第八章 血清型.ppt

1、第八章 血清型,【目的要求】 1、掌握 HP、GC、TF的遗传特征 2、熟悉 HP、GC、TF的分型原理 3、了解 血清型的亚型,第一节 概 述,一、血清型的概念 人类某些血清蛋白具有遗传多态性， 表型有个体差异，称为血清型 （serum types）,二、血清型的分类与命名 根据分型原理不同，血清型可以分为两大 类： 1、同种异型遗传标记 是指同一种属不同个体免疫球蛋白抗 原性的差别，可采用特异性抗血清分 型。如免疫球蛋白Gm、Km等,这类血清型的命名多以抗原所在的肽链名 称加抗原编号组成。 如Glm抗原表示该抗原位于免疫球蛋白 IgG1重链上,2、血清蛋白的电泳多态性遗传标记 是指不同个体

2、血清蛋白的电泳特性的差 异。是血清蛋白多肽链中部分肽链或个 别氨基酸不同，引起电泳迁移率发生变 化构成的多态性,这类血清型的命名通常是蛋白的缩写 名称加表示等位基因的数字或字母， 如Hp11,三、分型原理 1、免疫学的方法可以用来进行同种异型 遗传标记的分型，以特异性的抗体检 测同种异型抗原，确定遗传标记的型 别。如红细胞被动凝集抑制试验、酶联 免疫分析等,2、在法医学鉴定中应用的血清型多数属于电泳性质上的多态性，需要采用凝胶电泳技术分型 其分型原理为：不同表型的蛋白质一级结 构存在差异，分子量和等电点不同，在电 场中的迁移率不同，可依据蛋白谱带位置 进行分型,等电聚焦技术则依靠不同蛋白分子之

3、间等 电点差异进行分型，分辨率比常规凝胶电 泳高，能够揭示许多普通电泳难以检出的 多态性。如维生素D结合蛋白普通电泳分 为三种表现型，而等电聚焦技术分为六种,等电聚焦电泳原理： 所有的氨基酸均为两性物质，在酸性溶液中带正 电荷，在碱性溶液中带负电荷。 若氨基酸在某一pH值下其净电荷为0，且在电场 中不移动时，称此pH值为它的pI值（等电 点）。 当溶液的pH值低于或高于pI，所有蛋白质分子 所带净电荷为同号，彼此之间有相斥力，不会聚 集。 所以，將pH调到等电点的大小，则大部份 的蛋白质將会沉淀，可以应用在电泳，达到分离 蛋白质混合物的目的，这种方法称为等电聚焦电 泳,3、有些血清型在分型之前

4、，样品需经神经氨酸酶或其他试剂处理，如转铁蛋白分型。 因为糖蛋白糖侧链的电荷会影响蛋白电泳迁移率,4、电泳后的血清型谱带的显示可以用普通蛋白染色、免疫固定或免疫印迹法 蛋白染色操作简便，但谱带无特异性 免疫固定后染色为特异性显色方法，主要 是利用抗原抗体的特异性反应识别特异性 蛋白,典型的印迹实验包括三个步骤：蛋白质的电泳分离将电泳后凝胶上的蛋白质转移至固体膜上，用非特异性，非反应活性分子封闭固体膜上未吸附蛋白质区域免疫学检测。 免疫印迹克服了聚丙烯酰胺凝胶电泳后直 接在凝胶上进行免疫学分析的弊端，极大 地提高了其利用率、分辨率和灵敏度，使其 成为使用最广泛的免疫化学方法之一。,第一阶段为SD

5、S聚丙烯酰胺凝胶电泳 （SDS-PAGE）。抗原等蛋白样品经 SDS处理后带阴电荷，在聚丙烯酰酰凝 胶中从阴极向阳极泳动，分子量越小， 泳动速度就越快。此阶段分离效果肉眼 不可见（只有在染色后才显出电泳区 带）。,第二阶段为电转移。将在凝胶中已经分离 的条带转移至硝酸纤维素膜上，选用低电 压（100V）和大电流（12A），通电 45min转移即可完成。此阶段分离的蛋白 质条带肉眼仍不可见。,第三阶段为酶免疫定位。将印有蛋白质条 带的硝酸纤维素膜（相当于包被了抗原的 固相载体）依次与特异性抗体和酶标第二 抗体作用后，加入能形成不溶性显色物的 酶反应底物，使区带染色。,几乎任何蛋白质都可用于免疫印

6、迹。免疫 印迹的优势是能分析不能用其他的免疫化 学技术进行研究的蛋白质样品。例如，不 能标记的蛋白质或不溶于温和抽提缓冲液 的蛋白质等,6、DNA分型技术也可用于血清型分型。个体差异的实质是人类基因组编码DNA的差异,四、法医学意义 自1939年发现血清中Hp的遗传多态性以来，血清型因分型可靠，个体识别率高等原因受到法医学的重视，多种血清型成为亲子鉴定选择的遗传标记,第二节 结合珠蛋白型,结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）： 是人血清中能与游离血红蛋白（Hb） 结合的一种a糖蛋白。由三种表现型Hp1-1,Hp2-1，Hp2-2。受控于Hp座位上的一对等位基因Hp1和Hp2,呈共显性遗传

7、。,一、Hp的生化性质与生物学功能 由肝脏合成，等电点为4.14.2，电泳 属于2球蛋白组分。含糖量为18.6 其主要功能是与游离血红蛋白结合成稳定的复合物，并很快被单核-巨噬细胞系统处理掉，阻止了血红蛋白从肾小球滤过，避免游离血红蛋白对肾小管的损害,结合珠蛋白是一种血浆糖蛋白，分子量约 为90.000。能与红细胞外血红蛋白(Hb)结 合形成紧密的非共价复合物Hb-Hp。每天降 解的Hb约有10%释入血循环中，成为红细胞 外游离的Hb，Hb与Hp结合成Hb-Hp复合物 后分子量可达155,000，不能透过肾小球，从 而防止游离血红蛋白从肾脏丢失，避免Hb所 含铁的丢失。保证铁再用于合成代谢。,

8、溶血性贫血患者血浆结合珠蛋白浓度下 降。由于溶血时大量的Hb释出，Hp与游 离Hb结合成复合物而被肝细胞摄取、清 除。此外，Hp也是一种急性期蛋白，患各 种炎症时其血浆中含量升高。,二、Hp的分子结构 是由两条多肽链和两条多肽链组成的四聚体，各型之间只有链不同，而链都相同。链有1及2两种 。而1又发现有1F及1S两种遗传变异体 。两种变异体的多肽链只有一个氨基酸的残基组成不同,HP1-1 由两条hp1和两条hp链组 成；HP2-2 由两条hp2链和两条hp 链组成,人的HP为一种2-球蛋白，其结构受遗传 控制，其表型有三种，即HP1-1、HP1- 2、和HP2-2。每个人的表型可用简单的 电泳

9、法加以检验。HP的遗传为常染色体不 完全显性，分别由HP1和HP2两个基因控 制。1-1是HP1/HP1纯合子，1-2是 HP1/HP2杂合子、2-2是HP2/HP2纯合子,带HP1基因者结合血红蛋白较多，HP2基 因者结合血红蛋白较少，如1-1型平均结合 血红蛋白为118g血红蛋白/L，1-2型为 93g血红蛋白/L，2-2仅为75g血红蛋白 /L。,血清结合珠蛋白含量下降，甚至缺如，主 要见于各种血管内溶血性疾病，如阵发性 睡眠性血红蛋白尿症和吞豆病 中毒性肝炎、肝硬化等肝脏疾患、急慢性炎 症、结核、肿瘤时结合珠蛋白含量会升高。另 外，应用某些激素，如皮质激素和雄性激素后， 也可使结合珠蛋

10、白增高。,三、 Hp基因 定位于人类第六号染色体的长臂上。包含编码hp链和hp的Hp基因以及Hp相关基因Hpr Hp*1基因含5各外显子。 Hp*2基因是由两条Hp*1DNA链组合而成，其结合位置分别位于第四和第二内含子，因此Hp*2基因含7个外显子,Hp*1基因第四个外显子中第52、53位密码子的不同可将Hp*1基因分为Hp*1F和Hp*1S（F即fast S即slow）。 第52位为赖氨酸即快，第53位为谷氨酸即慢,Hp*2基因第四、第六外显子中的第52位，第53位与第111位，第112位密码子也具有Hp*1F和Hp*1S的差别 因此， Hp*2基因可分为Hp*2FF， Hp*2FS， H

11、p*2SS三个等位基因,珠蛋白基因的多态性会导致珠蛋白本身与 血红蛋白的结合能力、抗氧化能力、人体 内铁的代谢循环和免疫能力发生改变。既 往的研究已经发现，珠蛋白基因的多态性 对疟疾的发生和人体内红细胞溶解有着重 要的意义,珠蛋白2-2基因型是疟疾流行地区儿童贫血 的危险因素，从而提示携带Hp2-2基因型 的人体在疟疾引起红细胞溶血后，其珠蛋 白结合游离血红蛋白的能力是下降的。 不同珠蛋白基因型对Hb变化的影响更大,四、Hp型的遗传多态性 采用凝胶电泳技术可将不同个体的Hp分为三 型，即HP1-1、HP2-1和HP2-2 。每个人的表 型可用简单的电泳法加以检验 HP的遗传为常染色体不完全显性

12、，分别由 HP1和HP2两个基因控制。 1-1是HP1/HP1纯合子，1-2是HP1/HP2杂合 子、2-2是HP2/HP2纯合子,HP1-1型的电泳谱带呈现单一成分，泳动 最快，靠近正极侧 HP1-2和HP2-2型由多个成分组成，电泳 迁移率较小，其谱带浓度向负极呈逐渐递 减趋势,Hp*1基因的产物由Hp*1F和Hp*1S两 个基因产物组成，这样可以检出6种表现 型，分别是Hp1S1S、 Hp1S1F、 Hp1F1F、 Hp21F、 Hp21S、 Hp22,五、Hp遗传变异 大量群体资料表明Hp存在许多遗传变异 1、Hp0型 血液中Hp含量太低，用常规方法测不 出，称之为无结合珠蛋白血症。这

13、些个 体并无溶血性疾病,此外，胎儿血液中不易测出Hp，部分新生 儿可测出，4个月的婴儿Hp型别大部分可 测出，个别情况直至15岁以后才能测出。 胎儿及新生儿血中测不出Hp，不能称为 Hp0型，这一点在涉及胎儿及婴幼儿的亲 权鉴定时要注意,Hp0型的基因型为Hpdel/ Hpdel Hp*del为沉默基因，其编码hp链的基 因片断缺失 Hp*del基因以杂合状态存在时该个体呈 现低结合珠蛋白血症,2、Hp1M型 又称为修饰表现型21，是HP2-1与 HP2-2 之间的过渡型 Hp1M型的泳谱特点是快泳动带成分比 例增多，而22区的线条非常贫弱，有时 易与HP2-1相混淆,3、HpCa型 此型快泳

14、动带比例减少，而22区谱带 明显增加，其产生可能是嵌合状态所致， 即一类细胞产生Hp22，另一类细胞产 生Hp21,4、HpJ1型 此型的特点是11区的电泳带分裂为两 条，负极侧谱带增多 5、HpK1型 此型的特点是11区的电泳带分裂为两 条，其余区域无蛋白带,六、Hp型的群体遗传学调查结果 亚洲人以HP2-2居多，其次为Hp21， 而Hp11最少。 高加索人以Hp21占优势，其次为 HP2-2。 黑种人群体中Hp11频率最高，其次为 Hp21,七、Hp型的分型原理及方法 电泳前先使待测样品与血红蛋白形成 HpHb复合物。电泳完后可以利用血红 蛋白的过氧化物酶活性在过氧化氢存在时 使联苯胺氧化

15、成联苯胺蓝，染色,普通型可采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分 型。 Hp亚型则需先纯化样品中地 Hp，再使 Hp组分中的肽链变性，还原后方能采 用普通电泳或等电聚焦技术进行分型,原理 聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶，以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis，简称PAGE)。,八、Hp型遗传多态性的法科学应用 Hp在血痕中可以保存相当长的时间，但由于血痕中过多的血红蛋白可掩盖Hp泳谱，因而在一定程度上限制了血痕的个体识别能力,第三节 维生素D结合蛋白,维生素D结合蛋白(

16、DPB)，又称为型特异 性成分（Gc） 一、生化性质和生物学功能 由肝脏合成，分子量为5200058000，等电点为4.85.1，稳定性最高60oC,Gc的主要生物学功能是结合和转运维生素 D 除上述功能以外，Gc还与血浆中肌动蛋白 的清除有关 Gc与脂类和脂肪酸也有很高的亲和力，能 增强中性粒细胞的化学趋化性 B淋巴细胞和T淋巴细胞亚群中细胞型别差异也 与Gc有关,二、遗传及等位基因命名 1、Gc基因 定位于人类第4号染色体长臂上，属于常 染色体单一位点共显性遗传系统。Gc基因 全长42.4kb，含13个外显子，12个内 含子。 Gc的编码产物为单一肽链组成的糖蛋白， 肽链含458个氨基酸残

17、基,对不同表现型的DNA序列分析表明， Gc1F、 Gc1S、 Gc2蛋白的遗传 多态性源自第11号外显子第416位和 第420位两个密码子的变异 Gc1F Gc1S Gc2 416位 天冬氨酸 谷氨酸 天冬氨酸 420位 苏氨酸 苏氨酸 赖氨酸,现已知的等位基因为： Gc*2、Gc*1F、Gc*1S 均为共显性等位基因,2、Gc的表型 用免疫电泳技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳 技术可将Gc分为三种表现型：Gc11、 Gc22、 Gc21，他们受控于Gc*1、Gc*2两个共显性等位基因。 Gc22为靠近负极侧的单一谱带； Gc11为靠近正极侧的双带，泳动速度快于Gc22型 Gc21为杂合子，其表现型

18、为上述两种谱带的综合,3、Gc型的命名 1978年召开的Gc系统国际专题会议上 统一命名方法：用等电聚焦技术检测Gc变 异型时，凡双带变异属Gc1变异，单带变 异属Gc2变异。 出现在Gc1S正极侧的为Gc1A带，出 现在Gc1S负极侧的Gc1C带；同理，出 现在Gc2正极侧的为Gc2A带，负极侧的 为Gc2C带,三、群体遗传学调查结果 Gc亚型的基因频率分布在不同人种间 分布有区别，高加索人：Gc*1S Gc*2 Gc*1F；蒙古人种Gc*1F占 优势；黑种人群体中Gc*1F出现的频率 很高,四、Gc的分型原理及方法 普通型可用免疫电泳或聚丙烯酰胺凝胶 圆盘电泳分型；亚型则需用等电聚焦技 术

19、分型或采用DNA分型技术 1、免疫电泳 2、聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 3、等电聚焦技术 4、PCR扩增技术,免疫电泳(immunoelectrophoresis, IEP)是将 区带电泳和双相琼脂扩散相结合的一种免 疫化学分析技术。1953年Grabar首先应用 该方法进行抗原抗体分析。,原理 先将待检标本在琼脂凝胶中进行电泳,不同的抗原成分由于所带电荷、分子量及分子构型的差异，在电场作用下的泳动速度不同而被分成不同区带。然后与电泳方向平行，挖一小槽，加入含相应抗体的免疫血清，与已分离的各抗原成分在琼脂内作双相免疫扩散，各区带在相应位置与抗体形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和形态，可分析样品中

20、所含抗原成分及其性质。,图1 免疫电泳原理图解,操作步骤 1. 取洁净载玻片，浇注融化的琼脂凝胶，凝固后打孔挖槽。 2. 用微量加样器加待检标本于孔内。 3. 电泳条件以电压46V/cm或电流23mA/cm为宜，电泳1.52h。 4. 电泳完毕后，用毛细滴管在槽内加入含相应抗体，孵育，使抗原抗体双相扩散，形成沉淀线。 5. 观察沉淀线的数目、形状和位置。经漂洗、干燥、染色、脱色等步骤制作染色标本，可长期保存。例如血浆蛋白免疫电泳。,方法评价 免疫电泳分辨率高，可分出人血清中 2030种抗原成分，可鉴定混合抗原中各 组分。,注意事项,（1）浇载玻片时，玻片应保持水平，琼脂面要尽量铺平 （2）加样

21、应一次加满，并防止样品溢出孔外 （3）电泳过程中注意防止发热，以免影响电泳结果,由于免疫电泳的影响因素较多，对异常结果的 分析增加了复杂性。如沉淀弧数目不总是与混 合物中应有的成分相符。 原因有： 抗原抗体比例不恰当，使一些成分未出现 沉淀线； 相邻两抗原迁移率非常接近而致沉淀线重 叠； 一条沉淀线分离成多条。 因此用免疫电泳技术检测多种混合物时，至少要用3种 不同的浓度，2种或2种以上的抗体(免疫不同动物而得) ，而且要及时观察并记录沉淀弧出现的情况。,Gc的免疫电泳分型：以含乳酸钠的巴比妥 作为缓冲液，离子强度为0.05，将血清加 在琼脂糖凝胶板负极测，电场强度为 7V/cm，电泳2h后，

22、在与电泳方向相平行 的泳道旁开槽，加抗Gc血清，于室温下 放置2448h后观察沉淀线,聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE)是利用聚丙烯酰胺凝 胶作为支持物的电泳法，聚丙烯酰胺凝胶是由单 体丙稀酰胺和交联剂甲叉双丙稀酰胺交联而成的 多孔网状凝胶。 不连续PAGE有分离胶、浓缩胶和样品胶。 PAGE分辨率很高。,二、聚丙烯酰胺凝胶电泳法,凝胶系统的均匀性： 连续性凝胶电泳 不连续凝胶电泳 按凝胶形状： 圆盘状电泳 平板电泳 被分离的物质是否变性： 非变性、变性（）,图1 聚丙烯酰胺凝胶不连续圆盘电泳示意图(A为正面,B为剖面)1样品胶pH6.7 2浓缩胶：是大孔胶，凝胶缓冲液为pH6.7的Tris-HC

23、13分离胶；是小孔胶，凝胶缓冲液为pH8.9 Tris-HC14电极缓冲液是pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液,电泳过程示意图 A:为电泳前3层凝胶排列顺序，3层胶中均有快离子，慢离子 B:显示电泳开始后，蛋白质样品夹在快、慢离子之间被浓缩成极窄 的区带。 C:显示蛋白质样品分离成数个区带。,操作方法,分离胶的制备,浓缩胶的制备,加样,待分离样品的制备,电泳,剥胶,固定染色、洗脱,Gc的聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳条件：凝胶 浓度为5.8、交联度为2.14。Tris-甘氨 酸缓冲液作为电极液，于3mA下电泳2h， 普通蛋白染色，Gc位于白蛋白与转铁蛋白 之间。,将两性电解质(eg:pH3-9，pH5

24、-7)同蛋白质 样品一起加入到已经灌好的凝胶中，在电 场下，两性电解质首先达到它的等电点而 平衡，蛋白质样品根据它自身的等电点分 别向两极移动，最后也达到平衡。 等电聚焦：这种按等电点的大小，生物分子在 pH梯度的某一相应位置上进行聚焦的行为称等 电聚焦。,电泳法,三、等电聚焦,等电聚焦的特点就在于它利用了一种称为两性电解质载体的物质在电场中构成连续的pH梯度，使蛋白质或其他具有两性电解质性质的样品进行聚焦，从而达到分离、测定和鉴定的目的。,采用等电聚焦电泳可以检出Gc亚型，是目 前国际公认的分型法。支持介质采用浓度 为5、交联度为3聚丙烯酰胺凝胶， 两性电介质pH为4.55.4，电压为500

25、V， 样品加于距负极10mm处，电泳1h。电泳 结束后用抗Gc血清免疫固定，再行蛋白 质染色后观察结果。,五、Gc在法科学中的应用 Gc在血痕中可以保留较长的时间，加之 该基因座遗传多态性程度高，20世纪80 年代，许多国家和地区将其用于亲权鉴定 和个体识别检案中 测定生物斑痕中的Gc时，最好用免疫学方 法显示其谱带,第四节 血清类粘蛋白型,血清类粘蛋白（ORM）：是存在于人类血 液、体液、分泌液中的一种具有遗传多态 性的1糖蛋白。 由两个基因座编码，分别是ORM1 与ORM2,一、ORM的生化性质与生物学功能 由肝脏及淋巴细胞合成，血清中的含量为 0.61.2g/l。在人类血浆蛋白中，ORM

26、 是含糖量最高、酸性最强的糖蛋白。 ORM的肽链结构中富含脯氨酸，具有较高 的稳定性和耐热性,在感染及肿瘤发生时，患者血清中ORM含 量显著赠高。因此，它被认为是一种急性 时相正反应物。 ORM具有免疫调节功能，可能是通过抑制 免疫反应来调控免疫系统,二、遗传及等位基因命名 基因定位于人类第9号染色体长臂上， ORM1与ORM2两个基因座紧密连锁， 常见等位基因按孟德尔定律共显性方式遗 传 在ORM1上有共显性等位基因： ORM1*F1、 ORM1*F2、ORM1*S， 决定六种表现型,在ORM2上有显性等位基因： ORM2*M 通常产生纯合表现型ORM2M 同一个体血清中ORM1蛋白的含量比

27、 ORM2蛋白约高3倍，在等电聚焦电泳 谱上，染色深者为ORM1，染色浅的为 ORM2,在ORM1基因座上，除了常见的三种等位 基因外，已发现包括沉默基因ORM1*Q0 在内的21种变异型 在ORM2基因座上，也发现了包括沉默基 因ORM2*Q0在内的28种变异型 所以人群的ORM*2基因座中，以 ORM2*M占绝对优势,三、群体遗传学调查结果 在调查过的群体中，ORM1*F1，ORM1*S 的基因频率均大于0.01，在所以人群中 ORM1均具有遗传多态性，并且均以 ORM1*F1最常见 东南亚地区人群中常检出ORM2*H19变异 型，其频率仅次于ORM2*M,由于ORM2基因座上的基因频率分

28、布不 好，沉默基因ORM2*Q0又较常见，加之 ORM2基因座的表达产物含量仅为ORM1 的1/3，所以ORM2分型的法医学价值 不如ORM1分型好,四、分型原理及方法 ORM不同表现型的区别取决于多肽链一级 结构的不同，一级结构的变化可引起蛋白 质理化参数的改变，血清电泳后用抗 ORM血清免疫固定可显示ORM表现型的 电泳谱型,第五节 免疫球蛋白同种异 型遗传标记,同种异型遗传标记是位于免疫球 蛋白上反应个体差异的遗传标记 一、免疫球蛋白的结构与分类,氨基端,羧基端,IgG(链）、IgA（链）、IgM（链）、 IgD（链）、 IgE（链）,人类Ig 根据其重链稳定区的分子 结构和抗原特异性的

29、不同，分为 五类：,根据IgG重链恒定区氨基酸排列不同及二 硫键的数目和位置不同将IgG进一步分为 四个亚类: IgG 1、IgG2 、IgG3、 IgG4 根据轻链恒定区的不同可分为两型：型 和型,二、Gm型与Km型的命名 位于IgG 1、IgG2 、IgG3、 IgA、 IgE 及轻链上的同种异型遗传标记分别以符 号G1m、 G2m、 G3m、Am、 Em、 Km代表 不同的免疫球蛋白亚类之间用分号隔开， 同一亚类之间用逗号隔开，基因型或单 倍型数字用右上角码标明,三、 Gm型与Km型的遗传 1、 Gm型的遗传 通过对Gm因子的广泛群体遗传学及家系 调查，证实Gm因子的遗传方式为常染色 体

30、共显性单倍型遗传。 其中Gm3、 Gm17表现出对偶关系,各Gm因子在单倍型上的组合随人群、种 族及地域的不同而异。 由于各群体调查Gm因子的种类及个数不 同，因而Gm因子单倍型中组合数目多寡 也不同 事实上，由于稀有单倍型的存在，在群体调 查中所检出表现型数往往多于常见表现型,2、Km型的遗传 Km系统有三个因子： Km（1）、 Km（2）、 Km（3），其中Km（1） 和 Km（3）为对偶关系 Km系统的等位基因有Km1、 Km1，2和 Km3三个，按常染色体共显性规律遗传,除了G1m（3）、 G1m（17） 位于IgG 1Fd段外，其余Gm因 子位于IgG重链Fc段，Km位于 轻链上,四

31、、 Gm型与Km型在人群中的分布 Gm系统的单倍型频率随人群、种族 及地域的不同而表现出较大的差异， 即使在中国汉族群体中Gm因子分布 也呈明显不均一现象,五、Gm型与Km型的测定 （一）红细胞凝结抑制试验 1.用抗DGm/Km血清致敏红细胞 2.证实红细胞已被致敏 3.红细胞凝结抑制试验 4.结果评价 （二）双抗体夹心酶联免疫法 (三) PCR法,六、法医学意义 Gm、Km系统个人识别率及非父排除率均 高于已知的红细胞血型、红细胞酶型及其 他血清型，且Gm与Km抗原在常温下或 碱性环境中很稳定，溶血对抗原性无大影 响，所以Gm、Km系统具有很高的法医学 应用价值,第六节 转铁蛋白型,转铁蛋白（Tf）：,是血液中一种主要的糖蛋白, 负责将肝组织(是铁贮藏的主要场所)的铁向其它组织的细胞运输,一、生化性质与生物学功能 由肝脏合成，血清中的含