维生素AD胶丸中维生素A的含量测定 文档资料

1、维生素,AD,胶丸中,维生素,A,的含量测定,维生素,A,的结构为具有一个共轭多烯醇侧链,的环己烷，由于其中有多个不饱和键，性质不稳,定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂,解，并且其对酸不稳定。其醋酸酯比维生素,A,稳,定，临床使用一般将本品或棕榈酸酯溶于植物油,中应用。因此，维生素,A,及其制剂除需密封在凉,暗处保存外，还需充氮或加入合适的抗氧剂。,维生素,A,与氯仿、乙醚、环己烷或石油醚能,任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。,一、实验目的,二、主要仪器和试剂,紫外分光光度仪，,100ml,容量瓶，烧杯若,干个，维生素,A,胶丸（规格,2.5,万单位,/,粒）环己,烷，乙醚,掌握,U

2、V,三点校正法的原理和维生素,A,含量,测定的方法。,三、实验原理,本法是在三个波长处测得吸收度，根据校正公式,计算吸收度,A,校正值后，再计算含量，故本法称为,“三点校正法”。该原理主要基于：,（,1,）杂质的无关吸收在,310nm,340nm,的波长范围内,几乎呈一条直线，且随波长的增长吸收度下降。,（,2,）物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸,收曲线上，各波长处的吸收度是维生素,A,与杂质吸,收度的代数和，因而吸收曲线也是二者的叠加。,（一）胶丸内容物平均重量的测定,四、实验过程,取胶丸,20,粒，精密称定，用注射将内容物抽,出，再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次，,置,

3、50 ml,烧杯中，再用乙醚浸洗,1,2,次，置通风处，,使乙醚挥散，精密称定，算出每丸内容物的平均重,量。,四、实验过程,1.,（二）供试品溶液的制备与测定,取维生素,AD,胶丸内容物适量，精密称定，用环己,烷溶解并定量稀释成每,1 mL,中含,9,15,单位的溶液。,按照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在下列各,波长处测定吸收度。计算各吸收度与波长,328 nm,处吸,收度的比值和波长,328 nm,处的,E,1%,1cm,值。,1.,第一法,计算,?,求,：由,A=,C,L,，,?,求得,=A/,（,C,L,）。,?,求效价（,IU/g,）：效价系指每克供试品中所,含维生素,A,的国际

4、单位数（,IU/g,）。,?,即,IU/g=,1900,。,?,求维生素,A,占标示量的百分含量：,?,标示量,%=,（,A,D,1900,W,100%,）,/,（,W,100,L,标示量）,100%,。,A,值的选择,?,首先计算吸收度比值（即,A,i,/A,328,）,?,如果最大吸收波长在,326nm,329nm,之间，,并分别计算,5,个波长下的差值，均不得超过,0.02,时，则不用校正公式计算吸收度，而直接,用,328nm,处测得的吸收度,A,328,求得。,?,如果最大吸收波长在,326nm,329nm,之间，,并分别计算,5,个波长下的差值，如有一个或几个,超过,0.02,，这时

5、应按以下方法判断：,?,若,A,328,（校正）,与,A,328,的吸收度相差不超过,3.0%,，则不,用校正吸收度，仍以未经校正的,A,328,求得,。,?,若,A,328,（校正）,与,A,328,的吸收度相差在,-15%,-3%,之间，,则以,A,328,（校正）,得,。,?,若,A,328,（校正）,与,A,328,的吸收度相差小于,-15%,或大于,+3%,，则不能用本法测定，而应用第二法（皂化法）测定,含量。,?,如果最大吸收波长不在,326nm,329nm,之间，也不能,用本法测定，而应用第二法（皂化法）测定含量。,?,第一法校正公式：,A,328,(,校正,)=3.52(2A,

6、328,-A,316,-A,340,),维生素,A,吸收度差值,?,由扫描结果得最大吸收波长为,327.7nm,（,326329nm,）,?,各个差值均不超过,0.02,，不需用校正公式。故直接用,A328,进行计算。,?,（,328,）,= A328 /,（,100,ms/D,）,?,=0.746/(100,0.0048/100)=155.42,?,效价,=,1900=155.42,1900=295298,?,标示量,%=(A,D,1900,W)/(W,100,L,标示量,),100%=(0.746,100,1900,0.08714)/(0.0048,?,100,1,25000),100%=

7、102.9%,二法：,?,方法：精密称取一定量供试品，加氢氧化钾乙醇溶液后煮,沸回流，得到的皂化液再经乙醚提取、洗涤、滤过、浓缩,和干燥等处理，最后用异丙醇溶解残渣并稀释成每,1ml,中,含维生素,A,为,915,单位的溶液，在,300,、,310,、,325,、,334,波长处测定吸光度，并确定最大吸收波长。计算同第一法，,换算因子为,1830,。,?,二法校正公式：,A,325,（校正）,=6.815A,325,2.555,310,4.260A,334,讨,论：,?,1,、维生素,A,具有紫外吸收特征，在,325nm328nm,的范围内有最大吸收；并且，,它能与三氯化锑试剂作用，产生不稳定

8、的蓝色。,故可利用这些性质对其进行鉴别和含量测定。,?,2,、维生素,A,醋酸酯的吸收度校正公式是用直线,方程式法（即代数法）推导而来；维生素,A,醇的,吸收度校正公式是用相似三角形法（几何法或,称,6/7,定位法）推导而来。,?,3,、在应用三点校正法时，除其中一点在最大吸,收波长处测定外，其余两点均在最大吸收峰的,两侧进行测定。如果仪器波长精度不准确时，,会产生较大误差。因此，在测定前务必要校正,波长，并可用全反式维生素,A,进行测定，比较测,定结果和比值是否与对照品相符合，以进一步,核对仪器波长是否准确。测定的样品应不得少,于两份。,?,4,、本组在对维生素,A,含量测定实验中出现过一些

9、问题。,第一次用一法测定结果不符合规定，按照要求应该用二,法测定。但分析原因后，我们重新做了一遍，用一法测,定取得了较好结果，所给维生素,A,含量符合规定。,?,我们发现第一次实验失败的原因是：紫外分光光度计,出现了问题，波长不准确，从而导致在相应波长下测得,的吸收度不准确。可见仪器波长的准确与否在实验中是,致关重要的。整个操作过程没有进行暗室操作，在光,照下暴露了较长时间，而维生素,A,不稳定，见光易变质，,所以导致测定含量不准。,?,另外，在操作中应注意：,在含量测定时胶壳要尽量洗干净，避免内容物,残留，使粒重尽量准确。,由于所取的样品量非常小，所以用于收集样品,的小烧杯一定要用溶剂洗涤多次并合并入容量瓶,中，容量瓶口也要冲洗使样品全部转入。,在测定不同波长下的吸收度时每一次都要用空,白液进行调零。,按下列操作步骤制备供试