肇庆学院发酵工程作业题附答案电子版（XXXX年10级生技用） - 图

1、肇庆学院发酵工程作业题附答案电子版（xxxx年10级生技用） - 图 发酵:泛指培养生物细胞（含动、植物细胞和微生物）来制得产物的所有过程。 包括： 1） 厌氧培养的生产过程。 2）通气（有氧）培养的生产过程。 发酵工业:是指利用生物的生命活动产生的酶、无机或有机原料进行酶加工，以获得产品的工业。 发酵工程: 是指在最适发酵条件下，发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的技术。 生物技术: 应用自然科学及工程学原理依靠生物催化剂的作用将物料进行加工以提供产品或用以为社会服务的技术 发酵工业的范围： 1、以微生物细胞为产物的发酵工业 2、以微生物酶为产品的发酵工业 3、以微生物代谢产物为产品的发酵工

2、业 4、生物转化或修饰化合物的发酵工业 5、微生物特殊机能的利用 第二章 自然选育：在生产过程中，不经过人工处理，利用菌种的自然突变而进行菌种筛选的过程 诱变育种：利用各种被称为诱变剂的物理因素和化学试剂处理微生物细胞，提高基因突变频率，再通过适当的筛选方法获得所需要的高产优质菌种的育种方法 航天育种：利用空间环境高真空、微重力和强辐射的特点，在宇宙射线辐射的作用下，使生物的遗传性状发生变异，从而选育出优良菌种 杂交育种： 指将两个基因型不同的菌株经吻合使遗传物质重新组合，从中分离和筛选具有新性状的菌株的方法 原生质体融合： 就是把两个亲本的细胞壁分别通过酶解作用加以瓦解，使菌体细胞在高渗环境

3、中释放出只有原生质膜包裹着的球状体（称原生质体）。两亲本的原生质体在高渗条件下使之混合，由聚乙二醇（peg）作为助融剂，使它们互相凝聚，发生细胞融合，接着两亲本基因组由接触到交换，从而实现遗传重组。 第一章 dna重组技术：是指按人的意志，将某一生物（或供体）的遗传信息在体外经人工与载体相接（重组），构成重组dna分子，然后转入另一生物体（受体）细胞中，使被引入的外源dna片段在后者内部得以表达和遗传 1、什么是施加选择性压力分离法？ 2、试述从自然界中筛选工业微生物的步骤和方法。 步骤：调查研究， 试验方案设计， 标本采集， 标本材料的预处理， 富集培养，菌种初筛， 菌种复筛， 性能鉴定，

4、菌种保藏 方法： 1） 采样 2）样品的预处理 3） 纯种分离 4）生产性能的测定 3、简述诱变育种的主要程序。 出发菌株的选择 菌悬液的制备 诱变处理 中间培养 分离和筛选 4、简述原生质体融合育种的基本步骤。 1标记菌株的筛选和稳定性验证。 2原生质体制备。 3等量原生质体加聚乙二醇促进融合。 4涂布于再生培养基，再生出菌落。 5选择性培养基上划线生长，分离验证，挑取融合子进一步试验、保藏。 6生产性能筛选。 5、简述dna重组技术的基本过程。 含目的基因的dna片段的准备； 载体； 含目的基因的dna片段与载体在体外连接； 将重组dna分子导入宿主细胞，并于其中复制、扩增； 筛选出带有重

5、组dna分子的转化细胞； 鉴定外源基因的表达产物 6、理想的菌种保藏方法应具备的条件有哪些？ (1) 经长期保藏后菌种存活健在； (2) 保证高产突变株不改变表型和基因型，特别是不改变初级代谢产物和次级代 谢产物生产的高产能力； (3)菌种保藏的基本措施是低温、干燥、真空。 7.保存菌种的原理是什么？ 根据微生物的生理生化特性，人为地创造条件，使微生物处于代谢不活泼，生长繁殖受到抑制的休眠状态，以减少菌种的变异。 第三章 天然培养基： 是采用化学成分还不清楚或化学成分还不恒定的各种植物和动物组织或微生物的浸出物、水解液等物质制成的 合成培养基： 是用化学成分和数量完全了解的物质配制而成的。成分

6、精确，重复性强，可以减少不能控制的因素。 生理酸性物质： 经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源 生理碱性物质： 经微生物生理作用（代谢）后能形成碱性物质的无机氮源 生长因子 ： 广义说，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质都称为生长因子(又称生长素)，包括氨基酸、嘌呤、嘧啶和维生素等；狭义说，生长素仅指维生素 前体： 指加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入其而有较大的提高的物质 理论转化率： 指理想状态下根据微生物的代谢途径进行物料衡算，所得出的转化率的大小 ? 1、简述培养基的类型及其功能。

7、 类型： 1）按培养基组成物质的化学成分即纯度分类 合成培养基、天然培养基。 2）按状态分类 固体培养基、半固体培养基和液体培养基。 3）按用途分类 孢子培养基、种子培养基和发酵培养基。 ? ? ? ? ? ? 功能： 可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料。 ? 2、某些培养基中加入青霉素或豆油，它们的作用是什么？ 添加青霉素为了抑制革兰氏阳性菌，即可以防止染菌 添加豆油可以消泡，也可提供碳源 ? 3、培养基设计的一般步骤？ 1）根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑 的问题，初步确定可能的培养基成分； 2）通过单因子实验最终确定出最为适宜的培养基成分； 3） 当培养基成分确定

8、后，剩下的问题就是各成分最适 的浓度，由于培养基成分很多，为减少实验次数常采 用一些合理的实验设计方法。 第四章 种子扩大培养 指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养，最终获得一定数量和质量的纯种的过程 接种量 指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例 种龄 指种子罐中培养的菌体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间 1、种子扩大培养的一般步骤？ 休眠孢子， 母斜面活化， 摇瓶种子或茄子瓶斜面或固体培养基孢子， 一级种子罐，二级种子罐， 发酵罐。 2、影响种子质量的因素有哪些？ 1）原材料质量 生产过程中经常出现种子质量不

9、稳定的现象，其主要原因是原材料质量波动。原材料质量的波动，其主要原因是无机离子含量不同。 2）培养条件 （1）温度 （2）湿度 （3）通气量 3）斜面冷藏时间 3、比较接种、倒种和双种三者之间的区别 接种： 按无菌操作技术要求将目的微生物移接到培养基质中的过程 倒种： 种子一部分于种子罐，一部分于发酵罐 双种： 两个种子罐接种到一个发酵罐中 第五章 全挡板条件： 指在一定转速下，再增加罐内附件，轴功率仍保持不变 1） 机械搅拌发酵罐必须满足哪些基本要求？ ? 1）发酵罐应具有适宜的径高比 罐身长，氧的利用率高。 ? 2）发酵罐应能承受一定的压力 ? 3）发酵罐的搅拌通风装置应能使通入的气泡分散

10、成细碎的小气泡，增加气液接触表面积，并使气液充分混合，保证发酵必需的溶解氧，并提高氧的利用率。 ? 4）发酵罐应具有足够的冷却面积。 ? 5）发酵罐内部应抛光，尽量减少死角，避免藏污积垢，使灭菌彻底，避免染菌。 ? 漏。 2）机械搅拌发酵罐、气升式发酵罐、自吸式发酵罐的作用原理及其优缺点 机械搅拌发酵罐原理：机械搅拌发酵罐又称标准式或通用式发酵罐，是利用机械搅拌器的作用使通入的无菌空气和发酵液充分混合，促使氧在发酵液中的溶解，满足微生物生长繁殖和发酵所需要的氧气，同时强化热量的传递。优缺点：混合比较均匀，在生产上容易放大，传质传热比较均匀 气升式发酵罐原理：在罐外设上升管，或在罐内设导流筒，上升管两端分别与罐底及罐上部连接，形成循环系统。在上升管的下部装设空气喷嘴，空气喷嘴以