微生物学：C28 肝炎病毒

1、第28章 肝炎病毒,是一组以肝细胞为主要靶细胞,侵犯肝脏,引起病毒性肝炎的病原体。 人类肝炎病毒有5种 分别棣属不同的科和 属,它们的传播途径和 临床特点也不尽相同 (P262 表28-1),第一节 甲型肝炎病毒 （Hepatitis A virus HAV）,棣属小RNA病毒科肝病毒属,是引起甲型肝炎的病原体 甲型肝炎一般为自限性疾病,预后良好,不发展成慢性肝炎和慢性V携带者,一、生物学特性,1.形态结构(肠道病毒共性),球形,直径2732nm,+ssRNA,20面体对称,无包膜； 电镜下见空心颗粒(不含RNA,无感染性)和实心颗粒(完整的HAV,有感染性) HAV仅有一个血清型,但有 7个

2、基因型(A/B、A/B、型HAV感染人;、型HAV感染猿猴;我国以A型多见),对理化因素有较强的抵抗力 海水,淡水,毛蚶,泥沙中存活数天至数月 耐受乙醚、氯仿等脂溶剂 耐酸(在pH3的酸性环境中稳定) 100 5 min可使之灭活 对紫外线、甲醛和氯敏感,2.抵抗力,3.动物模型和细胞培养,(1)HAV主要宿主为人和灵长类动物 动物模型主要用于HAV的病原学研究、疫苗免疫效果评价和药物筛选等 (2)HAV可在多种原代及传代细胞中增殖 V在细胞中增殖速度缓慢,且不引起CPE,确定是否感染仍需用免疫学方法检测,临床上很少应用。,二、致病性与免疫性,(一)传染源:急性期患者和隐性感染者 传播途径:粪

3、-口途径 易感人群:多侵犯儿童和青年(未接种过疫苗或无感染过HBV的),1988年上海甲肝大流行就有31万人发病(起因是食用污染的毛蚶),83.5%为2039岁的成年人。,2.致病与免疫机制,HAV(污染水源、食物、海产品等),口咽部、唾液腺初步增殖,肠黏膜或局部淋巴结大量增殖,病毒血症肝脏,肝细胞变性、坏死(急性肝炎),HAV在肝细胞内增殖缓慢,其致病机制主要与免疫病理反应有关 NK细胞的杀伤作用 CTL的杀伤作用 IFN-分泌增加,促进肝细胞表达HLA, HLA介导的CTL对肝细胞的细胞毒作用增强 病毒血症持续时间较短,血中病毒滴度较低,故经血播散感染罕见 甲肝患者有明显的肝炎症状,肝细胞

4、溶解,以隐性感染多见,年龄越小症状越轻 成人多表现为急性黄疸型肝炎 临床症状:厌食、恶心、黄疸(眼部及皮肤呈黄色)、尿黄、腹痛、乏力等 有自限性,一般不转为慢性,HAV只存在单一的抗原-抗体系统 (HAVAg 和 抗-HAV)； 无论显性感染还是隐性感染均能诱生出高效价抗-HAV； 抗-HAV IgM在血清中可存在13个月 抗-HAVIgM 阳性是甲肝的确诊依据 IgG型抗体可存在多年,是获得免疫力的标志(成人血清抗-HAV阳性率达70%-90%),临床多以免疫学检测为主 采集血清标本 抗体检测:抗体捕获ELISA法检测HAVIgM和IgG或HAV总抗体检测,三、实验室检查,四、防治原则,加强

5、食品、水源和粪便管理是预防甲肝的主要环节 已有减毒活疫苗和灭活疫苗用于甲肝的特异性预防,第二节 乙肝病毒（Hepatitis B virus HBV）,归属嗜肝DNA病毒科,正嗜肝病毒属。 引起乙型肝炎的病原体。 HBV感染是全球性的公共卫生问题 全世界乙型肝炎患者及无症状HBV携带者约3.7亿人。 我国为高流行区,约1.2亿人(感染率 60%;HBsAg携带率8%10%;慢性乙肝病人约1000万。,一、生物学特性,HBV感染者血清中,电镜观察发现有3种形态V颗粒,(一)形态与结构 重点,Dane颗粒的结构模式图,双链环状DNA,DNA聚合酶,核心,L蛋白(HBsAg+PreS1+PreS2)

6、,M蛋白(HBsAg+PreS2),S蛋白(脂质双层+HBsAg),外衣壳,HBcAg+preC(切割加工后成HBeAg),内衣壳,1.大球形颗粒(Dane颗粒) 重点 (1)是完整的HBV颗粒,有感染性 (2)呈球形,直径42nm,共3层结构,2.小球形颗粒：直径22nm 是病毒组装过程中过剩的外衣壳,3.管形颗粒 由小球形颗粒串连而成,无感染性,疫苗的主要成份,主要成分是HBsAg 不含DNA和DNA多聚酶,长链为负链(L-) 含4个编码区： C、P、S、X,短链为正链(S+),C区编码HBcAg+preC,preC经酶切割后形成的产物HBeAg,S区编码HBsAg,P区编码DNA聚合酶,

7、X区的功能不明确,可能与癌基因激活有关,(二)基因结构与功能,不完全闭合双环状DNA,基因组小(3.2kb),HBV有AH 8个基因型 (A型常见于美国和西欧;B型和C型流行于我国和亚洲;D型见于全世界;E型见于非洲; F型见于南美和阿拉斯加;G型见于北美;H型见于中美) 按HBsAg抗原可分4个亚型 adr、adw、ayr和ayw;我国主要流行adr (汉族)和ayw(少数民族),(三)HBV的复制,近来发现HBV亦可能在肝外组织细胞复制,(1)存在于三种颗粒的外衣壳中的糖蛋白 (2)感染者血中大量存在,是HBV感染的标志 (3)含有B细胞和T细胞表位,能刺激机体产 生中和抗体(抗-HBs)

8、,对机体具有特异性保护作用,能抵御V感染 (4)PreS1和PreS2具有肝细胞表面受体,介导V吸附;可刺激机体产生特异性抗体(抗-PreS1持续时间长,抗-PreS2持续时间短),1.表面抗原(HBsAg),(四)抗原组成 重点、难点,(1)存在于Dane颗粒的内衣壳,V复制时在肝细胞表面表达,故不易在血中检到；,2.核心抗原(HBcAg),(2)能刺激机体产生非中和抗体(抗-HBc) 抗HBc-IgM 表示HBV在体内复制增殖 抗HBc-IgG 表示曾感染过HBV或慢性期,(1)存在于Dane颗粒内衣壳上的可溶性蛋白,3.e抗原(HBeAg),(3)刺激机体产生中和抗体(抗-HBe),可抑

9、制V复制,具有一定保护作用,是机体预后良好的指标。,(2)V复制脱壳后,此抗原分泌到细胞外,游离于血清中,其消长与DNA聚合酶消长一致,故作为HBV复制及具有强感染性的指标之一。,(五)动物模型与细胞培养,1.易感动物：黑猩猩;常用于病毒致病机制及疫苗效价及安全性的研究。,2.细胞培养： (1)目前将病毒DNA导入肝癌细胞株培养，主要用于抗病毒药物的筛选。 (2)用病毒S基因转染细胞系,只分泌HBsAg而不表达病毒的其他蛋白,已用于制备疫苗,1.对低温、干燥、紫外线有耐受性,3.不被70%酒精灭活;0.5%过氧乙酸、3%漂白粉需浸泡30min,4.临床常用高压蒸汽灭菌121.3 20min和干

10、烤法160 2h,2.37 7天仍有传染性;煮沸100,10min;,*上述消毒手段仅能使HBV失去传染性 但可保留HBsAg的抗原性,(六)抵抗力 较强,(一)传染源:患者(潜伏期、急性期、慢性活动期)、无症状的HBV携带者 (二)传播途径： 1.血液或血制品(10-610-9/ml阳性血即可感染) 2.母婴传播(围产期、哺乳期、宫内感染) 3.性行为(西方将HBV列为STD) 4.其它途径:公共剃刀、牙刷、破损皮肤等,二、致病性与免疫性,免疫保护与免疫病理反应同时发生 机体免疫反应的强弱与临床症状的轻重和转归密切相关,(三)HBV的致病与免疫机制,临床表现复杂,主要有4种类型 (1)急性肝炎(可恢复) (2)慢性肝炎 (3)无症状携带者 (4)重症肝炎,HBV与原发性肝癌(自学),机体的免疫性:细胞免疫+体液免疫,三、微生物学检查,主要是检测血清标志物,俗称乙肝“两对半”检测(结果意义),HBsAg是V感染的指标之一,也是筛选献血员的必检指标 抗-HBs的出现表示机体对乙肝有免疫力,见于既往感染或接种疫苗 抗-HBcIgM或IgG均为V复制的标志 HBeAg是HBV复制,有很强传染性 抗-HBe提示V复制受抑制,处于恢复期,核酸检测 核酸杂交法、荧光定量PCR法等 HBV DNA(+)是诊断感染最直接依据