血型鉴定常见的疑难问题分析及处理

2020/6/15，1，血型鉴定中常见疑难问题的分析与处理，2020/6/15，2，概述，随着输血医学的发展，输血安全越来越受到各方面的关注。输血安全主要体现在两个方面，一是血源性疾病问题，二是血液免疫学问题，即血型和血清问题。2020/6/15，3，概述，血型血清学不同于一般临床医学检验，有其自身的特点。一般临床医学检查的工作流程非常明确，即接受临床医生的申请，按照各种检查的操作程序完成申请内容并反馈结果。血型的血清学检查与此大不相同。各医院的临床医生和输血科向血库和血液中心血型参考实验室提交了以下试验申请：2020/6/15，4，血型参考实验室涉及的检验内容，血型鉴定困难和交叉配型困难的原因分析，以及输血反应的其他原因分析：母婴血型不合、新生儿溶血病试验、coombs试验、血小板抗体试验等。2020/6/15，5，ABO血型常规分型法，玻片法，纸片试管法，微孔板法，微柱凝集法，2020/6/15，6，辅助实验常用于疑难血型鉴定，吸收试验扩散试验(常用热扩散)DTT(二硫苏糖醇)治疗自凝集红细胞唾液血型物质测定(中和试验)基因型检测的分子生物学技术，2020/6/15，7，血型血清学的工作特点和鉴定技术因病例而异，没有固定的格式。因此，有必要在测试过程中随时分析测试结果，选择最有效的方案(方案)。血型参考实验室必须全面分析病历，有选择地使用相应的实验方法来解决问题。此外，在接受检测申请时，还应详细了解患者的既往病史性别、年龄、国籍、临床诊断和临床症状，以及患者的输血史和用药史。例如，已婚妇女也应该询问她们的妊娠史。这些都是解决问题的关键。2020/6/15，8，血型血清学的工作特点，例如，对于白血病患者，应考虑因疾病而削弱血型抗原的可能性；对于患有消化系统疾病的患者，应考虑由于产生“类B物质”而导致血型识别错误的可能性。对于多次输血的患者，应考虑在体内产生免疫抗体的可能性等。2020/6/15，9，血型鉴定困难，共有特征：个阳性和阴性定型。2020/6/15，10，一、ABO血型正反分型不一致及其原因，1。技术和管理错误2。正定型红细胞自身相关问题3。抗分型-血清自身相关问题，2020/6/15，11，1。技术和管理错误，(1)标本或试剂错误，导致假阳性或假阴性结果。(2)设备不清洁，产生假阳性结果。(3)试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果。(4)离心过多或不足会导致假阳性或假阴性结果。2020/6/15，12，1、技术和管理失误，(5)阳性反应引起的溶血未被识别，导致假阴性结果。(6)试剂被省略以产生假阴性结果。(七)结果记录或判断错误，导致假阳性或假阴性结果的。(8)细胞与血清的比例不当，导致假阳性或假阴性结果。2020/6/15，13，2、阳性明确-红细胞自身相关问题，1。红细胞(如自身免疫性溶血性贫血患者的红细胞)经红细胞致敏直接抗球蛋白试验呈阳性，可在含有高蛋白培养基的试剂中凝集，产生假阳性结果。2.基因型异常的ABO亚型弱抗原难以用常规方法检测，导致假阴性结果。3.顺式-AB型(顺式-AB型)是指同时获得和真正的嵌合体非常罕见，可以出现在双胞胎中。在胚胎阶段，两个胎儿的血液由于血管吻合而混合。两种血液都被身体识别为自身，不产生抗体。在输血(例如，将O型红细胞输给A型或B型人群)、骨髓移植、换血以及母体和胎儿出血后，可能会出现人工嵌合体。2020/6/15，15，2、正定型红细胞自身相关问题，5。疾病因素导致抗原弱化常见患者如白血病、何杰金氏病、10号染色体易位、红细胞系统极度增生如海洋性贫血ABO血型抗原可被暂时抑制，抗原弱化检测困难。红细胞ABO抗原的减弱与疾病的进程有关，当疾病缓解时，抗原性将恢复。6.红细胞多重凝集当患者被细菌或病毒感染时，病毒或细菌产生的酶会导致红细胞上的T抗原被暴露和激活。由于正常人血清中含有抗-T抗体，它能与正常人血清发生凝集反应，阳性分型试验为假阳性。2020/6/15，16，2、正定型红细胞自身相关问题，7。获得性b类由于革兰阴性杆菌的作用，红细胞可以获得“b类”活性。(当肠梗阻、结肠癌、直肠癌或其他下消化道疾病时，肠壁通透性增加，细菌多糖进入血液，在A型患者中引起获得性B样现象)8。可溶性血型物质增加。胃或胰腺恶性肿瘤患者的血清中可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质会中和抗甲(乙)血清，从而影响阳性分型结果。2020/6/15，17，2，阳性明确-红细胞自身相关问题，9。红细胞自凝患者血清中的高价自冷凝集素引起红细胞凝集。10.近年来，输血已成为一种异型现象，它使患者的血液样本成为不同类型红细胞的混合物，并在形成时表现出“混合外观凝集”现象。2020/6/15，18，3，反刻板印象血清自我相关问题，1。在血浆交换处理之后，在不久的将来进行了大量的血浆交换处理，这影响了抗体滴度并导致抗定型困难。2.血浆蛋白异常血浆蛋白异常患者血浆中白蛋白、球蛋白比例异常和高浓度的纤维蛋白原可导致形成胶冻和假凝集，常见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、霍奇金淋巴瘤、严重肝病等患者。3.聚合物对等离子体增容剂(葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮等)的影响。)也会导致粘结性凝集，导致假阳性结果。2020/6/15，19，3、反刻板印象血清自我相关问题，4。受试者血浆中包含的不规则抗体或自身冷凝集素IgM不规则抗体(ABO血型抗体除外)与试剂A、B和O细胞上的相应抗原反应。5.低丙种球蛋白血症和低丙种球蛋白血症的病例(如白血病、淋巴瘤和使用免疫抑制剂的患者、先天性丙种球蛋白缺乏症患者和免疫缺陷患者)在血清因免疫球蛋白水平整体下降而凝固时可能不凝集或仅出现弱凝集反应。2020/6/15，20，3，反刻板印象血清自我相关问题，6。不产生自身抗体的婴儿、母亲被动获得抗体的婴儿或抗体水平下降的老年人的年龄因素，在试验中可发现异常结果，如无凝集或只有微弱的凝集反应。7.骨髓移植后，ABO不同类型的骨髓移植患者。8.纤维蛋白原的影响使用不完全凝固的血浆或血清会形成小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块。2020/6/15，21，总结(1)，1。红细胞抗原增加引起的红细胞致敏(额外反应):直接抗人球蛋白试验呈阳性。红细胞多凝性红细胞自凝性获得性乙类其他：近期异常输血、嵌合血型二、红细胞抗原弱化的原因异常基因型(ABO亚型等)。)顺-单型(顺-单型)疾病因素导致抗原弱化(常见于血液疾病患者，如白血球型)可溶性血型物质增加高分子聚合物的影响：等离子体增容剂(葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮等。)也可导致粘结性凝集，导致假阳性结果。不规则抗体或自身冷凝集素的存在对纤维蛋白原的影响，2020/6/15，23，总结(3)，4。血浆置换治疗后低丙种球蛋白血症的年龄因素：婴儿和老年人抗体水平低。骨髓移植后，2020/6/15，24，积极和消极的定型观念不符合一般的处理程序。首先，询问并咨询患者的年龄、患者的病史、患者最近的输血史、患者最近的用药史、患者在骨髓移植前的血型是否已经进行过血浆置换，2020/6/15，25，积极和消极的定型观念不符合一般的处理程序。第二，用试管法重复试验，判断可能的原因。试管合法分型的优势1。结果可以重复离心。2.抗原和抗体的反应时间可以任意延长，反应温度(4和37)可以改变，有利于弱抗原和抗体的检测或消除冷凝集素的干扰。3.可以观察到红细胞的混合外观。4.可以观察到红细胞溶血。2020/6/15，26，ABO分型中常见问题的解决方案，ABO亚型*阳性定义：抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H*阴性定义：A1c、A2c、Bc、Oc、自身对照*阳性和阴性分型在不同温度下反应，比较凝集强度的变化*吸收发射试验*唾液血型物质试验*家系调查或血型基因的聚合酶链反应检测，如果条件允许的话。2020/6/15，27， 2020/6/15，28，抗体减弱*延长孵育时间，4孵育*酶处理试剂红细胞*既往血型调查*免疫球蛋白水平测定，2020/6/15，30，ABO血型常见问题的解决方法。冷自身抗体*分别在37孵育血清和红细胞，然后再次混合它们*在37用温盐水洗涤红细胞，在45热扩散3分钟*用巯基试剂(DTT)处理红细胞)*自吸收并去除血清中的自冷抗体，2020/6/15，31，ABO分型中常见问题的解决方案，在室温下反应的同种抗体*使用光谱细胞进行抗体鉴定*选择没有相应抗原的A和B细胞进行反向分型。2020/6/15，32，ABO分型常见问题解决方案，获得性B红细胞*病史询问*酸化抗B血清(pH6.0)*唾液型物质检测*家庭调查证明无遗传基础，2020/6/15，33，ABO分型、混合视野凝集*ABO亚型：A3、B3亚型等常见问题的解决方案。*不同类型的ABO输血(非O型人最近输入O型血):询问近期输血史、自体红细胞毛细血管离心分离等。ABO骨髓移植后纯合子相包埋红细胞和双杂交体红细胞，2020/6/15，34，对ABO分型中常见问题的解决方案，由致敏红细胞引起的假阳性洗涤红细胞比容测试红细胞在56水浴中扩散。10分钟，直到直接抗体试验的阳性结果明显减弱或消失，并再次洗涤扩散的细胞进行阳性分型试验。2020/6/15，35，2020/6/15、41、 2020/6/15、42、 2020/6/15、43、 2020/6/15、44、 2020/6/15、45、 2020/6/15、46、 2020/6/15、47、 2020/6/15、48、 2020/6/15、48、正常表达可分为：a、b、AB、o。原则上采用相同类型的输血，特殊情况下采用匹配的输血类型(洗涤细胞优先)。输血患者血型的选择，2020/6/15，49，ABO血型系统特异性表达的ABO血型亚型：亚型是指属于同一血型的抗原，但在抗原结构和性能或抗原位点数量上有一定的差异。如A1、A2、A3/B3、Ax/Bx、Am/Bm、Ael/Bel，以及相应的抗体亚型如A3B、AxB、ABx、AbE等。输血时的血型选择：除非患者血清中有37的抗A1/-B1抗体反应，否则不需要进行同一亚型的输血。通常，可以使用相同的抗原血型或O型洗涤细胞输注。例如，亚型A和亚型B被输入A型血，2020/6/15，50，ABO血型结果的解释和应用，ABO血型系统中其他特殊表达血型的孟买型：用Oh表示。这种类型的特征是红细胞上缺乏甲、乙、氢抗原，血清中存在抗甲、乙、氢抗体。输血时血型的选择：最好