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文档简介
1、考点规范练39微生物的培养与应用i 金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量人的血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定 性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。議冲蟆质捷分数为皿的(1) 按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于 生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行 _呼吸。质量分数为7.5%的NaCI肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括,用质量分数为7.5%的NaCI肉汤培养基进行选择培养的主要目的是。(3) 操作中在血平板上的接种方法是 ,接种操作前后需要对接种工具进行 灭菌
2、。(4) 在制备血平板时需将 pH调节至(填 微酸性或 微碱性”)后灭菌,待培养基后,再加入适量血液。按培养基功能分类,血平板属于 培养基。(5) 经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此,要对本操作流程进行完善,完善的方案2. (2016全国川卷)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题。(1) 分离纯化乳酸菌时,首先需要用对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是(2) 推测在分离纯化所用的培养
3、基中加入碳酸钙的作用有 和。分离纯化时应挑选出 的菌落作为候选菌。乳酸菌在-20 C长期保存时,菌液中常需要加入一定量的 (填蒸馏水”甘油”或碳酸钙”)。3. (2017江西九江一中段测)废纸的主要成分是木质纤维。下图是工业上利用废纸生产乙醇的基本工 作流程。请回答下列问题。(1) 自然界中环节需要的微生物大多分布在 的环境中。中获得的酶是 酶。若从土壤中分离出上述微生物,应以为唯一碳源的培养基进行培养,并加入形成红色复合物进行筛选,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。(3)接种后一个平板经培养后的菌落分布如右图所示,推测接种时可能的操作失误向试管内分装含琼脂的培养基时是,若试管口粘附有培养
4、基。,需要用酒精棉球擦净的原因(4)生产中可以满足环节的常见菌种是 。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供 。4有机化工原料氯苯不易降解,会污染环境,现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物。回答下列问 题。(1) 为了获得能降解氯苯的微生物菌种,可在被氯苯污染的土壤中取样,并应选用以 为碳源的培养液进行选择培养。除含有碳源外,培养液还应含有、无机盐和水等。将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在 1 L含20 mg氯苯的相同培养液中培养 (培养液 中其他营养物质充裕、条件适宜 ),观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间,甲、乙、丙分别为33 h、15 h、46 h,则应
5、选择微生物 作为菌种进行后续培养。若要测定培养液中选定菌种的菌体数,既可用 直接计数,也可选用 法统计活菌数目,一般前者得到的结果 (填 ”“或 (4) 原核 核糖体解析: (1)为了获得能降解氯苯的微生物菌种应选用以氯苯为碳源的培养液进行选择培养,在该培养液中 ,只有能降解氯苯的微生物才能生长 , 而其他微生物则不能生长。培养液中除含有碳源 外 ,还应含有氮源、无机盐和水等。 (2)微生物乙在含有氯苯的培养液中从实验开始到停止生长 所用的时间较微生物甲、丙短 ,说明微生物乙分解氯苯的能力比甲、丙更强,所以应选择微生物乙作为菌种进行后续培养。 (3)若要测定培养液中选定菌种的菌体数 ,既可在显
6、微镜下用血细胞 计数板直接计数 ,也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 ,所以一般前者得到的结果大于后者。 (4) 选定的菌种没有具膜细胞器 如线粒体等 ,则该菌种属于原核生物。组成原核生物的原核细胞有核糖体,而核糖体是蛋白质合成的场所 ,所以该菌种产生的降解氯苯的酶蛋白在核糖体上合成。5. 答案: (1) 碳源 高压蒸汽灭菌法(2) 平板划线法 稀释涂布平板法 (顺序可颠倒 ) 少(3) 酚红指示剂(4) 透明圈 刚果红染色解析: (1)微生物培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。微生物培养基进行灭菌的常用方 法是高压蒸汽灭菌法。 (2
7、) 纯化微生物培养的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。 题图所示方法为稀释涂布平板法 ,统计的菌落数常比实际活菌数目少 ,因为两个或多个细胞连在 一起时 ,平板上观察到的只是一个菌落。 (3) 初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素时,应在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。 (4)当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生 透明圈来筛选纤维素分解菌 ,这种方法为刚果红染色法。6. 答案: (1) 稀释涂布平板 少 酒精灯火焰(2) 高压蒸汽灭菌法将未接种的培养基在适宜温度恒温箱中倒置培养一段时间,观察是否有菌落生成(3) 有机物丰富 表 尿素(4) 红色 氨(或 NH 3)解析: (
8、1)将样液进行一系列梯度稀释后进行的接种方法是涂布平板法,该方法可以对微生物进行计数 ,由于当两个或多个细菌连在一起时 ,培养基上观察到的只是一个菌落 ,因此通常统计的菌 落数目比活菌的实际数目少。稀释涂布平板法的各步操作均应在酒精灯的火焰旁进行。(2)对培养基的灭菌通常采用高压蒸汽灭菌法 ,若要在接种前检测使用的培养基是否被污染,通常需要将未接种的培养基在适宜温度恒温箱中倒置培养一段时间,观察是否有菌落生成 ,若无菌落生成 ,则说明培养基制作是合格的。 (3)土壤中分解尿素的细菌生活在有机物丰富的土壤表层中, 因此若要筛选出尿素分解菌 ,配制土壤溶液的土样应从有机物丰富的土壤表层取样,培养用
9、的培养基应为以尿素为唯一氮源的选择培养基。(4)分解尿素的细菌的鉴定法是在培养基中添加酚红指示剂 ,由于分解尿素的细菌能够合成脲酶,脲酶能将培养基中的尿素分解产生氨(NH 3),使 pH 升高 ,酚红指示剂变红色。7答案:(1)苏丹川(或苏丹W )萃取法(2)油脂(3) 血细胞计数板 稀释涂布平板(4) 45 40解析:(1)显微观察时,用苏丹川(或苏丹IV)染液可将微生物 A菌体中的油脂染成橘黄色(或红色), 易于观察。微生物 A 菌体中的油脂不易挥发 ,宜选用萃取法从菌体中提取。 (2)微生物 B 可产生 脂肪酶 ,故应选用以油脂为碳源的固体培养基进行培养,以获得该菌的单菌落。 (3)若要测定微生物 B 的菌体数 ,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数;若要测定其活菌数目 ,可选用稀释涂布平板法进行计数。(4)三种不同温度下分解相同的油脂所需酶量45C时最多,40C时最少,说明三个温度中45 C条件下该酶活力最小,40 C条件下该酶活力最大。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕40 C设计后续实验。8答案:检测培养基平板灭菌是否合格3.8 M07(2) 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3) B(4) 溶解氧 营养物质解析: 为了检测培养基灭菌平板是否合格 ,应对空白平板先行培养一段时间。每
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