，磷酸二氢铵1g，磷酸氢二钾1g，柠檬酸钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000m

37、l，0.2%溴麝香草酚蓝溶液40ml，ph6.8。制法：先将盐类溶解于水内，校正ph，再加琼脂加热溶化。然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121高压灭菌15min后放成斜面。65葡萄糖铵培养基成分：氯化钠5g，硫酸镁(mgso47h2o) 0.2g，磷酸二氢铵1g，磷酸氢二钾1g，葡萄糖2g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，0.2%溴麝香草酚蓝溶液40ml，ph6.8。制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正ph，再加琼脂加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121高压灭菌15min后放成斜面。66麦康凯琼脂成份：蛋白胨17g，月示 胨3g，猪(牛、羊)胆盐5g，nacl 5g,，琼脂17

38、g，蒸馏水1000m1，乳糖10g，0.01结晶紫水溶液10m1，0.5中性红水溶液5m1。制法：将蛋白胨、月示 胨、胆盐和氯化钠溶于400ml蒸馏水内，校正ph值至7.2。将琼脂于600ml蒸馏水中煮沸溶解。合并两液，分装于烧瓶内，121灭菌15min备用。临用时加热溶化上述琼脂，趁热加入乳糖。冷至5055时加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。 注：结晶紫和中性红水溶液配好后须经高压灭菌。67肠道菌增菌肉汤（ee肉汤）成分：蛋白胨10g，葡萄糖5g，牛胆盐20g，磷酸氢二钠8g，磷酸二氢钾2g，煌绿0.015g，蒸馏水1000ml，ph7.2。制法：按上述成分配好，加热使溶解，校正ph

39、。分装每瓶30ml，115高压灭菌15min。注意必须使用纯净的牛胆盐和煌绿，减少对受损且数量极少的肠杆菌的生长抑制。68克氏双糖铁琼脂(ki)上层培养基成分：血消化汤(ph7.6) 500ml，琼脂6.5g，硫代硫酸钠0.1g，硫酸亚铁铵0.1g，乳糖5g，0.2%酚红溶液5ml。下层培养基成分：血消化汤(ph7.6) 500ml，琼脂2g，葡萄糖1g，0.2%酚红溶液5ml。制法：取血消化汤按上层和下层的琼脂用量，分别加入琼脂，加热溶解。分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内；将下层培养基分装于灭菌的12mm100mm试管内，每管约2ml。115高压灭菌10min。将上层培养基放在

40、56水浴箱内保温；将下层培养基直立放在室温内，使其凝固。等下层培养基凝固后，以无菌操作将上层培养基分装于下层培养基的上面，每管约1.5ml并放成斜面。69elek氏培养基(毒素测定用)成分：胨20g，麦芽糖3g，乳糖0.7g，氯化钠5g，琼脂15g，40%氢氧化钠溶液1.5ml，蒸馏水1000ml，ph7.8。制法：用500ml蒸馏水溶解琼脂以外的成分，煮沸并用滤纸过滤。用1mo1/l氢氧化钠校正ph。用另外500ml蒸馏水加热溶解琼脂。将两液混合，分装试管10ml或20ml。121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂倾注平板。70ec增菌液（36）成分：胰蛋白胨20g，胆盐1.5g，乳糖5

41、g，nacl5g，无水kh2po4 1.5g，无水k2hpo4 4g，蒸馏水1000ml，ph7.0。制法：将各成分溶于水中，调ph值，依据实验需求分装三角瓶或试管。121灭菌15min备用。之后，如果通过灭菌细菌滤器添加1的20mg/l新生霉素，即为改良ec增菌液。71改良山梨醇麦康凯琼脂（tc-smac）成分：蛋白胨7g，眎胨3g，猪胆盐5g，山梨醇10g，nacl 5g，琼脂18g，0.5%中性红水溶液5ml，0.01%结晶紫水溶液10ml，亚碲酸钾2.5mg，头孢肟0.05g，蒸馏水1000ml，ph7.2。制法：除山梨醇、指示剂和抑菌剂外，其余成分溶于水中，溶解后调ph值。115灭菌

42、20min。临用时溶化培养基，冷至50，加入山梨醇、灭菌的结晶紫和中性红；加入过滤除菌的1亚碲酸钾250l和50g/l头孢肟1ml，混匀，倾注倒平板。72lst肉汤成分：胰蛋白胨或胰酪胨（tryticase）20g，nacl 5.0g，乳糖5.0g，k2hpo42.75g，kh2po4 2.75g，月桂基硫酸钠0.1g，蒸馏水1000ml。制法：将各成分溶解于蒸馏水中。分装到有倒立发酵管的20mm150mm试管中，每管10ml。121高压灭菌15min。最终ph6.80.2。73mug-lstlst肉汤中添加4-甲基伞形酮-d-葡萄糖醛酸苷（mug），使终浓度为0.1g/l。74甘露醇卵黄多粘

43、菌素琼脂成分：蛋白胨10g，牛肉膏1g，甘露醇10g，氯化钠10g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，0.2%酚红溶液13ml，50%卵黄液50ml，多粘菌素b 100国际单位/ml，ph7.4。制法：将前面五种成分加入于蒸馏水中，加热溶解，校正ph，加入酚红溶液。分装烧瓶，每瓶100ml，121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50，每瓶加入50%卵黄液5ml及多粘菌素b 10000国际单位，混匀后倾注平板。75酪蛋白琼脂成分：酪蛋白10g，牛肉膏3g，磷酸氢二钠2g，氯化钠5g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，0.4%溴麝香草酚蓝溶液12.5ml，ph7.4。制法：将除指示剂外的各

44、成分混合，加热溶解(但酪蛋白不溶解)，校正ph。加入指示剂，分装烧瓶，121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50，倾注平板。注：将菌株划线接种于平板上，如沿菌落周围有透明圈形成，即为能水解酪蛋白。76木糖明胶培养基成分：胰胨10g，酵母膏10g，木糖10g，磷酸氢二钠5g，明胶120g，蒸馏水1000ml，0.2%酚红溶液25ml，ph7.6。制法：将除酚红以外的各成分混合，加热溶解，校正ph。加入酚红溶液，分装试管，121高压灭菌15min，迅速冷却。77动力-硝酸盐培养基（a法）待添加的隐藏文字内容2成分：蛋白胨5g，牛肉膏3g，硝酸钾1g，琼脂3g，蒸馏水1000ml，ph7

45、.0。制法：加热溶解，校正ph。分装试管，每管10ml，121高压灭菌15min。78甲萘胺醋酸溶液、对氨基苯磺醋酸溶液（硝酸盐培养基）成分：硝酸盐0.2g，蛋白胨5g，蒸馏水1000ml，ph7.4。制法：溶解，校正ph，分装试管，每管约5ml，121高压灭菌15min。硝酸盐还原试剂：（1）甲萘胺醋酸溶液：将甲萘胺0.5g溶解于5mol/l乙酸溶液100ml中。（2）对氨基苯磺醋酸溶液：将对氨基苯磺酸0.8g溶解于5mol/l乙酸溶液100ml中。79氯化钠结晶紫增菌液成分：蛋白胨20g，氯化钠40g，0.0l结晶紫溶液5ml，蒸馏水1000ml，ph9.0。制法：除结晶紫外其他按上述成分

46、配好，加热溶解，约加3氢氧化钾溶液4.5ml，校正ph，加热煮沸，过滤，再加入结晶紫溶液，混合分装试管，121高压灭菌15min备用。803.5氯化钠三糖铁琼脂成分：蛋白胨20g，牛肉膏5g，乳糖10g，蔗糖10g，葡萄糖1g，氯化钠35g，硫酸亚铁铵0.2g，硫代硫酸钠0.2g，琼脂12g，酚红0.025g，蒸馏水1000ml，ph7.4。制法：将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正ph，加入琼脂，加热煮沸使琼脂溶化，加入0.2%酚红溶液12.5ml，摇匀，分装试管，121高压灭菌15min，放置高层斜面备用。81tcbs琼脂（配方1)成分：酵母膏5g，蛋白胨10g，蔗糖20g，硫代

47、硫酸钠10g，柠檬酸钠10g，牛胆酸钠3g，牛胆汁粉5g，氯化钠10g，柠檬酸铁1g，溴麝香草酚蓝（2%溶液）20ml，草酚蓝（1%溶液）4ml，琼脂15g，ph8.6。制法：将上述成分加蒸馏水至1000ml，混合，使全部溶解，校正ph为8.6，加热煮沸，不需高压灭菌，倾注平皿1520ml。注：不分解蔗糖的副溶血性弧菌，在此培养基上生长呈绿色菌落，分解蔗糖的细菌呈黄色菌落。82tcbs琼脂（配方2）成分：酵母浸膏5g，蛋白胨10g，硫代硫酸钠10g，枸橼酸钠10g，牛胆粉8g，蔗糖20g，氯化钠10g，柠檬酸铁1g，溴麝香草酚兰0.04g，麝香草酚蓝0.04，琼脂约13g，水1000ml，ph

48、8.58.7。制法：除指示剂外，将剩余成分混合于1000ml水中，煮沸溶解。调至ph8.58.7，加入指示剂，混匀。再次煮沸12min。无需高压灭菌。83改良campbap培养基成分：胰蛋白胨10g，蛋白胨10g，葡萄糖1g，酵母浸膏2g，氯化钠5g，焦亚硫酸钠0.1g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，硫乙醇酸钠1.5g，万古霉素10mg，多粘菌素b 2500国际单位，两性霉素b(amphotericin b) 2mg，头孢霉素（cephalosporin）15mg，亦可用ceporan)脱纤维羊血50ml，ph7.0土0.2。制法：除抗生素和羊血外，将其他成分混合，加热溶解，校正ph到7.0

49、土0.2。装瓶，每瓶100ml。121高压灭菌15min备用。此为布氏琼脂基础培养基；临用前，加热溶解基础琼脂，冷至60。每100ml基础琼脂中，加入脱纤维羊血5ml、抗生素混合液0.5ml及两性霉素b，头孢霉素混合液0.5ml，摇匀，倾注平板。注：两性霉素b，头孢霉素混合液配法：称两性霉素b 2mg和头孢霉素15mg，加5ml蒸馏水混合即成。84甘氨酸培养基成分：布氏肉汤1000ml，琼脂粉1.6g，甘氨酸(glycine)10g。制法：将以上成分混合，加热溶解，校正ph7.0，分装试管，每管4ml，121高压灭菌15min，备用。85skirrow氏培养基成分：蛋白胨15g，胰蛋白胨(ty

50、ptone) 2.5g，酵母浸膏5g，氯化钠5g，琼脂15g，蒸馏水l000ml，甲氧苄氨嘧啶(trimethoprin，tmp) 5mg，万古霉素(vancomycin) 10mg，多粘菌素b(po1ymyxin) 2500国际单位，冻溶马血70.0ml，ph7.4。制法：除甲氧苄氨嘧啶、抗生素和冻溶马血外，其他成分混合溶解。校正ph74，装瓶100ml。121高压灭菌15min，备用。此即血琼脂基础培养基。临用前，加热溶解基础培养基，冷至60。每100ml基础培养基中，加入冻溶二次的马血及tmp、抗生素混合液0.5ml，摇匀，倾注平板。86庖肉培养基成分：牛肉浸液1000ml，蛋白胨30g

51、，酵母浸膏5g，磷酸二氢钠5g，葡萄糖3g，可溶性淀粉2g，碎肉渣适量，ph7.8。制法：称取新鲜除脂肪和筋膜的牛肉500g，加蒸馏水1000ml和1moll氢氧化钠溶液25ml，搅拌煮沸15min，充分冷却，除去表层脂肪，澄清，过滤，加水补足至1000ml。加入除碎肉渣外的各种成分，校正ph。87卵黄琼脂培养基成分：基础培养基为肉浸液1000ml，蛋白胨15g，氯化钠5g，琼脂2530g，ph7.5。50葡萄糖水溶液。50卵黄盐水溶液。制法：基础培养基分装每瓶100ml。121高压灭菌15min。临用时加热溶化，冷至50，每瓶内加50葡萄糖水溶液2ml和50卵黄盐水悬液1015ml，摇匀，倾

52、注平板。88eb增菌液.成分：胰胨17g，多价胨3g，酵母膏6g，氯化钠5g，磷酸二氢钾2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000ml，ph7.27.4。制法：121高压灭菌15min，使用前加吖啶黄溶液15mg/l、萘啶酮酸溶液40mgl和放线菌酮50mgl，此三种成分要过滤除菌或无菌配制。89胰酪胨大豆琼脂（tsaye）成分：胰胨17g，多价胨3g，酵母膏6g，氯化钠5g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，琼脂15g，蒸馏水l000ml，ph7.27.4。制法：加热溶解，调ph值，分装，121高压灭菌15min备用。90硫酸铁铵半固体(sim)成分：胰胨20g，多价胨6g，硫酸铁铵0.2g，硫代硫酸钠0.2g，琼脂3.5g，蒸馏水1000ml，ph7.