欧美杨107茎尖脱毒及组培快繁研究

1、欧美杨 107 茎尖脱毒及组培快繁研究欧美杨 107（populus euramericanacv. “Neva”）是中国林科院张绮文研究员于 1984 年从意大利引入我国的杨树新品种, 该品种具有树形美、 干形直、尖削度小、树冠窄小、病虫危害少、生长迅速等优点, 已经成为了我国北方地区广泛栽培的杨树优良品种之一。近年来, 由于欧美杨 107 长期采用无性繁殖方式繁殖苗木 , 导致许多真菌、细菌及病毒的出现, 使得欧美杨 107 种性慢慢退化 , 植株抗逆性 , 速生性明显降低。为恢复欧美杨 107 优良种性 , 并对其品种进行苗木复壮。本研究便采用欧美杨 107 大田茎段、茎尖、叶片、根及其

2、瓶苗茎段、顶芽、瓶苗叶片为实验材料,进行脱毒实验及其检测比较。还采用选育出的 2 株欧美杨 107 优良单株进行组培扩繁等。 以期建立一套操作简单、快速高效且效果稳定完善的脱毒快繁技术体系, 旨在恢复欧美杨107 良种种性 , 为杨树良种的长期推广具有积极的指导意义。主要结论如下 :1 、采用带有顶芽或腋芽的两株优良单株的大田茎段为外植体材料 , 切取长 1cm且每段带有一个顶芽或腋芽的茎段, 接于诱导分化培养基培养,最后得到大量优良单株组培苗。2、取经组织快繁培养得到的优良单株瓶苗茎段进行分化增殖正交实验 , 筛选最适宜的分化增殖配方。结果为1/2MS+6-BA0.45mgL-1+NAA0.

3、05mgL-1+GA1.0mgL-1 的培养基分化增殖效果最好, 最高增殖数达 26。3、用优良单株继代增值的不定芽 , 接种于生根培养基 , 筛选最适合的生根配方 , 实验表明 , 生根效果最理想的培养基为1/2MS+NAA0.02mgL-1+IBA0.05mgL-1, 生根率 100%,平均生根数 5.9 条。4、欧美杨 107 茎尖脱毒培养 , 成功获得 4 个脱毒株系。通过采用（ELISA）检测技术对 4 个株系进行检测 , 结果显示 , 茎尖培养得到的 4 个株系中杨树烟草脆裂病毒（TRV）完全脱除 , 被检测脱毒株系 OD值均小于病毒临界值（ CUTOFF）0.2395;而被测 4

4、 个株系中杨树花叶病毒（PV-1）未完全脱除 , 其中一个株系被检测OD值大于病毒临界值（ CUT OFF）0.2175 。5、为更好脱去欧美杨107 的病毒 , 对欧美杨 107 采用变温热处理结合茎尖脱毒 , 热处理过程中瓶苗生长迅速 , 同时伴有叶变黄 , 皱缩、落地现象发生 , 瓶苗耐受时间最长为 24d, 热处理结束后被剥离的茎尖生长快 , 褐化现象明显减少甚至没有 , 保存率比较高。将热处理培养成的幼苗进行检测 , 结果表明 , 杨树烟草脆裂病毒（TRV）和杨树花叶病毒（ PV-1）两种病毒在被检测植株体内都不存在 , 被检测植株 OD值均小于两种病毒临界值 , 说明热处理与茎尖结合能够有效同时脱除 TRV和 PV-1 两种病毒。6、欧美杨 107 化学结合茎尖处理脱毒, 检测结果说明 , 当添加病毒唑15mgL-1 、20mgL-1 、25mgL-1 时能够同时将 TRV和 PV-1 两种病毒脱除 , 添加这三种浓度被检测植株的OD值均小于两种病毒的临界值 ; 而低于 15mgL-1 时两种病毒均不能脱出。但在实验过程中 15mgL-1 、20mgL-1 、25mgL-1病毒唑处理对试管苗生长均有抑制作用, 浓度越高抑制作用越强 ,15mgL-1 继代多次后 , 抑制作用减轻或降为零 , 瓶苗保存率比较高 , 而 20mgL-1 、