糖类、蛋白质、脂肪的鉴定教学课件

1、实验 生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定,思考题：,1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理 2、常见的还原糖有哪些？取材的要求 3、斐林试剂的组成，使用时的注意事项 4、双缩脲试剂的组成，使用时注意事项 5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较 6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用 7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？ 8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何,1.实验原理： 化学试剂+有机化合物特定的颜色,(1) 还原糖 + 斐林试剂 水浴加热砖红色 沉淀 (2) 脂肪+苏丹橘黄色 脂肪+苏丹红色 (3) 蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色,2、常见的还原糖有哪些？取材的要求 还原糖：可被氧化充当还原剂的糖。 (常见

2、的有：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖) 注意：蔗糖不是还原糖 3、斐林试剂的组成，使用时注意事项 斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液 使用注意事项：等量混合，现配现用（ NaOH+CuSO4）,1.点拨： 还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生 成砖红色的Cu2O沉淀。 （放在盛有50-65温水的大烧杯）,水浴 加热,颜色变化：浅蓝色 棕色 砖红色,1步骤： 样液制备:（取材5g，加入石英砂和 5ml水） (1)取样液2ml于试管中 (2)加入新配制的斐林试剂1ml（甲液和乙液等量混合均匀后再加入）盛有50-

3、65温水的大烧杯） (3)水浴加热2min左右(（4）观察颜色变化（浅蓝色棕色砖红色）,注意事项：（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果梨白萝卜。 思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以吗？为什么？ （2）试剂：斐林试剂(等量混合、现配现用) 甲液：0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液,4、双缩脲试剂组成，使用时注意事项,双缩脲试剂组成： A液：0.1g/mL的NaOH溶液 B液：0.01g/mL的CuSO4溶液,使用注意事项： 先加A液1mL于样液中， 再加B液4滴于样液中,（1）蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色,2步骤： （1）试管中加样液2mL （2）加双

4、缩脲试剂A液1mL（造成碱性环 境），摇匀 （3）加双缩脲试剂B液4滴，摇匀 （4）观察颜色变化（紫色） 注：样液浓度不宜过高，以免实验后黏住试管壁，洗不干净。 B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而掩盖生成的紫色。,5.比较斐林试剂和双缩脲试剂,0.1g/mLNaOH,同甲液,0.01g/mLCuSO4,0.05g/mLCuSO4,还原性糖,蛋白质,等量混合后再加入,先加A液1mL，摇匀， 再加B液4滴,50-65水浴加热,砖红色沉淀,紫色络合物,不需加热，摇匀,6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用 7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？,3.脂肪+苏丹橘黄色 脂肪+苏丹红色,（

5、2）步骤 材料的选取：含脂肪量高的组织，如花生的子叶。 取材： 取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮 切片 制片：（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 染色：滴23滴苏丹染液，染色3min，用吸水纸吸去染液，再滴体积分数50%的酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去多余的酒精（苏丹易溶于酒精中，避免影响实验结果），滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片 镜检观察：光学显微镜对光低倍镜寻找着色圆形小颗粒高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒,8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何,用试管取2mL待测组织样液，向试管内滴加12滴碘液，观察颜色变化。,4、淀粉 + 碘蓝色,加12滴碘液,1.鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂

6、 A斐林试剂 B双缩脲试剂 C苏丹染液 D苏丹染液 2.能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是 A淀粉 B果糖C蔗糖D纤维素 3.下列哪个实验用到显微镜（ ） A可溶性还原糖的鉴定 B蛋白质的鉴定 C脂肪的鉴定 D淀粉的鉴定,A,C,B,4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液颜色的变化过程为（ ） A无色一砖红色（沉淀） B浅蓝色一砖红色（沉淀） C浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀） D浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）,5.下列物质中，能被苏丹IV染液染成红色的是（ ） A马铃薯块茎 B浸软的蓖麻种子 C蛋清液 D苹果,D,B,6.还原糖的实验中，加入斐林试剂时必须要 A先加入斐林试剂甲液，后加入乙液 B先

7、加入斐林试剂乙液，后加入甲液 C将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加 D以上A、B、C三种操作方法都正确 7.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂正确做法是 A先加A液，混合后再加B液摇匀观察 B先加B液，混合后再加A液摇匀观察 CA、B液混合后加入，摇匀后观察 DA、B液同时加入样液，摇匀后观察,C,A,即：还原糖中的醛基（CHO）被 Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原成砖红色的Cu2O沉淀,还原糖的鉴定原理：,5.比较斐林试剂和双缩脲试剂,0.1g/mL的NaOH溶液,0.1g/mL的NaOH溶液,0.01g/mLCuSO4溶液,0.05g/mL的CuSO4溶液,还原性糖,蛋白质,甲液和乙液等量混合均匀后再加入,先加双缩脲试剂A液1mL，摇匀，再加双缩脲试剂B液4滴,50-65水浴