肿瘤免疫治疗

1、肿瘤的免疫治疗,杨海波,主动免疫治疗 细胞疫苗 分子疫苗 dna疫苗 被动免疫治疗 免疫细胞过继治疗 分子水平的治疗 基因治疗,非特异性主动免疫治疗 特异性主动免疫治疗 免疫导向疗法 过继免疫治疗 细胞因子疗法 基因治疗,一、非特异性主动免疫治疗,免疫调节剂 非特异增强免疫功能 卡介苗（bcg）：激活巨噬细胞 短小棒状杆菌：巨噬细胞佐剂 左旋咪唑：调节免疫功能 中草药：提高免疫功能,将处理过的自体肿瘤、培养的肿瘤细胞或异体肿瘤制成的疫苗或基因工程疫苗给病人进行免疫接种，激发宿主自身对肿瘤的特异性细胞免疫和体液免疫反应 细胞疫苗 分子疫苗 dna疫苗,二、特异性主动免疫治疗,（一）、细胞疫苗,1

2、、肿瘤细胞疫苗 2、肿瘤抗原肽或基因修饰的apc疫苗,1、肿瘤细胞疫苗,瘤细胞疫苗 应用肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原作为疫苗,肿瘤细胞在基因水平上的修饰 mhc修饰 协同刺激分子基因修饰 细胞因子基因修饰,基因修饰的肿瘤细胞疫苗 * 基因修饰(mhc分子、协同刺激分子、ck/ckr、am、肿瘤抗原)瘤细胞致瘤性，提高其免疫原性,mhc 修饰的肿瘤细胞疫苗,同系 mhc-i 基因导入肿瘤细胞 上调肿瘤细胞 mhc 分子的表达 刺激免疫系统，使局部细胞因子增加（ifn-、tnf等） 将某些细胞因子基因转导入肿瘤细胞,协同刺激分子修饰的肿瘤细胞疫苗 将b7基因导入肿瘤细胞，诱导免疫效应 b7分子可增

3、强肿瘤细胞刺激cd4细胞合成和分泌il-2 ck/ckr 修饰的肿瘤细胞疫苗 如用il-2基因修饰可诱导产生ctl 用il-2基因修饰可诱导nk细胞的杀伤作用,肿瘤抗原肽或基因修饰的apc疫苗 * 应用肿瘤抗原(肽)刺激apc； * 将肿瘤抗原mrna导入apc； * 将肿瘤抗原cdna转染apc； * 建立dc-瘤细胞嵌合体。 诱导产生特异性的ctl活性，产生特异性的抗肿瘤免疫反应,应用肿瘤抗原(肽)刺激apc,肿瘤相关抗原多肽体外刺激或致敏的dc，在体内可诱导出特异性抗肿瘤免疫反应，并能抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长与转移 用肿瘤细胞的蛋白提取物刺激dc，可诱导针对不同抗原决定簇的ctl克隆 肿瘤

4、抗原多肽刺激的巨噬细胞免疫机体能诱导差生特异的抗肿瘤免疫排斥反应，具有免疫治疗作用,建立dc-瘤细胞嵌合体,与肿瘤细胞融合后的dc，表达其自身的相关分子及细胞因子，同时获得肿瘤细胞的肿瘤抗原信息，能诱导更有效的肿瘤免疫排斥反应,（二） 分子疫苗 1、与肿瘤发生有关的病毒疫苗； 乙肝病毒、乳头瘤病毒、eb病毒,2、重组病毒疫苗： 肿瘤抗原肽与灭活病毒的重组疫苗 增强机体对肿瘤抗原的免疫应答。 肿瘤细胞被病毒感染后，其表面存在有病毒抗原，有加强肿瘤相关抗原的抗原性作用- 病毒对肿瘤抗原的放大作用或病毒佐剂作用,3、癌基因产物的分子疫苗 癌基因点突变(如p21ras)或易位(p210bcr-abl)

5、 编码产物具有较强免疫原性。 4、抗独特型抗体疫苗 某些抗独特型抗体（作为抗原内影像） 模拟抗原（作为疫苗）,独特型（idiotype,id） id乃每一特定bcr、tcr或ig分子v区所含与（自体、异体或异种个体）其他抗体不同的决定基，其可诱导机体产生相应的抗独特型抗体（anti-idiotype ab）。,4、抗独特型抗体疫苗,制备简单，不需先分离鉴别肿瘤相关抗原 以所需抗原的单抗为免疫原制备抗体,5、热休克蛋白（hsp） -肽复合物肿瘤疫苗 hsp可能作为一种载体结合肿瘤特异性抗原 从肿瘤组织中提取的hsp事实上是结合了不同抗原多肽的hsp，免疫机体后可望活化体内多个ctl克隆，从而实现

6、对同一肿瘤内的所有细胞产生杀伤效果的可能。 hsp同种内不具多态性,优点,结合了多种肿瘤抗原 可活化ctl 同种内不具备多态性， 不需要佐剂 可诱导机体产生长寿t细胞免疫,6、粘蛋白疫苗,在上皮来源的肿瘤中，粘蛋白往往呈过度表的状态，因而可能成为免疫治疗的靶分子,7、人工合成的肿瘤多肽疫苗 人工合成taa多肽或构建表达taa的重组病毒疫苗。,（三）、基因工程疫苗 用逆转录病毒、腺病毒等载体将外源基因（肿瘤抗原、抗原肽、mhc抗原、细胞因子等的基因）靶向导入肿瘤细胞内 外源基因与灭活病毒重组-增强免疫原性 将相关基因转入apc进行主动免疫治疗 质粒,肿瘤核酸疫苗（裸dna疫苗）,编码肿瘤抗原的d

7、na(或rna)质粒直接肌肉注射。 骨骼肌具有内化质粒dna或rna的作用 可诱发体液免疫和细胞免疫，并具有抗肿瘤作用 注入的dna不整合入细胞基因组,主动免疫治疗 被动免疫治疗 免疫细胞过继治疗 分子水平的治疗 基因治疗,（二）肿瘤的免疫治疗,(adoptive cellular immunotherapy，ait) 向肿瘤患者转输具有抗肿瘤活性的免疫 细胞直接杀伤肿瘤或激发机体免疫反应 可单独用于临床治疗， 可作为手术、放疗与化疗的补充,过继性细胞免疫治疗,转输lak（淋巴因子激活的杀伤细胞）、til（肿瘤侵润淋巴细胞）、nk细胞、m和ctl等。,淋巴因子激活的杀伤细胞（lak）,选择性的

8、只对肿瘤细胞产生毒性，对正常细胞无影响或损伤轻微 无毒副作用 不依赖荷瘤者的免疫功能 可与化疗、放疗等合用，不影响其它疗法实施 无免疫抑制作用 同种异体lak细胞的过继免疫疗法是安全的,lak细胞体内回输后组织器官分布,在循环中滞留很短 2小时主要分布于肺 2小时后主要分布于肝、脾，少量可致肾 全身应用lak细胞只有少量的效应细胞可以随血循环至肿瘤部位 其分布特点和临床疗效一致,lak细胞的临床应用,所有肿瘤均可用lak/il2过继免疫治疗，但有效率相差甚远 目前认为对肾癌、恶性黑色素瘤及非何杰金淋巴瘤效果较好 对于控制复发与转移及胸腹水的对症治疗疗效明显,til（肿瘤侵润淋巴细胞）,是存在于

9、肿瘤间质内的以淋巴细胞为主的异质性淋巴细胞群体 主要为cd3+ t淋巴细胞 目前认为til具有广谱的抗肿瘤活性 对非肿瘤的正常细胞，特别是正常造血细胞有一定的杀伤作用 对il-2的依赖性低,til分离操作复杂，容易造成污染 多数肿瘤组织中til含量很少，分离培养成功率仅20%左右 难以成为常规治疗方法,evidence for immunosurveillance,infiltration of til cells in malignant tissue,主动免疫治疗 被动免疫治疗 免疫细胞过继治疗 分子水平的治疗 基因治疗,（二）肿瘤的免疫治疗,tumor vaccine,tumor vac

10、cine,tumor cell,tumor cell,1、基于抗体的靶向治疗 2、细胞因子治疗,分子水平的治疗,（1）抗瘤抗体介导的靶向疗法 1)抗体-药物偶合物、免疫毒素(immunotoxin)、抗体-核素偶联物、双功能抗体、抗体-超抗原偶联物导向治疗。,1、基于抗体的靶向治疗,双功能抗体（双特异性抗体） 一个抗体分子中的两个抗原结合部位分别结合两种不同的抗原 一个臂可与肿瘤组织细胞的结合,另一个臂可与效应物如药物等结合,抗体-超抗原偶联物 超抗原是一类能高效刺激t细胞增殖并使之释放大量细胞因子的细菌或病毒产物 不须经apc胞内处理，不受mhc限制 对mhcii类分子阳性或阴性的肿瘤细胞都

11、具有强大的杀伤作用,2)抗体导向酶解前药疗法 (ab directed enzyme prodrug therapy,adept) * mcab与前药活化酶交联 酶在靶部位作用于前药(prodrug) 形成细胞毒性药物。,3）以血管为靶的抗体导向治疗 抗体与抑制新生血管形成的分子(如血管生成素)、阻断促血管内皮细胞生长的分子(如成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子等)偶联。 抑制肿瘤的生长和转移,优点,可用于多种实体瘤，因肿瘤区的血管具有共同特点 抗体注入后可直接与血管内皮细胞结合，不存在抗体药物分子量过大，不易进入肿瘤区的问题 血管内皮细胞是正常细胞，没有产生突变的问题 主要部分内皮细胞

12、破坏，阻塞血管，就可以发挥杀伤大量肿瘤细胞的作用,4)放射免疫导向手术(radioimmunoguided surgery,rigs)治疗 抗体-放射核素体内定位 判断肿瘤侵润基转移范围,从而指导手术清除,use of tumor associated antigensmonoclonal antibodies,（2）抗体用于骨髓净化,异基因骨髓移植-移植物抗宿主病 体外用抗t细胞的单抗以清除供体骨髓中的t细胞 自体骨髓移植-残留的白血病细胞 应用抗细胞表面分化抗原抗体或抗白血病淋巴瘤独特型抗体清楚自体骨髓移植物中的瘤细胞,（3）免疫脂质体导向治疗 用双性磷脂制成一种类似细胞膜的脂质体,用以包

13、裹细胞毒性生物活性物质形成脂质微粒,即为脂质体 将脂质体(liposome)与特异性抗体偶联，形成免疫脂质体(immunoliposome)-包裹抗肿瘤效应物质 经吞饮或吞噬入胞内，释放出内容物,（4）胞内抗体(intrabody)或抗体基因治疗 * 在胞内表达的、针对胞内肿瘤相关分子（癌基因编码产物或端粒酶等）的抗体。 在抗体的n段和c端加入引导序列,可使抗体表达定位于亚细胞部位,输入外源性细胞因子 细胞因子导向疗法 细胞因子基因治疗 细胞因子基因转染免疫效应细胞 细胞因子基因转染肿瘤细胞,2、细胞因子治疗,用正常或野生型基因校正或置换致病基因或引入有治疗价值的其他来源基因 肿瘤基因治疗的策

14、略 基因置换 基因修正 基因转移 基因灭活,基因水平的治疗,基因转移：将外源性目的基因导入病变细胞或其它细胞，目的基因的表达产物饰变缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强，也称基因修饰 基因灭活：利用反义技术特异封闭某些基因的表达,1、免疫分子基因治疗 2、与癌基因有关的基因治疗 3、与抗肿瘤化疗药物相关的转基因治疗 4、其他抗瘤基因治疗,基因水平的治疗,1、免疫分子基因治疗 抗体、细胞因子基因免疫治疗,2、与癌基因有关的基因治疗 * 抑癌基因的导入或修饰； * 反义核苷酸封闭或阻断癌基因； * 主动免疫治疗：将癌基因产物作为“疫苗”。,反义技术 利用针对特异性dna或rna片段按碱基配对的原则人工合成小分子核苷酸序列 与其目的dna和rna序列互补结合 选择性抑制目的基因的翻译或转录过程,3、与抗肿瘤化疗药物相关的转基因治疗 1）肿瘤药物增敏基因治疗 外源基因插入肿瘤细胞后提高瘤细胞对药物的敏感性,2)耐药基因治疗 * 耐药基因（如多药耐受基因multidrug resistance gene)在细胞表达 细胞对毒性药物敏感性 造血干细胞对化疗耐受性,3)