步步高高考生物二轮复习 考前三个月 专题11 教材基础实验 考点33 观察类实验和鉴定提取类实验[教学借鉴]

1、专题11 教材基础实验 考点33 观察类实验和鉴定提取类实验直击考纲能独立完成“知识内容与要求表”所列的实验与探究，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。考点33观察类实验和鉴定提取类实验1观察类实验实验名称细胞的状态观察对象染色剂生物材料(及特殊要求)观察DNA和RNA在细胞中的分布死细胞DNA和RNA的分布甲基绿吡罗红人的口腔上皮细胞DNA、RNA同时存在时要混合使用且现配现用观察线粒体活细胞线粒体健那绿用生理盐水配制健那绿染液，用显微镜观察观察细胞的减数分裂死细胞染色体无(为固定装片)蝗虫精母细胞低温诱导染色体加倍死细胞改

2、良苯酚品红染液洋葱根尖细胞染色前需漂洗干净观察细胞的有丝分裂死细胞龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)观察多种多样的细胞活或死细胞细胞无(无需染色)酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等观察叶绿体活细胞叶绿体藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)观察植物细胞的质壁分离与复原活细胞紫色中央液泡的大小和原生质层的位置紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞 (1)在上述实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除上述实验外，还有什么实验中也用到了显微镜呢？提示上述实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法鉴定”、“探究培养液中酵母菌数量的动态变化”也用到了显微镜。(2

3、)在哪些实验中用到了盐酸？各起什么作用？提示“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，质量分数为8%的盐酸的作用：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；同时使染色质中的DNA与蛋白质分离。在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”、“低温诱导植物染色体数目变化”的实验中，质量分数为15%的盐酸与体积分数为95%的酒精混合制成解离液，使组织细胞相互分散开来。在“探究酶在不同pH下的活性”实验中，盐酸提供酸性环境。研究通过激素的调节过程中，斯他林和贝利斯的实验，在盐酸的作用下，小肠黏膜可能产生一种化学物质。(3)分析下列相关实验中的取材问题。“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中能否选用哺乳动物

4、的成熟红细胞？为什么？提示不能。因为哺乳动物的成熟红细胞无细胞核和细胞器，几乎不含有DNA和RNA。能否用观察叶绿体的材料来观察线粒体？为什么？提示不能。因为叶绿体中的色素的颜色会掩盖线粒体被健那绿染色后的颜色变化。在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞？提示呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢和植物的雌蕊？提示因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。选用菠菜叶观察叶绿体时，为什么要取稍带些叶肉细胞的下表皮？提示因为靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较

5、大而数目较少。为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？提示因其含有中央大液泡。2鉴定提取类实验实验名称试剂颜色生物材料备注淀粉的鉴定碘液蓝色脱色的叶片等若材料有颜色，需先脱色还原糖的鉴定斐林试剂砖红色沉淀苹果或梨匀浆等斐林试剂需现配现用、水浴加热脂肪的鉴定苏丹(或)染液橘黄(或红)色花生种子切片需用高倍镜观察蛋白质的鉴定双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清等先加A液，后加B液，摇匀使用绿叶中色素的提取和分离提取液：无水乙醇；分离液：层析液胡萝卜素：橙黄色；叶黄素：黄色；叶绿素a：蓝绿色；叶绿素b：黄绿色新鲜的绿叶(如菠菜叶)加入二氧化硅是为了研磨得更充分；碳酸钙可防止在研磨中色素被破坏(1)斐

6、林试剂能否用于蛋白质的鉴定？为什么？提示不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂B液是0.01 g/mL的CuSO4溶液，两种试剂的本质不同，斐林试剂的本质是新制的Cu(OH)2，故应将甲液和乙液混匀后使用，而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的Cu2，故应先加A液造成碱性环境，再加B液摇匀使用。(2)脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？提示不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定，肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。(3)绿叶中色素的提取和分离有何区别？提示前者用无水乙醇提取法，原理是色素能够溶于有机溶剂无水乙醇中；而后者用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析

7、液在滤纸条上扩散得快；反之扩散得慢。1判断下列有关观察类实验的叙述(1)人的口腔上皮细胞经处理后被甲基绿染色，其细胞核呈绿色(2014重庆，1A)()(2)使用显微镜观察装片，在10倍物镜下观察到的图像清晰、柔和，若再直接转换至40倍物镜观察时，则除调节细调节器外，还需要调用凹面镜(或调高亮度)、放大光圈(2013上海，13改编)()(3)只有在保持细胞活性的条件下，才能用健那绿染液染色观察动物细胞中的线粒体(2011山东，6C)()(4)若比较有丝分裂细胞周期不同时期的时间长短，可通过“观察多个装片、多个视野的细胞并统计”以减少实验误差(2013福建，4D)()(5)剪取大蒜根尖分生区，经染

8、色在光镜下可见有丝分裂各时期(2014重庆，1B)()(6)在光镜的高倍镜下观察新鲜菠菜叶装片，可见叶绿体的结构(2014重庆，1D)()(7)制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后直接用龙胆紫溶液染色(2014山东，4B)()(8)低温诱导染色体加倍实验中，将大蒜根尖制成装片后再进行低温处理(2014山东，4C)()(9)用改良苯酚品红染色观察低温诱导的植物染色体数目变化(2014四川，4A)()(10)用黑藻叶片进行植物细胞质壁分离实验时，叶绿体的存在会干扰实验现象的观察(2014新课标，4B)()2判断下列有关鉴定提取类实验的叙述(1)检测植物组织中的脂肪，应用的试剂是双缩脲试剂，预期

9、的实验结果为脂肪颗粒被染成红色(2011新课标，6B)()(2)检测植物组织中的葡萄糖，应用的试剂是甲基绿，预期的实验结果为葡萄糖与甲基绿作用，生成绿色沉淀(2011新课标，6C)()(3)鉴定待测样液中的蛋白质时，先加NaOH溶液，振荡后再加CuSO4溶液(2014山东，4A)()(4)还原糖的鉴定实验中隔水加热时，试管中液体的液面应低于烧杯中水的液面(2014江苏，22B)()(5)还原糖的鉴定实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长期保存备用(2014江苏，22D)()(6)纸层析法分离叶绿体色素的实验结果(如图)表明，为叶绿素a，其在层析液中溶解度最低(2010四川，2B和2013

10、广东，6A改编)()(7)在叶绿体色素提取实验中，在95%乙醇中加入无水Na2CO3后可提高色素的溶解度(2013重庆，3D)()3(2014江苏，15)在“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验中，对紫色洋葱鳞片叶外表皮临时装片进行了三次观察(如图所示)。下列有关叙述正确的是()A第一次观察时容易看到紫色大液泡和较大的无色细胞质基质区域B第二次观察时可以发现细胞质壁分离首先发生在细胞的角隅处C吸水纸的主要作用是吸除滴管滴加的多余液体，以免污染镜头D为了节约实验时间，通常可以省略第一次显微观察步骤答案B解析A项，第一次观察时由于未滴加蔗糖溶液，细胞还没有发生质壁分离，较易观察到的是紫色的大液泡，由

11、于此时液泡占整个细胞体积的比例较大，因此观察到的无色的细胞质基质区域应较小。B项，第二次观察时已经通过引流法使紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞浸润在蔗糖溶液中，可以发现首先从细胞的角隅处开始发生质壁分离。C项，吸水纸的主要作用是吸引蔗糖溶液或清水，使溶液浸润整个标本。D项，第一次显微观察是为了获得实验前的现象，以便于和实验中的现象变化进行自身对照，因此不能省略。1(2015安徽，3)右图是某同学在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时拍摄的显微照片。下列叙述正确的是()A甲细胞中每条染色体的着丝点排列在细胞板上B乙细胞中染色体被平均分配，移向细胞两极C甲和乙细胞中的染色体数目相等，DNA含量相同D统计图中处于分裂

12、期的细胞数可计算细胞周期的长短答案B解析根据图示可知：甲细胞处于有丝分裂中期，乙细胞处于有丝分裂后期。甲细胞的每条染色体的着丝点排列在赤道板而不是细胞板上，A错误；乙细胞中的染色体被平均分配，移向细胞的两极，B正确；乙细胞中的染色体是甲细胞中的2倍，DNA含量相同，C错误；细胞周期包括分裂间期和分裂期，统计图中处于分裂期的细胞数不可计算细胞周期的长短，只可计算分裂期所用时间在细胞周期中的比例，D错误。2(2015山东，3)下列有关生物学实验的叙述，正确的是()A叶绿体色素滤液细线浸入层析液，可导致滤纸条上色素带重叠B低温诱导大蒜根尖时间过短，可能导致难以观察到染色体加倍的细胞C用显微镜观察洋葱

13、根尖装片时，需保持细胞活性以便观察有丝分裂过程D将洋葱表皮放入0.3 g/mL蔗糖溶液中，水分交换平衡后制成装片观察质壁分离过程答案B解析色素分离时，若滤液细线浸入层析液，不能分离出各色素带，A错误；低温诱导染色体数目加倍实验中，若诱导大蒜根尖时间过短，染色体数目可能并未加倍，B正确；用显微镜观察洋葱根尖细胞装片时，细胞在解离时已死亡，不可能再继续分裂过程了，C错误；观察植物细胞质壁分离时，先制作装片，再观察细胞质壁分离状况，D错误。3(2015江苏，23)下列关于实验现象与结果的分析，错误的是(多选)()A组织切片上滴加苏丹染液，显微观察有橘黄色颗粒说明有脂肪B组织样液中滴加斐林试剂，不产生

14、砖红色沉淀说明没有还原糖C洋葱表皮细胞滴加蔗糖溶液后，发生质壁分离说明细胞有活性DPCR产物中加入二苯胺试剂，加热变蓝说明有目的DNA产生答案BD解析A项对，组织切片中如果含有脂肪，滴加苏丹染液，显微观察会发现橘黄色颗粒；B项错，斐林试剂的使用需水浴加热；C项对，能发生质壁分离现象，说明原生质层相当于半透膜，细胞有活性；D项错，加入二苯胺试剂，加热变蓝说明有DNA，但不一定是目的DNA。4(2015天津，5)为达到实验目的，必须在碱性条件下进行的实验是()A利用双缩脲试剂检测生物组织中的蛋白质B测定胃蛋白酶分解蛋白质最适温度C利用重铬酸钾检测酵母菌培养液中的酒精D观察植物细胞的质壁分离和复原答

15、案A解析利用双缩脲试剂检测蛋白质时，先加NaOH溶液1 mL，振荡均匀后，滴加34滴CuSO4溶液，振荡后观察颜色变化，A正确；“测定胃蛋白酶分解蛋白质的最适温度”的实验中，自变量为温度，酸碱度是无关变量，应该保持相同且最适宜，胃蛋白酶的最适pH为2左右，B错误；“利用重铬酸钾检测酵母菌培养液中的酒精”的实验中必须是溶解有重铬酸钾的浓硫酸溶液，C错误；“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验中，细胞必须保持活性，碱性环境会破坏细胞活性，D错误。5紫色洋葱的管状叶进行光合作用，鳞片叶用于贮存营养。下列叙述正确的是()A紫色洋葱的色素都存在于叶绿体中B观察细胞的有丝分裂，不宜选取鳞片叶内表皮C可选用管

16、状叶细胞观察同源染色体的联会现象D观察质壁分离及复原，应选取根尖分生区细胞答案B解析洋葱鳞片叶中紫色色素存在于液泡中，A错误；鳞片叶内表皮细胞已成熟，不分裂，不是用于观察细胞分裂的材料，观察细胞的有丝分裂，选择根尖分生区细胞观察，此处细胞正处于不断分裂状态，B正确；管状叶细胞不能进行减数分裂，不能观察到同源染色体的联会现象，C错误；应该选用已具有大液泡的植物细胞(如洋葱的紫色鳞片叶外表皮细胞)观察植物细胞的质壁分离和复原现象，D错误。6为了探究pH对叶绿素稳定性的影响，某研究性学习小组的同学利用菠菜绿叶提取出光合色素粗品，然后在25 的室温条件下进行了如下实验，下列叙述正确的是()实验组号色素

17、溶液(mL)pH处理时间(min)溶液颜色3.08.010绿色3.07.010绿色3.06.010黄绿色3.05.010黄褐色A.提取色素时加入SiO2可维持研磨液pH的稳定B该实验结果表明叶绿素在碱性环境中不会被破坏C弱酸环境中类胡萝卜素的稳定性可能低于叶绿素D可用纸层析法分析两组溶液颜色差异的原因答案D解析提取色素时加入SiO2是为了研磨充分，加入CaCO3可防止研磨中色素被破坏，A错误；该实验结果不能表明叶绿素在碱性环境中不会被破坏，因为提取出的光合色素粗品中可能含有其他影响叶绿素稳定性的物质，没有进行相关的对照实验进行排除，B错误；表中记录表明，弱酸环境中溶液绿色降低，说明类胡萝卜素的

18、稳定性可能高于叶绿素，C错误；可用纸层析法分离色素，通过比较各种色素带颜色分析两组溶液颜色差异的原因，D正确。7下面有关人口腔上皮细胞作为实验材料的叙述正确的是()A人口腔上皮细胞的细胞质接近无色，是观察线粒体的理想实验材料B人口腔上皮细胞没有大液泡，不能发生渗透作用，不能作为研究渗透条件的实验材料C用人口腔上皮细胞观察DNA和RNA在细胞中分布的同时，还可以观察计数染色体数目D用含有15N标记的脱氧核苷酸的培养液培养人口腔上皮细胞时，15N的吸收峰值将出现在细胞分裂间期答案A解析观察线粒体时需用健那绿染液染色，人口腔上皮细胞的细胞质接近无色，可防止发生颜色干扰。人口腔上皮细胞虽然没有大液泡，

19、但可以发生渗透失水或吸水，出现细胞皱缩或膨胀(甚至涨破)等现象。人口腔上皮细胞已高度分化，不能继续分裂，故细胞中不会出现染色体，也不会利用脱氧核苷酸进行DNA的复制。8在“观察洋葱根尖细胞有丝分裂”的实验中，结果与原因分析不符的是()A染色体的染色效果差可能是漂洗不充分B分裂期细胞所占比例小就是因取材时间不恰当C视野中出现细胞重叠现象是解离不充分D染色体无动态变化的原因是解离时细胞已死亡答案B解析在“观察洋葱根尖细胞有丝分裂”的实验中，漂洗的目的就是洗去解离液，使着色效果更好，A正确；视野中看到的分裂期细胞数较少是由于细胞周期中，处于分裂期的时间太短，B错误；视野中出现细胞重叠现象是解离不充分

20、，C正确；染色体无动态变化的原因是解离时细胞已死亡，D正确。9下列关于生物实验中染色的描述，正确的是()A观察细胞中的脂肪，把苏丹染液滴到载玻片的花生子叶薄片上染色B观察植物细胞染色体数目变异，把解离后的洋葱根尖直接放到龙胆紫染液中染色C观察DNA、RNA在细胞中的分布，取口腔上皮细胞直接放入吡罗红甲基绿染色剂中染色D观察线粒体，把烘干处理的口腔上皮细胞放在健那绿染液中染色答案A解析观察细胞中的脂肪，在花生子叶薄片上滴23滴苏丹染液染色3分钟，A正确；观察植物细胞的染色体数目变异实验，解离后需要先进行漂洗再染色，B错误；观察DNA、RNA在细胞中的分布，在用吡罗红甲基绿染色剂染色之前需要用盐酸

21、处理，C错误；线粒体的观察必须保持细胞的活性，不能进行烘干处理，D错误。10(2015福建，26)为了研究从植物中提取的可可碱是否可以作为除草剂，某科研小组开展了可可碱对鬼针草根尖细胞有丝分裂和种子萌发影响的实验探究，结果如下表。请回答：根尖细胞有丝分裂种子发芽率/%分裂期细胞占比/%前期和中期后期和末期03.733.040.6981.50.12.902.160.7468.10.52.101.720.3818.61.01.961.720.242.3注：有丝分裂指数分裂期细胞数/观察细胞的总数100%。(1)本实验需要制作根尖细胞有丝分裂装片，制片过程中根尖解离需要用到的试剂是_，如图为显微镜下

22、观察到的部分细胞图像，箭号所指的细胞处于分裂期的_期。(2)实验结果显示，与对照组相比，当可可碱浓度达到1.0 mmolL1时，在分裂期的细胞中，后期和末期的细胞数目相对_。产生这种结果的原因可能是_，导致染色体无法移向细胞两极。(3)实验结果表明，随着可可碱浓度的升高，种子发芽率_。为探究可可碱影响种子发芽率的可能原因，某同学提出假设：可可碱会降低种子中赤霉素的水平。现欲通过实验检验上述假设，请写出实验设计的基本思路：_。答案(1)盐酸(或盐酸和酒精)中(2)减少可可碱能够抑制纺锤体的形成 (3)降低以不同浓度的可可碱处理鬼针草种子，一段时间后测定各组种子中赤霉素的含量，分析可可碱浓度与赤霉

23、素含量的关系解析(1)实验中将根尖放入盛有盐酸和酒精混合液(11)的玻璃皿中，在室温下解离。据图可知染色体的着丝点排列在细胞中央的一个平面上，细胞应处于分裂期的中期。(2)据表可知，对照组中后期和末期分裂指数为0.69%，可可碱浓度为1 mmol/L的实验组后期和末期分裂指数为0.24%，故较对照组减少。依题意可知：染色体无法移向两极，产生原因可能是可可碱能够抑制纺锤体的形成，从而导致分裂后期和末期的细胞减少。(3)据表可知，随着可可碱浓度的升高，种子发芽率降低。依题意可知探究实验的自变量是可可碱浓度，因变量是种子中赤霉素含量。因此，实验设计思路：设置一定浓度梯度的可可碱处理鬼针草种子，一段时

24、间后测定各组种子中赤霉素的含量，进而得出可可碱浓度与赤霉素含量的关系。11(2015江苏，29)中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)是传统观赏花卉，由于其高度不育，只能进行无性繁殖，因而品种稀少。为了探究中国水仙只开花不结实的原因，有研究者开展了染色体核型分析实验，先制作了临时装片进行镜检、拍照，再对照片中的染色体进行计数、归类、排列，主要步骤如下：剪取新生的根尖卡诺固定液固定1 molL1HCl解离清水漂洗卡宝品红染色制片压片镜检拍照核型分析请回答下列问题：(1)选取新生根尖作为实验材料的主要原因是_。(2)实验过程中用1 molL1HCl解离的目的是_。(3)该实验采用卡宝品红作为染色剂，与卡宝品红具有相似作用的试剂有_(填序号)。双缩脲试剂醋酸洋红液龙胆紫溶液秋水仙素溶液(4)镜检时，应不断移动装片，以寻找处于_期且染色体_的细胞进行拍照。(5)由如图核型分析结果，得出推论：中国水仙只开花不结实的原因是_。(6)为了进一步验证上述推论，可以优先选用_(填序号)作为实验材料进行显微观察。花萼花瓣雌蕊花药花芽答案(1)新生根尖分生区细胞分裂旺盛(2)使组织细胞相互分离(3)(4)中分散良好(5)中国水仙是三倍体，减数分裂时同源染色体联会紊