分析条件对薄层色谱法测定TPPCo纯度的影响研究毕业论文

1、摘 要卟啉及其金属配合物是一类具有刚性大环共轭体系的分子。目前，这类化合物表征鉴定手段主要是采用一些大型分析仪器。这些方法不便于TPPCo及其配合物及应用过程中的跟踪、监测。本论文的目的是建立一种方便、快捷的TPPCo分离分析方法，以便于为TPPCo合成应用过程中提供有效的跟踪检测方法。 本课题采用条件实验法，研究了展开剂种类、极性、薄层厚度、活化时间等因素对TPPCo分离行为的影响，获得适宜分离展开条件后采用薄层色谱扫描仪，考察了TPPCo定量测定的线性范围、精密度、检出限。实验结果表明：浓度为0.048g/L的TPPCo在薄层板厚度0.3mm，活化时间为60min，展开体系为环己烷:乙酸乙

2、酯:甲醇（体积比为12:4:6）时，分离效果最好，斑点均不拖尾，Rf为0.5，适于定量分析。（1）当薄层板厚度变大（0.25-0.35mm），样品斑点的比移值变小；（2）展开剂极性变大，样品斑点的比移值变大；（3）薄层板活化时间延长，样品斑点的比移值先变大后变小。TPPCo薄层扫描定量测定的线性范围0.048g-0.384g，标准方程：Y=2193.33X+131.6（r=0.9998），RSD=7.41%，测定准确度仅为87.5%。关键词：薄层色谱；四苯基钴卟啉；卟啉AbstractPorphyrins and their metal complexes are a class of mol

3、ecules with a rigid macrocyclic conjugated system. At present, they are characterized mainly by some large analytical instruments.These methods is not convenient to monitor for TPPCo and its complexes in applications.The purpose of this paper is to establish a convenient, fast methods for separation

4、 and analysis of TPPCo, to provide effective tracking testing methods for TPPCo in the process applications .In experiments, the effects of developing solvent type, polarity, layer thickness and activation time of thin layer on TPPCo separation behavior were studied by conditional experiment methods

5、,and obtained the appropriate separation conditions.Under appropriate separation conditions,linear range,precision,and RSD for determination of TPPCo quantitative were examined by TLC scanner.The experimental results show that: the concentration of 0.048g/L TPPCo in thin layer plate thickness of 0.3

6、mm, activation time for 60min, a system for the cyclohexane: ethyl acetate: methanol (volume ratio of 12:4:6), separation effect is best, spots are not trailing，Rf=0.5,is suitable for quantitative determination.（1）Rf value decreases with the thickness of the thin layer plate increases (0.25-0.35mm);

7、（2）Rf value increases with developing solvent polarity increases;（3）Rf value first increases then decreases with thin layer plate activation time extends.The quantitative determination of linear range of TPPCo is 0.048-0.384g by thin layer scanning, standard equation: Y=2193.33+131.6X (r=0.9998), RS

8、D=7.41%, the measuring accuracy is only 87.5%.Key words:thin-layer chromatography;tetraphenylporphyrin cobalt;porphyrin目 录摘 要IAbstractII第1章 引 言11.1卟啉概述11.1.1卟啉及金属卟啉的结构性质11.1.2卟啉及金属卟啉化合物的合成11.1.3卟啉及金属卟啉的应用11.1.4卟啉及金属卟啉的发展现状与趋势11.2薄层色谱法21.2.1薄层色谱类型21.2.2薄层扫描法及定量分析21.2.3 薄层色谱检测方法及应用31.3课题的目的和意义31.3.1课题

9、的目的31.3.2课题的意义4第2章 实验部分52.1 实验所需药品、试剂52.2主要仪器、设备62.3实验原理62.4实验操作程序72.4.1薄层色谱分离TPPCo的操作程序72.5实验装置图82.6实验步骤82.6.7定性102.6.8定量分析10第3章 实验结果与讨论113.1展开剂的初选113.2展开剂的极性113.3 展开条件对展开结果的影响123.3.1展开剂对展开结果的影响123.3.2活化时间对展开结果的影响133.3.3薄层板厚度对展开结果的影响143.3.4展开剂比例对展开结果的影响153.3.5展开剂比例对展开结果的影响163.4TPPCo试样纯度的测定173.5 TPP

10、Co相对标准偏差（RSD）的计算21第4章 结 论24参考文献25致 谢27第1章 引 言1.1卟啉概述1.1.1卟啉及金属卟啉的结构性质卟啉化合物含四吡咯亚基，由亚甲基桥（=CH-）大分子杂环化合物连接在一起，有26个电子，由于高度共轭呈显色体系1，其母体是卟吩（C20H14N4）。按照其溶解性，卟啉分为易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、亲水有机溶剂的水溶性卟啉化合物和溶于氯仿、二氯甲烷等脂溶性溶剂的脂溶性卟啉化合物。卟啉化合物的熔点通常在300以上，外观呈紫红色固体粉末或结晶，在光敏特性方面表现于：可以释放单线态氧被紫外2或可见光的照射下。高熔点、无树酯化作用、大部分为不溶于水的深色固体，

11、可溶于无机酸，不溶于碱，有较好热稳定性是卟啉及金属卟啉类化合物共同的特性。卟啉与金属离子反应3形成金属卟啉，这类化合物具有独特的化学反应特性，如配体交换反应，氧化还原反应等。1.1.2卟啉及金属卟啉化合物的合成由于金属类卟啉化合物在各个领域有很大的作用，许多学者都做了大量对其合成的相关工作。从1964年Alder4发现的四苯基卟啉反应机理，到1991年，郭灿城等人研究的全新合成方法5，四苯基卟啉的产率由20%提高达30%，1994年高德等人又改变合成方法，使产率达到50%左右。1.1.3卟啉及金属卟啉的应用 卟啉和金属卟啉化合物因其独特化学反应特性而应用广泛。如将卟啉与环糊精体系应用在太阳能用

12、电池中形成高密度分子存贮器6；利用金属卟啉的催化活性氧化环己烷；与许多金属生成金属有机液晶等。近些年，已经许多有金属卟啉配合物保健品上市7，例如补血保健品红桃K，卟啉铁是它的主要成分。1.1.4卟啉及金属卟啉的发展现状与趋势随着新的金属卟啉配合物的合成8和性质的连续不断的研究，卟啉，金属卟啉，坚信在不久的将来，在人们的日常生活中，金属卟啉配合物将被广泛使用，为增强人们生活质量和改善人们生活环境发挥重要的作用。在生活的各个领域中卟啉衍生物的紫外-可见光谱有重要作用，新材料的发展，痕量金属离子9的鉴别，感光材料的选择和在仿真过程中的产生深远的意义，研究卟啉类衍生物的紫外-可见光谱在其各方面都发挥重

13、要的作用，痕量金属离子的鉴定，高新材料的研发，对光敏材料的选定，都有着十分深远的意义，同时为卟啉类化合物的合成、鉴定及应用提供了指导意义。1.2薄层色谱法薄层色谱10是一种重要的分离方法，同时具备柱色谱和纸色谱的优点，适用于少量样品的分离；同时又可以在制作薄层板时，将吸附层加大加厚，样点成一条线，则样品可分离量多达500mg。所以可用它来精制样品；挥发性低，温度高，熔点小并且无法使用气相色谱来鉴别的物质，而此方法完全可以适用。1.2.1薄层色谱类型薄层色谱11有多种分类方式。按照操作方式的不同，薄层色谱有：加压薄层色谱(OPLC)（平铺弹性气垫进行加压）；棒状薄层色谱(TLC-FID)（在石英

14、棒上均匀涂硅胶，之后点样、展开）；胶束薄层色谱(M-TLC)（可较好分离结构相似不溶于水的化合物）；包合薄层色谱(ICC)（因形成不同稳定性的包结配合物而达到分离效果）；离心薄层色谱(CTLC)（利用离心力加速多相流的流动）。按照操作的维度，薄层色谱有二维薄层色谱(2D TLC)：这种薄层色谱是在薄层板的垂直方向上进行展开，因进行了多次展开而对复杂多组分混合物能够实现有效分离。1.2.2薄层扫描法及定量分析薄层色谱扫描仪测定薄层扫描，利用斑点的吸光度和其他性质定量薄层板上斑点的含量的的分析方法。利用斑点的吸光度和其它性质来检测薄层板上斑点含量的定量分析方法。薄层扫描法仪因集合了薄层色谱分离技术

15、、光密度计量技术与计算机技术而成为一种先进的仪器分析方法。通过展开、显色后，用适宜的波长和强度的光扫射到薄层板上样品的斑点。所得斑点的积分值应该和点样量成线性关系，据此定量的目的达到了。薄层扫描通常通过双波长锯齿扫描，显著提高了定量的精度。利用计算机软件对薄层色谱进行各个组分的定量分析，推算出斑点的面积多少和颜色的层次。通过展开和合适的方法定位之后，使得混合物在薄层板上获取一个或多个斑点，根据在薄层上的位置、斑点的颜色来对对样品进行定性分析，不仅对斑点能进行半定量分析，而且还能对斑点进行定量分析。1.2.3 薄层色谱检测方法及应用薄层色谱检测法12：（1） 薄层色谱-傅立叶变换红外光谱联用检测

16、法：该法利用化合物的红外光谱特性对结构复杂物质可提供丰富信息，还能应用其进行定量测定。 （2）薄层色谱-拉曼光谱联用检测法：该法利用分子振动、分子偶极矩增大、红外吸收强度也随之增大，拉曼散射随之增强的原理进行检测。 （3）薄层色谱-核磁共振联用法：用刮刀将展开后的薄层板上样品刮下，然后用适当的溶剂洗脱样品后，采用核磁共振进行检测。与红外光谱、质谱相比较，有较低灵敏性，然而此法能提供有效结构信息，这是无法其他方法相比之处。这样的分析方法需要较大的样量。 （4）薄层色谱-电化学方法联用法：此法将分离出的样品斑点刮下后加入到电化学反应的溶液中而得到电化学检测与分析结果。 （5）薄层色谱-质谱联用法：

17、与其他联用技术不同, 质谱是有效定性的现代分析手段。因为其有较高的灵敏性、良好的选择性、又可提供大量的组合和结构信息、根据薄层色谱与质谱的联用，达成了互惠互利，更根据样品复杂性来定性。薄层色谱方法主要应用13有生物样品、环境有害物质分析，以及无机、有机化合物分析等。1.3课题的目的和意义1.3.1课题的目的由文献报道可知，四苯基卟啉14及其金属络合物的合成反应中，对目标化合物进行相应的表征、鉴定时，需要的分析仪器不仅成本较高，而且价格不菲，同时在卟啉类化合物合成过程中不利于跟踪、监测分析。薄层色谱在中草药品种区分和组分分析、药物合成的定性鉴别、研究质量执行标准与中草药含量定性、纯度测定、药物代

18、谢及其工艺监控分析的合成等方面有着丰富的应用。不久的将来，薄层色谱法将是便于选择的、经济、安全、快速的分析方法，并且会有更加广泛的应用范围。为了满足TPPCo15合成研究的需要，研究薄层色谱法测定TPPCo的分析条件，确定了薄层色谱分离测定TPPCo纯度的条件和方法，可为TPPCo合成研究提供方便实用的检测手段。1.3.2课题的意义参考国内外文献，薄层色谱法16特别适用于微量成分的检出与定量。根据仪器分析发展的方法，铺板技术和点样技术的自动化，薄层色谱与分光光度计，荧光、紫外、红外等光谱仪的相互协作，在各种物质的分离鉴定、含量测定中薄层色谱都起到了至关重要的作用。这对研制和开发高新材料、分析痕

19、量金属均具有重要的指导意义。 本课题对薄层色谱法测定TPPCo纯度的分析条件进行研究，薄层色谱法为TPPCo及其金属配合物17的物理结构、化学特性、溶解性、光谱特征、分离、提纯等多种方面的系统研究开发提供快捷、高效的检测手段，对卟啉及金属卟啉化合物的连续的合成、鉴定、性质研究方面有着出色表现，呈现了薄层色谱法和TPPCo在实际应用中的巨大作用。第2章 实验部分2.1 实验所需药品、试剂实验所用主要试剂、药品见表2-1。 表2-1 实验药品和试剂名称分子式分子量规格生产单位环己烷C6H1284.15分析纯沈阳市华东试剂厂甲苯C6H5CH392.14分析纯沈阳市新化试剂厂TPPCoC44H28N4

20、Co670.9895%实验室自制TPPC44H28N4614.7497%实验室自制苯C6H678.11分析纯沈阳市华东试剂厂乙酸乙酯CH3COOC2H588.11 分析纯天津市永大化学试剂有限公司甲醇CH3OH32.04分析纯沈阳市新化试剂厂羧甲基纤维素钠(C8H11NaO7)n246.16食品添加剂沈阳市试剂一厂薄层层析硅胶化学纯青岛海洋化工有限公司丙酮CH3COCH358.08化学纯天津市富宇精细化工有限公司二氯甲烷CH12Cl284.93分析纯沈阳市华东试剂厂2.2主要仪器、设备实验用的主要仪器和设备见表2-2。表2-2 实验仪器和设备名称型号生产厂家干燥箱101-3上海实验仪器总厂薄层

21、色谱扫描仪KH-3000上海科普生化有限公司调温电热套DRT-TW郑州长城公司微量进样器10L浙江实验设备厂玻璃毛细管华西医科大学仪器厂全自动薄层铺板机TD-II上海科哲生化科技有限公司托盘天平500g北京仪器仪表厂分析天平BT323S（0.1mg）北京中仪友信科技有限公司玻璃板20cm10cm移液管1ml/2ml量筒50ml/100ml玻璃棒20cm烧杯50ml/500ml容量瓶50ml/10ml展开槽双层2001002.3实验原理 主要原理是依据被分离物的极性不同，在一定吸附活性的吸附剂和展开剂极性之间进行竞争吸附而达到分离的目的。由于在溶剂中各个组分的溶解度、吸附剂对其有不同的吸附本领，

22、最终将混合物分离形成一系列的斑点。标准化合物在薄层板上展开，再通过这些已知化合物的Rf值，鉴定各个斑点的组分，进一步采用薄层色谱扫描法定量。2.4实验操作程序2.4.1薄层色谱分离TPPCo的操作程序图2-1薄层色谱分离操作流程2.4.2薄层色谱扫描操作程序图2-2薄层色谱扫描操作流程2.5实验装置图（1）展开装置图图2-3展开槽及展开过程（2） 制板装置图图2-4TD-全自动铺板机2.6实验步骤2.6.1羧甲基纤维素钠的配制0.5g羧甲基纤维素钠粉末放入在100ml沸腾的去离子水中，搅拌使之完全溶解。等冷却到室温装入试剂瓶准备使用。2.6.2TPPCo18溶液的配制用分析天平取2.4mgTP

23、PCo晶体溶解在40ml二氯甲烷溶液中，再转移到50ml容量瓶中定容，摇匀。配得的浓度是0.048mg.L-1，放在避光处准备使用。 TPP母核19溶液的配制：用分析天平取2.3mgTPP母核晶体溶解在40ml二氯甲烷溶液中，再转移到50ml容量瓶中定容，摇匀。配得的浓度是0.046mg.L-1，放在避光处准备使用。2.6.3薄层板的制备硅胶吸附剂是最常用的，使用5g硅胶G和1518m质量分数为0.5%的羧甲基纤维素钠溶液，转移到一个统一的糊，备用。使用时只需将5g硅胶G加1518ml质量分数为0.5%的羧甲基纤维素钠溶液，调成均匀的糊状，备用。一般选用大小为10cm20cm，表面光滑平整的玻

24、璃板。制备薄层的厚度要求约0.20.5mm。薄层板制好后水平自然干燥后使用。2.6.4薄层板的活化在适当温度下把薄层板烘干0.51小时，使吸附剂具有一定含水量，出现一定吸附活性，具有适当吸附活度的操作过程。2.6.5点样开始时用玻璃毛细管点样，定量时需要微量进样器来点样。样点的直径大概在3mm左右，底线到基线的距离为10mm，样点间距大概在20mm左右，样点到玻璃边缘距离至少10mm，再进行点样。2.6.6展开展开剂选取两种以上互溶的有机溶剂，在薄层板点样之后，待溶剂挥发完全，再放入展开槽中展开，展开溶剂一定不能超过样点。展开过程应该在密闭的展开槽中进行，展开时间大概是在15分钟左右。每次展开

25、后，不能反复使用，需要更换。展开溶剂挥发完全后，进行检视，得到斑点清晰、无拖尾。2.6.7定性以金属母核TPP为对照品，金属卟啉钴TPPCo为试样同时在同一厚度的薄层板上进行点样展开。观察展开效果，计算比移值，考察金属卟啉钴TPPCo的分离效果。2.6.8定量分析因为TPPCo本身带有颜色，可以直接使用薄层色谱扫描仪对其进行定量分析,待薄层板上的有机物全部会挥发后，在KH-3000型薄层色谱扫描仪上进行光谱扫描扫描、样品扫描，测量斑点的扫描波长、吸光度，根据其与金属钴卟啉样品溶液浓度的关系进行定量分析。第3章 实验结果与讨论3.1展开剂的初选展开剂的选择条件：对所需成分有良好的溶解性 可使成分

26、间分开 待测组分Rf值在0.2-0.8之间，定量测定在0.3-0.5之间 不与待测组分或吸附剂发生化学反应 沸点适中，粘度较小 展开后组分斑点圆且集中 混合溶剂最好用新鲜配制的。加入少量拖尾抑制剂到展开剂中，如乙酸、乙二酸、甲酸等，类似这些溶剂可以抑制一些碱性物质产生斑尾现象。为了得到分离效果较好的展开剂，需要不停的变换展开剂的组成和比例，直到找到分离效果最好的展开剂。 本实验采用单一展开剂时，展开效果并不好，因此考虑选择混合展开剂来分离混合物。3.2展开剂的极性 利用相似相溶原理来选定展开剂，在薄层色谱实验中，若所选混合物展开剂在吸附薄层板上的点都上移到溶剂的前沿，则表示溶剂的极性太强，倘若

27、所选的展开剂不能让混合物中的组分上移，则表示溶剂极性太弱。仅说明它的极性大概的归属，所以在选择展开剂时可以选择与苯极性相似的物质来讨论，再根据溶剂的洗脱顺序依次进行极性较大的溶剂变换试验。 表2-1展开剂的极性 展开剂溶剂极性参数环己烷-0.2甲苯2.4苯3二氯甲烷3.1四氢呋喃 4.0 乙酸乙酯4.4丙酮5.1甲醇5.13.3 展开条件对展开结果的影响3.3.1展开剂对展开结果的影响薄层板厚度0.3mm，未活化，考察在不同展开剂中TPPCo在薄层板上展开的效果见表3-1。表3-1展开剂对展开效果的影响展开剂甲苯二氯甲烷乙酸乙酯甲苯:乙酸乙酯:甲醇环己烷:乙酸乙酯:甲醇体积比例12:4:112

28、:3:512:6:2展开效果图图1 图2 图3样点说明为母核TPP，为金属TPPCo 样点Rf值10.70.66样点Rf值0.50.630.55饱和时间min15展开时间min15活化时间min0薄层板厚mm0.3 由表3-1可知，用苯-二氯甲烷-乙酸乙酯做展开剂时，试样TPPCo斑点有明显的拖尾现象，母核TPPCo20斑点与溶剂展开前沿几乎一致。甲苯-乙酸乙酯-甲醇、环己烷-乙酸乙酯-甲醇两组展开的样品斑点清晰、无拖尾现象，试样TPPCo斑点的比移值分别是是0.63、0.55，在适宜的比移值0.5-0.8之间，又因为展开剂尽量选择低毒性的，所以环己烷-乙酸乙酯-甲醇是较适宜的展开剂，适于试样

29、TPPCo的展开。3.3.2活化时间对展开结果的影响薄层板厚度0.3mm，展开剂选用甲苯二氯甲烷乙酸乙酯=620.4的混合展开体系，考察在不同活化时间的展开剂中TPPCo在薄层板上展开的效果见表3-2。表3-2活化时间对展开效果的影响展开剂环己烷:乙酸乙酯:甲醇体积比例10:3:8展开效果图图1图2图3样点说明为母核TPP，为金属TPPCo 样点Rf值0.60.650.74样点Rf值0.50.580.65活化时间min03060饱和时间min15展开时间min15薄层板厚mm0.3 由表3-2可知，当环己烷:乙酸乙酯:甲醇=1038(VV)的混合展开溶剂，在0.3mm厚度活化时间为0min，3

30、0min和60min的薄层板上点样展开时，TPPCo试样斑点的比移值分别为0.5，0.58和0.65。所以，在展开剂种类，配比和厚度相同的情况下，TPPCo试样斑点的比移值随薄层板厚度的增加而增大。3.3.3薄层板厚度对展开结果的影响薄层板活化时间60min，展开剂选用环己烷:乙酸乙酯:甲醇比例为10：3：7的混合展开体系，考察在不同薄层板厚度的展开剂中TPPCo在薄层板上展开的效果见表3-3。表3-3薄层板厚度对展开效果的影响展开剂环己烷:乙酸乙酯:甲醇体积比例10:3:7展开效果图图1图2图3样点说明为母核TPP，为金属TPPCo样点Rf值0.80.710.69样点Rf值0.630.610

31、.58饱和时间min15展开时间min15活化时间min60薄层板厚mm5 由表3-3可知，用环己烷:乙酸乙酯:甲醇=1037(V:V)的混合展开溶剂，用活化60min厚度分别0.25mm，0.30mm和0.35mm的薄层板点样展开时TPPCo样品斑点的比移值分别是：0.63，0.61和0.58。所以，在展开剂种类、配比和薄层板活化时间相同的情况下，TPPCo试样斑点的比移值随薄层板厚度的增加而减小。3.3.4展开剂比例对展开结果的影响薄层板厚度0.3mm，活化时间60min，展开剂选用环己烷:乙酸乙酯:甲醇的混合展开体系，考察在不同比例的展开剂中TPPCo在薄层板上展开的

32、效果见表3-4。表3-4展开剂比例对展开效果的影响展开剂环己烷:乙酸乙酯:甲醇环己烷:乙酸乙酯:甲醇环己烷:乙酸乙酯:甲醇体积比例10:4:310:4:510:4:8展开效果图图1图2图3样点说明为母核TPP，为金属TPPCo 样点Rf值0.450.490.71样点Rf值0.330.360.61饱和时间min15展开时间min15活化时间min60薄层板厚mm0.3由表3-4可知，在0.3mm厚度活化60min薄层板上点样，用环己烷-乙酸乙酯-甲醇的混合展开溶剂展开，随着甲醇的用量增加，展开前沿变低，TPPCo试样斑点的比移值分别为：0.33，0.36和0.61，可见随着展开剂极性增加，样品比

33、移值增大。3.3.5展开剂比例对展开结果的影响薄层板厚度0.3mm，活化时间60min，展开剂选用环己烷、乙酸乙酯、甲醇的混合展开体系，考察在不同比例的展开剂中TPPCo在薄层板上展开的效果见表3-5。表3-5展开剂比例对展开效果的影响展开剂环己烷:乙酸乙酯:甲醇环己烷:乙酸乙酯:甲醇环己烷:乙酸乙酯:甲醇体积比例12:4:610:4:68:4:6展开效果图图1图2图3样点说明为母核TPP，为金属TPPCo 样点Rf值0.610.510.38样点Rf值0.430.380.30饱和时间min15展开时间min15活化时间min60薄层板厚mm0.3由表3-5可知，在0.3mm厚度活化60min薄

34、层板上点样，用环己烷-乙酸乙酯-甲醇的混合展开溶剂展开，随着环己烷的用量减少TPPCo试样斑点的比移值分别为：0.43，0.38和0.30，可见随着展开剂极性减小，样品比移值减小。3.4TPPCo试样纯度的测定微量注射器在厚度为0.3mm，活化时间60min的薄层板上点已知浓度为0.048mg/mL不同体积的样点，展开剂选用环己烷:乙酸乙酯:甲醇，比例为12:4:6的混合展开体系为宜，考察在不同点样量的展开剂中TPPCo在薄层板上展开的效果见表3-6。表3-6不同点样量的展开结果展开剂环己烷:乙酸乙酯:甲醇体积比例12:4:6展开效果图样点说明金属TPPCoRf平均值0.5点样量l1，2，5，

35、6.5，8，9.5，11，12.5，14，15.5，17，20饱和时间min15展开时间min15活化时间min60薄层板厚mm0.3由表3-6可知，当环己烷:乙酸乙酯:甲醇=12:4:6(V:V)的混合展开溶剂，在0.3mm厚度活化时间为60min的薄层板上点样量分别是9.5l，11l，和17l时点样展开时，TPPCo试样斑点的比移值均为0.475。所以，展开剂种类、配比、薄层板厚度及活化时间相同的情况下，TPPCo试样斑点的比移值随点样量的增加，其比移值不变。通过KH3000型薄层色谱扫描仪扫描结果见表3-8。表3-8薄层色谱扫描结果谱图点样序号积分值比移值RfTPPCo谱图1256.50

36、.5742405.20.5413789.60.5184986.30.50851052.50.4956115030.48371268.30.47581247.30.47491206.40.47101329.30.4681113121458.40.483 所配浓度为0.048g/L.由表3-8可以计算出最小进样量为0.048g，最大进样量为0.384g。然后在最大进样量与最小进样量之间的点确定标准方程。其标准方程为图3-1。图3-1样品含量与斑点积分值的关系图利用origin7.5软件对数据进行拟合，得出样品含量与斑点积分值的关系式。拟合方程见式(3-1)。 Y =2193.3

37、3X131.6 （3-1）相关系数：0.9998确定线性方程的准确性，在确定线性方程的四个点设为标准品，再设实际点样量为0.384g，计算点样量结果为0.336g。所以此相关系数准确度仅为87.5%。（1）分析准确度偏低原因是设定的样品的点样量超过最大点样量导致其相关系数准确度偏小。（2）试剂配置时间过长，导致试剂见光分解使浓度降低从而使准确度偏小。3.5 TPPCo相对标准偏差（RSD）的计算用微量注射器在厚度为0.3mm，活化时间60min的薄层板上点已知浓度为0.048g/L相同体积的样点，展开剂选用环己烷:乙酸乙酯:甲醇，比例为12:4:6的混合展开体系，考察在相同进样量的展开剂中TP

38、PCo在薄层板上展开的效果见表3-9。表3-9相同进样量对展开效果的影响展开剂环己烷:乙酸乙酯:甲醇体积比例12:4:6展开效果图样点说明金属TPPCoRf平均值0.43点样量l4饱和时间min15展开时间min15活化时间min60薄层板厚mm0.3由表3-9可知，试样TPPCo的进样量均为4L时，12个斑点的积分值、比移值和薄层色谱扫描谱图，样品扫描的相对标准偏差（RSD）的值为：7.41。通过KH3000型薄层色谱扫描仪扫描结果见表3-10。表3-11薄层色谱扫描仪扫描结果谱图点样序号积分值比移值RfTPPCo谱图11632.80.4852137.990.44931317.40.4324

39、1284.90.4351344.50.42614000.4171354.10.40181545.10.41391342.10.426101356.40.432111394.80.432121289.60.438 通过KH-3000型扫描仪计算相对标准偏差如图3-2。图3-2KH-3000型扫描仪计算相对标准偏差 通过薄层色谱扫描法得到的相对标准偏差RSD=7.41%第4章 结 论本课题研究了分析条件对薄层色谱法测定TPPCo纯度的影响，实验结果表明：TPPCo的比移值随混合溶剂的极性增大而增大，样品斑点的Rf值控制在0.30.5的分离范围内，使分离效果最佳。通过KH-3000型薄层色谱扫描仪可

40、以看出波长416nm436nm在范围内，波长为436nm时对应的峰值最高，吸光度的积分值是线性增加的，且存在最小进样量和最大进样量。最终，在薄层板厚度为0.3mm，活化时间1h，点样量为4L，展开体系和比例为环己烷、乙酸乙酯和甲醇（1246）的混合体系中，TPPCo的Rf差值比其他条件展开效果好，且斑点均不拖尾，更佳适合分离。TPPCo薄层扫描定量测定的线性范围0.06g-0.48g，标准方程：Y=2193.33X+131.6（r=0.9998），RSD=7.41%，测定准确度仅为87.5%。本课题成功地分析条件对TPPCo纯度的影响，结果令人满意。 参考文献1 赵燕芳，岳太星，金玲仁，等.卟

41、啉显色剂在分光光度法测定铅中的应用J.中国环境科学学会学术年会论文集(第四卷)，2013.2 王慢想，李强.卟啉及其衍生物的紫外-可见光谱J.光谱实验室，2011，28(3)：1165-1169.3 Lipiska M E, Rebelo S L H, Freire C. Iron (III) porphyrin anchored onto organosilylated multiwalled carbon nanotubes as an active catalyst for epoxidation reactions under mild conditionsJ. Journal of

42、Materials Science, 2014, 49(4): 1494-1505.4 郝晓伶，韩士田，刘彦钦.卟啉及金属卟啉配合物的化学研究进展J.河北师范大学学报：自然科学版，2009，33(1)：85-88.5 黄丹，田澍.卟啉及金属卟啉化合物的研究进展J.江苏工业学院学报，2003, 15(3)：19-23. 6 段振宁，何明威.卟啉及金属卟啉化合物的合成与应用J.北京轻工业大学院学报，1995，13(2)：70-76.7 石志红，傅承光., , , 四苯基卟啉的合成及其在高效液相色谱中的应用J.河北大学学报：自然科学版，1997，17(4)：26-30.8 唐丽华，沈显明，张晓娟，贾长英等. Meso-四(3, 4-二甲苯基)卟啉金属配合物的合成J.沈阳工业大学学报，2010，32(1)：60-64. 9 王冬华，丁二雄，马勇. 金属卟啉配合物的性能及应用研究进展J.化学与生物工程，2011，