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文档简介

1、細菌分子生物学,DNA複製,5 3,3 5,鎖,鎖,岡崎,5 3,3 5,RNA ,DNA, ,DNA,DNA,DNA,酵素 aabbw,-35,-10,TATAAT,Pribnow (TATA),RNA,酵素,転写(RNA合成),DNA,原核生物転写,+1,転写開始点,TTGACA,Pi,lacI,O1,O2,Plac,lacZ,lacY,lacA,mRNA,mRNA,結合,誘導因子 (IPTG),RNA 結合阻害, , ,転写調節,遺伝暗号表(mRNA),+ ATP + tRNA,tRNA 合成酵素,tRNA 3-末端,10- 葉酸,細菌遺伝子突然変異,塩基置換(点突然変異point mu

2、tation) Transition(転位), AG,GA,TC,CT Transversion(転換), AT,AC,GT,GC TA,TG,CA,CG 塩基欠失(deletion) 塩基挿入(insertion),突然変異型,変異point mutation 酸残基変化 TAC (Tyr) TCC (Ser) 変異point mutation 終止 TAC (Tyr) TAA (stop) 遺伝子変異 酸残基変化 TAC (Tyr) TAT (Tyr),ACCCGTGGTATCTTCATAACCG ThrArgGlyIlePheIleThr ACCCGTGTATCTTCATAACCG Th

3、rArgValSerSerStop,deletion,変異 deletion,insertion読取枠,細菌主変異現象,形態変化 鞭毛,線毛,莢膜消失抗原性,病原性変化 集落変化 SR変異(平滑正円形粗面不規則辺縁) 陰性菌多糖変異 RS変異 炭疽菌,結核菌 HO変異(形成孤立集落形成) 属鞭毛消失 H抗原(鞭毛抗原),O抗原(菌体表面抗原) 抗原性変化 H抗原相変異属 ViW変異強毒(virulence抗原),細菌主変異現象,毒力,病原性変化 弱毒株attenuated strain 無毒株avirulent strain 人工培地継代培養病原性低下 耐性,抵抗性変化 薬剤耐性化 ,放射線,

4、温度対感受性変化 生化学的性状変化 autotroph(原株)auxotroph(栄養要求変異株),塩基類似体 , ICR-191,化剤 ,他DNA修飾剤 ,化学的変異原,DNA取込 変異,二本鎖DNA挿入 変異,化 変異,化 変異,A,G,T,C,T,C,2,互変異性,放射線(X線,線),DNA鎖切断再構成巨大損傷,紫外線,同一DNA鎖上残基二量体化,二量体,DNA損傷修復,光回復 紫外線生 青色光修復 除去修復 損傷部分切出 DNADNA修復 組換修復 損傷DNA複製時生相同DNA鎖埋 SOS修復 DNA損傷 recA遺伝子発現 lexA遺伝子産物分解 DNA修復遺伝子転写活性化,DNA損

5、傷検出,Rec 枯草菌rec株(DNA損傷高感受性)利用 化学物質DNA損傷性検出 Ames Salmonella typhimurium要求株利用 変異原復帰変異(his his+)活性検出 rya変異膜透過性亢進細胞膜変異uvrB変異除去修復能欠失変異上複製起hisG遺伝子,染色体, 自律複製DNA分子 染色体, 細胞内染色体独立自律複製, 細菌生存必須DNA分子 環状二本鎖,線状二本鎖,環状一本鎖,ori,ColE1,6.6 kb,E1,複製開始点,4.4 kb,pBR322,ori,TcR,AmpR,耐性,耐性,大腸菌: 4.6 Mb,F因子(F) 大腸菌接合DNA組換関与 菌:P因子

6、,緑膿菌:PF因子 R因子(R) 薬剤耐性遺伝子有 接合伝達能(狭義R因子) 産生因子 大腸菌抗菌性毒素質遺伝子有 抗菌性毒素質() 病原性 Ent(腸管毒素原性大腸菌ETEC毒素遺伝子含) Hly(溶血毒遺伝子含),IS3,IS2,IS3,組換領域,tra,oriT,oriV,F,100 kb,100 kb,薬剤耐性遺伝子群,R,IS1,IS1,oriT,tra,ori,二異DNA分子会合、交差起新DNA組合生 相同的組換(homologous recombination) DNA相同領域間(細菌普遍的組換) Holliday 非相同的組換(nonhomologous recombinati

7、on) DNA非相同領域間 細菌稀,哺乳動物一般的 転移因子組換,DNA組換(recombination),DNA組換,分枝鎖移動,Holliday,Holliday構造,解離,解離,or,C,A,T,G,C,A,T,G,遺伝子伝達,LederbergTatum大腸菌接合発見(1947年) 接合(conjugation) 交配(mating)過程,F働 染色体遺伝子別菌伝達 F 大環状(100 kb) 移行関tra遺伝子群(32 kb)有 種類複製過程 oriV遊離()複製 染色体挿入,染色体oriC複製,tra遺伝子群 32 kb,100 kb,伝達時複製開始点,複製開始点,IS(挿入配列)

8、因子群 (転移必要配列),oriT (origin of transfer),F,oriV,伝達必要遺伝子群 (60遺伝子),相同組換転移稀染色体挿入,IS因子,F,E. coli染色体,挿入F,oriC,oriV,挿入後,F一部複製oriV 抑制,Hfr菌挿入F持 F+菌遊離F持,形質転換,外来DNA導入細菌形質変化現象,DNA細胞導入遺伝形質変化,(competent)DNA取込状態,肺炎球菌対数増殖期自然 菌特殊富栄養培地中 大腸菌低温塩化処理,染色 体侵入,外被,染色体,粒子 放出,染色体増殖,外被質 合成,溶菌環 (1560分),溶原化,溶原性生活環,形質導入(transduction) 粒子宿主細胞DNA別菌運, 菌染色体組換起 変換(phage conversion) 遺伝子形質発現,細菌 形質変化。遺伝子宿主染色体 組込必要。,細菌染色体,DNA,完全粒子,不完全粒子,供与染菌色体DNA片,完全粒子,溶原化,供与菌DNA,転移因子(transposable element),上部位別部位 移動DNA配列 挿入配列(insertion sequence,IS) 1 kb前後小因子,転移酵素 両末端逆向反復配列(inverted repeat sequence,IR) (transposon) 抗生物質耐性遺伝子両末端挿入配列,Replic

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