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文档简介

1、.1965年,法国科学家Jacob和Mood 提出证实了操纵子作为调节细菌代谢的分子机制1980年,Sanger设计出一种测定DNA分子内核苷酸序列的方法1983年,美国遗传学家McClintock发现可移动的遗传因子分子生物学主要研究内容:1.重组DNA技术2.基因表达调控研究3.生物大分子的结构功能研究4.基因组、功能基因与生物信息学研究1. 真核细胞染色体的组成,蛋白质和dna2. 组蛋白有如下特征(1)进化上的极端保守性(2)无组织特异性(3)肽链上氨基酸的不对称性(4)组蛋白的修饰作用3. 碱性氨基酸集中分布在N端的链上4. C值:一种生物单倍体基因组dna的总称为C值。5. C值反

2、常现象:是指c值往往与种系进化的复杂程度不一致,某些低等的生物却具有较大的C值。6.真核细胞DNA序列大致可被分为三类:一 不重复序列(结构基因基本上属于不重复序列),二 中度重复系列,三高度重复系列(卫星DNA)7.真核生物基因组的结构特点:真核基因组庞大,一般都远大于原核生物的基因组,真核基因组存在大量的重复序列真核基因组的大部分为非编码序列,占整个基因组序列的90%以上,该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要的区别真核基因组的转录产物为单顺反子真核基因是断裂基因,有内含子结构真核基因组存在大量的顺式作用元件,包括启动子,增强子,沉默子真核基因组中存在大量的DNA多态性真核基因组具有端粒结

3、构8.DNA多态性是指DNA序列中发生变异而导致的个体间核苷酸序列的差异,主要包括单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),和串联重复序列多态性(tandem repeats polymorphiem)9.端粒是真核生物线性基因组dna末端的一种特殊结构,它是一段dna序列和蛋白质形成的复合体,10.端粒酶:是逆转录酶,该酶由RNA及蛋白质组成,可以延长染色体上的端粒,从而增强细胞的增殖能力,端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制,在肿瘤中被重新激活,端粒酶可能参与肿瘤的恶性转化。11.原核细胞dna的特点:结构简练,存在转录单元,有重叠基因,12.环

4、状dna双链的复制分为0型,滚环型,D环型13.单链结合蛋白(single-strand binding protein,SSB蛋白):保证被解链酶解开的单链在复制完成前能保持单链结构,它以四聚体形式存在于复制叉,待单链复制完成后才离开,重新进入循环。14.oriC大肠杆菌复制起始点,不常用的称oriH15.DNA损伤修复无差错修复【直接修复(光修复,转甲基修复)切除修复(碱基切除修复,核苷酸切除修复)错配修复 】 有差错修复16.dna的转座,或称移位(transposition):是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。17.转座子(transposon,Tn):是存在于染色体dna上可自主

5、复制和位移的基本单位,18.转座子分为两大类:插入序列(insertional sequence,IS)和复合型转座子,19.转座作用的遗传学效应:转座引起插入突变,转座产生新的基因,转座产生的染色体畸变,20.SNP(singel nucleotide poymorphism)单核苷酸多态性,指基因组dna序列中由于单个核苷酸(A.T.C.G)的突变而引起的多态性,1.启动子(promoter):是基因转录起始所必须的一段DNA序列,是基因表达调控的上游顺式作用元件之一。2.RNA的编辑:是某些RNA,特别是mRNA前体的一种加工方式。如插入,删除。或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗

6、传信息的改变,因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模版的变化。3.核酶:指一类具有催化功能的RNA分子。4.RNA的再编码包括:+1、-1移码,核糖体跳跃,终止子通读。5.核仁小RNA(snoRNA)参与RNA化学修饰,snoRNA上的D盒是甲基化酶的识别为点。6.核小RNA(snRNA)与这些RNA相结合的核蛋白参与RNA的剪切。7.Chambon法则:多数细胞核mRNA前体内含子的5边界序列为GU,3边界序列为AG.8.原核生物:半衰期短,以多顺反子的形式存在。真核生物:5带帽,3加尾,内含子剪切。9.SD序列(shine-dalgarno sequence):原核生物起始密码子上游71

7、2个核苷酸处有一被称为SD序列的保守区。10.增强子特点:远距离效应,无方向性,顺式调节,无物种和基因的特异性,具有组织特异性,有相位性,有的增强子可以对外部信号产生反应11.Pribnow区:这个区的中央大约位于起点上游10bp处,又称-10区。Hogness区:位于转录起点上游-25-30bp处的共同序列TATAAA,也称TATA区。12.真核细胞RNA聚合酶的特性:酶1:转录产物,45srRNA;对鹅膏蕈碱不敏感 酶2:hnRNA,敏感 酶3:tRNA,存在物种特异性13.大肠杆菌0因子的功能:070,广泛;032,热休克;054,氮代谢RNA聚合酶受利福平和利福霉素的抑制14.大肠杆菌

8、中的终止子分为:依赖于p因子,不依赖于p因子的终止15.转录延伸过程中,可在电镜下观察到羽毛状。原因:在同一个dna模板上有多个转录同时进行;转录尚未完成翻译已经开始;真核生物不存在此现象1.同工tRNA(congnate tRNA)由于一种氨基酸可能有多个密码子,因此有多个tRNA来识别这些密码子,即多个tRNA代表一种氨基酸,我们将几个代表相同氨基酸的tRNA称为同工tRNA2.蛋白质合成的各阶段:1.氨基酸的活化2.肽链的起始3.肽链的延伸4.肽链的终止5.折叠和加工3.蛋白质前体的加工:1.N端fMet或Met的加工2.二硫键的形成3.特定氨基酸的修饰4.切除新生肽链中的非功能片段4.

9、分子伴侣(molecularchaperone)是一类序列上没有相关性担忧共同功能的保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解。分子伴侣家族(热休克蛋白.伴侣素)能在细胞内辅助新生肽链正确折叠的蛋白质。5.嘌呤霉素是通过提前释放肽链来抑制蛋白质合成的。6.几类主要蛋白运转机制 分泌:蛋白质在结合核糖体上合成,并翻译运转同步机制运输(免疫球蛋白 卵蛋白 激素 水解酶)细胞器发育:蛋白质在游离核糖体上合成,以翻译后运转机制运输(核、叶绿体、线粒体)膜的形成 两种机制兼有(质膜 内质网 类囊体中的蛋白质)7.信号肽(signal peptide):在起始密码子后,有一段

10、编码疏水性氨基酸序列的RNA区域,这个氨基酸的序列就被称为。1.简述代谢物对基因表达调控的两种方式。答:转录水平上的调控转录后水平上的调控,包括mRNA加工成熟水平上的调控)和翻译水平上的调控2.在原核生物中营养状况和环境因素基因表达起举足轻重的作用。在真核生物中激素水平和发育阶段是基因表达调控的最主要手段。3.阻遏蛋白(repressor)起着阻止结构基因转录的作用4.细菌应急反应:信号是鸟苷四磷酸(ppGPP)和鸟苷五磷酸(pppGpp),产生这两种诱导物空载tRNA5.弱化子(attenuation)位于转录开始区的一种内部终止子。1.根据对刺激的反应模式,可分成组成性表达和选择性表达。2.管家基因具备以下特点1.是细胞结构和代谢过程中所必须的基因,例如编码rRNA、肌动蛋白、微管蛋白等的基因。2通常能够保持较高的表达量3、真核生物中反式作用因子的DNA结合结构域有螺旋转角螺旋(HTH)、碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)、锌指(zincfinger)、碱性亮氨酸拉链(bZIP)。4.根据DNA复性动力学,DNA序列可以分成哪四种类型?单一序列、轻度重复序列、中度重复序列、高度重复序列5.真核生物DNA水平上的基因表达调控1“开放”型活

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