白假丝酵母菌

1、2020/10/29,真菌,1,第二十二章白假丝酵母菌,2020/10/29,真菌,2,重点 1.白色假丝酵母菌的生物学特性 2.白色假丝酵母菌的微生物学检查,2020/10/29,真菌,3,真菌学概述,概念： 是一类有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞型微生物。,2020/10/29,真菌,4,真菌的形态特性,（一）单细胞真菌呈圆形，如酵母菌。 （二）多细胞真菌由菌丝和孢子组成， 称丝状菌或霉菌。 菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真 菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶 状孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。,2020/10/29,真菌,5,单细胞真菌 酵母菌：孢子，

2、无菌丝 类酵母菌：芽生孢子，假菌丝 多细胞真菌 丝状菌（霉菌）：孢子和菌丝 菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依 据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢 子囊孢子等。,真菌的形态特性,2020/10/29,真菌,6,单细胞真菌形态,2020/10/29,真菌,7,类酵母菌白假丝酵母菌,孢子,假菌丝,2020/10/29,真菌,8,多细胞真菌形态,2020/10/29,真菌,9,真菌菌落特性 1酵母型菌落： 是单细胞真菌的菌落，形态与细菌 菌落相似，较大，表面光滑湿润柔软、边缘整齐，如 新生隐球菌。 2. 类酵母型菌落：如白假丝酵母菌，形成假菌丝， 伸入培养基中。 3霉菌型菌落：

3、是多细胞真菌的菌落。菌落呈棉絮 状、绒毛状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。,2020/10/29,真菌,10,酵母型菌落,2020/10/29,真菌,11,类酵母型菌落,2020/10/29,真菌,12,霉菌型菌落菌,2020/10/29,真菌,13,培养特性,真菌培养要求不高，常用沙氏(Sabouraud)培养基 (含1蛋白胨、4葡萄糖或麦芽糖、2琼脂)培 养，适宜温度2228，但深部真菌为37。适宜 PH值为4.0-6.0。 菌落是鉴别真菌的方法。注意以下几点： 菌落性质：酵母菌还是霉菌； 菌落大小，病原性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大； 菌落颜色 病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深；

4、致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开裂；污染性真菌菌落不下沉,很少引起开裂。 真菌依靠孢子及菌丝进行无性或有性繁殖,2020/10/29,真菌,14,变异性抵抗力,易发生变异 形态、培养性状和毒力等 抵抗力较强 对干燥、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感， 601小时菌丝、孢子均被杀死对2%石炭酸、 0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感对作用于 细菌抗生素不敏感，对二性霉素B制霉菌素、咪康 唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感。,2020/10/29,真菌,15,致病性与免疫性,致病性 1.致病性真菌感染： 浅部真菌：角蛋白酶、机械刺激、代谢产物 深部真菌：慢性肉芽肿、组织溃疡 2.条件致病性

5、真菌：假丝酵母菌 3.真菌超敏反应性疾病 4.真菌性中毒症 5.真菌毒素与肿瘤 免疫性 天然免疫 获得性免疫： 体液免疫、 细胞免疫,2020/10/29,真菌,16,真菌感染的病原学诊断,标本的采集 临床标本类别： 1皮肤的角质性物质：毛发、指(趾)甲、皮屑等。 2各种分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、 粪便、尿 液等。 3血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿 刺液等。 4脓汁及渗出物。,2020/10/29,真菌,17,采集标本注意事项：,1.采集的标本要适宜 不同真菌感染应采取不同的临床标本。 怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发 癣应取病发。深部真菌

6、感染应取血液、脑脊液、脓汁等。 2在用药前采集标本 一般真菌标本须在用药前采集，对已 用药者则需停药一段时间后再采集标本。 3采集的标本量要足 血液和脑脊液5ml，胸腔液20ml，皮屑 标本两块，活体组织两份(一份病理检查，一份镜检和培养)。 4严格无菌操作 并进行消毒处理，尤其是采集血液和脑脊 液标本，要避免污染杂菌。 5采集标本立即送检 深部真菌标本最长不得超过2h。,2020/10/29,真菌,18,检验程序P354,检验方法 直接检查不染色和染色镜检,2020/10/29,真菌,19,培养检查法 培养基的选择 培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养 真菌的鉴定 生化反应用于主要深部感

7、染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。 1.糖(醇)类发酵试验 37孵育，观察糖发酵情况。 2.同化碳源试验 含菌生理盐水与已融化的固体同化碳源培养 基(45)混合，然后在培养基上分别加糖，置25孵育观察 结果。若24h后无变化可重复加糖。如能同化周围有生长圈， 否则无生长。 3.同化氮源试验 同化碳源试验相同，但需用无氮源的培养基，不要加糖类，而加入硝酸钾。 4.明胶液化试验、尿素分解试验、测定淀粉样化合物 5.分解牛乳试验,2020/10/29,真菌,20,抗原检测 常用的方法有胶乳凝集试验、ELISA、半定量放射免疫法。均 应设对照，防止发生假阳性和假阴性。 动物实验 实验的目的是分离病原性真菌

8、、确定真菌菌种的致病性、研究 药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏 明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。 核酸检测 从核酸碱基G+C mol分析、限制性片段长度多态性(RFLP)、 Southern印迹分析到脉冲场凝胶电泳(PFGE)、PCR指纹、随机 扩增多态性DNA(RAPD)以及DNA特殊片段测序等。,2020/10/29,真菌,21,主要致病性真菌,真菌按其侵犯部位和临床表现分为： 表面感染真菌 浅部感染真菌 皮肤癣真菌 皮下组织真菌感染 深部感染真菌： 新生隐球菌 条件致病性真菌：假丝酵母菌,2020/10/29,真菌,22,深部感染真菌,深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，

9、引起全身性感染的真菌。 多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变 深部感染真菌分两大类： 1. 致病性真菌： 此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等，属外源性，我国少见； 2. 条件致病性真菌： 是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。,2020/10/29,真菌,23,假丝酵母菌俗称念珠菌，有81个种，其中有11种对人有致病 性：白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母 菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。 白假丝酵母菌（canidia Albicans）又称白色念

10、 珠菌，广泛存在于自然界，也存在于正常人 口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机 体中数量少，不引起疾病 。为条件致病性真 菌。,2020/10/29,真菌,24,1微生物特性,白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径2-4m。革兰阳性。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、假菌丝，孢子可伸长成芽管，如不与母细胞脱离而形成假菌丝。,2020/10/29,真菌,25,营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基 均生长。需氧，室温或37，甚至42生长良好。菌 落呈酵母样，有大量向下生长的营养假菌丝，表面光 滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落 增大成蜂窝状。在玉米粉吐温-80培养基中可长出厚

11、膜 孢子。,沙氏斜面,普通平板,血平板,2020/10/29,真菌,26,2致病性和免疫性 本菌可侵犯人体许多部位， 机体也可它产生的免疫力,过敏,2020/10/29,真菌,27,3微生物检验 1.标本采集：所致疾病不同，取不同标本。2.检验程序P3543.检验方法及鉴定,1）直接显微镜检查：取脓汁、痰和局部炎症性分泌物直接涂片，有些标本需用KOH先消化，革兰染色后镜检，显微镜见到革兰阳性(着色不均匀)、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，厚膜孢子较少见。,2020/10/29,真菌,28,2）培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，25或37培养12d后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和

12、芽生孢子。,2020/10/29,真菌,29,3)鉴定试验 芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于0.20.5ml血清中，37孵育1.5h观察有无芽管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。,芽管,芽管,芽管,2020/10/29,真菌,30,厚膜孢子形成试验： 将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基25孵育1-2d 后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚 膜孢子。,厚膜孢子,2020/10/29,真菌,31,糖同化和糖发酵试验： 凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做那些不发 酵糖的同化试验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，25孵 育，一般观察23d，对不发酵或弱发酵管可延长至10d 或24

13、周。观察有无酵母生长或液体培养基是否变混 浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定白假丝酵母菌 和其他假丝酵母菌。,2020/10/29,真菌,32,TZC试验： 将白色念珠菌接种于含0.005氯化三本四氮唑的沙保 培养基中，经2225，2448h培养，白色念珠菌不 变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红 色(被还原为红色的三苯甲) 。 血清学试验：取病人血清作ELISA、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。 核酸检测：用PCR法将白假丝酵母菌DNA分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和特异性。 动物试验 ：,2020/10/29,真菌,33,新型隐球菌,新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土

14、壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。 可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。,2020/10/29,真菌,34,较大球形，直径可达520um， 有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌， 用墨汁阴性显影法镜检 ，可见到透明荚膜包裹着菌细胞， 菌细胞常有出芽，但不生 成假菌丝。,生物学特性,2020/10/29,真菌,35,在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于25及37皆可生长，而非病原性隐球菌在37不能繁殖。 酵母型菌落，呈白色。 本菌能分解尿素，以 此与酵母菌和念珠菌鉴别。,2020/10/29,真菌,36,致病性,本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。 侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。 此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿。,2020/10/29,真菌,37,微生物学检验,1直接镜检：常用墨汁涂片法。 2分离培养： 在沙保培养基上，室温、3723天即可长出典型 酵母型菌落。有荚膜者菌落粘稠。,2020/10/29,真菌,38,3糖同化及发酵试验：本菌不发酵各种糖类，但能同化葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。 4酚氧化酶试验：在含多巴橘橼酸铁和咖啡酸培养基中，经天培养，新型隐球菌出现棕黑色菌落。 尿