离子色谱法测定药物中氨丁三醇的含量研究

1、离子色谱法测定药物中氨丁三醇的含量研究【摘要】目的：探究离子色谱法对药物中氨丁三醇含量的测定。方法：利用色谱柱、淋洗液、流速、抑制器、进样体积、柱温、检测池温度、检测器分别为DIONEX Ion Pac CS16（250mm*5mm，5.5μm）、水-0.05mol/L 甲烷磺酸-50% 乙腈（60：20：20）、1.0mL/min、DI-ONEX CS S300（4mm），外接水模式，抑制电流30mA、10μL、30、35、电导检测器。结果：氨丁三醇浓度在20μg/mL-200μg/mL 内和峰面积具有较好的线性关系；定量限为5μg/mL，检测限为2μg/

2、mL；加右旋酮洛芬氨丁三醇回收率平均值与RSD 分别为100.4%、2.8%；加碘佛醇注射液回收率平均值与RSD 分别为99.1%、2.3%。结论：离子色谱法具有灵敏性、简便性、专属性与准确性的特点，在不同药物中氨丁三醇含量的测定均可应用。【关键词】离子色谱法；药物；氨丁三醇；含量氨丁三醇作为一种常用药物，其具备一定的药理活性。因为氨丁三醇不存在产生紫外- 可见吸收的官能团，目前的质量标准对此药的质量控制不强，大部分品种质量标准中较少对氨丁三醇的质量进行控制，如磷霉素氨丁三醇等。临床上需要加强对药物中氨丁三醇含量的有效测定，有助于对氨丁三醇质量予以控制【1】。本研究探究了离子色谱法对药物中氨丁

3、三醇含量的测定，现报告如下：1 材料（1）离子色谱仪、电子天平、超声波以及超声水机；（2）氨丁三醇对照品、右旋酮洛芬氨丁三醇；钠、钙单元素标准溶液；磷霉素氨丁三醇、甲烷磺酸等均由中国食品药品检定研究院提供。2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱、淋洗液、流速、抑制器、进样体积、柱温、检测池温度、检测器分别为DIONEX Ion Pac CS16（250mm*5mm，5.5μm）、水-0.05mol/L 甲烷磺酸-50% 乙腈（60：20：20）、1.0mL/min、DI-ONEXCSRS300（4mm），外接水模式，抑制电流30mA、10μL、30、35、电导检测器。2.2 溶液配制

4、2.2.1 对照品精密称取适量的氨丁三醇，加水溶解为含氨丁三醇1000μg/mL 的溶液， 以此作为氨丁三醇的标准溶液，随后精密量得适量氨丁三醇标准溶液，与水溶合稀释成20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、150μg/mL、200μg/mL 的含氨丁三醇溶液。2.2.2 专属性精密量得钠、钙、氨丁三醇标准溶液，与水溶合稀释制成钠钠、钙、氨丁三醇混合液分为别0.2μg/mL、0.2μg/mL、100μg/mL。2.2.3 回收率右旋酮洛芬氨丁三醇的储备液：精密称得

5、适量右旋酮洛芬氨丁三醇，与水溶解并稀释制成300μg/mL 的含氨丁三醇溶液；回收率溶液a：分别精密量得氨丁三醇标准4mL、5mL、6mL， 分别在50mL 的量瓶中放置，再将5mL 右旋酮洛芬氨丁三醇储备液分别加入，用水稀释到刻度，充分摇匀，通过RP 小柱预处理；回收率溶液b：精密量得适量碘佛醇注射液，与水溶液并稀释制成300μg/mL 的含氨丁三醇溶液三份，分别为4mL、5mL、6mL 分别在50mL 的量瓶中放置，再将5mL 碘佛醇储备液分别加入，用水稀释到刻度，充分摇匀，通过RP 小柱预处理。2.2.4 供试品精密称得适量的右旋酮洛芬氨丁三醇、碘佛醇注射液以及磷霉素氨丁三醇

6、，与水溶解且稀释成100μg/mL 的含氨丁三醇溶液，通过RP 小柱预处理。2.3 方法学考察2.3.1 专属性选择专属性溶液，在色谱条件下予以测定，对常规阳离子有无影响氨丁三醇的测定予以考虑，结果显示：氨丁三醇峰和钠离子峰的分离高度为1.7，分离效果较好。2.3.2 线性范围选择氨丁三醇线性对照品溶液，根据色谱条件予以测定。根据浓度（C,μg/mL）对峰面积（S）进行线性回归，回归方程为S=0.1386C+1.8346，r 为0.9990，说明氨丁三醇浓度在20μg/mL200μg/mL 内和峰面积具有较好的线性关系。2.3.3 检测限和定量限选择氨丁三醇线性对照品溶

7、液慢慢稀释为5μg/mL 的含氨丁三醇溶液，含2μg/mL 的含氨丁三醇溶液，前者达定量限，后者达检测限。2.3.4 进样精密度选择100μg/mL 氨丁三醇线性对照品溶液，根据色谱条件反复进样6 次，对氨丁三醇峰面积RSD 计算得0.8%。2.3.5 回收率加右旋酮洛芬氨丁三醇：选择回收率溶液a，根据色谱条件予以测定，利用标准曲线法对回收率进行计算，平均值与RSD 分别为100.4%、2.8%。加碘佛醇注射液：选择回收率溶液b，根据色谱条件予以测定，利用标准曲线法对回收率进行计算，平均值与RSD 分别为99.1%、2.3%。2.3.6 溶液稳定性选择100μg/mL

8、氨丁三醇线性对照品溶液，在1 时、2 时、4 时、6 时、8 时根据色谱条件予以测定，对氨丁三醇峰面积RSD 计算得1.5%。2.4 样品测定选择供试品溶液，根据色谱条件测定，根据标准曲线法对氨丁三醇含量予以测定，结果为右旋酮洛芬氨丁三醇实测含量、理论含量分别为33.4%、32.3%；磷霉素氨丁三醇实测含量、理论含量分别为47.6%、46.7%；碘佛醇注射液实测含量、理论含量分别为3.74μg/mL、3.243.96μg/mL。3 讨论离子色谱法的操作较简便、分析速度较快，具有较强的准确性与专属性。本研究采用DIONEX Ion Pac CS16 色谱柱、等度洗脱、采用甲烷磺酸与硫酸等淋洗液对阳离子进行测定，且在淋洗液中将乙腈，可使氨丁三醇和钠离子的分离效果明显改善，因为有机溶液的引入，抑制器的再生液选择外界水模式，就可以对氨丁三醇进行较好的监测，峰形较