临床常用免疫学检查ppt课件

1,.,临床常用免疫学检查,宜宾县第四人民医院.检验科,.,2,免疫学诊断：用免疫学方法确定疾病相关因子、监测疾病过程、判断疗效及预后，涉及对疾病相关因子的诊断和辅助诊断，以及检测机体免疫功能状态。临床常用免疫学检查：血清免疫球蛋白检测，血清补体检测，细胞免疫检测，肝炎病毒标志物检测，感染免疫检测，肿瘤标志物检测，自身抗体检测及其它免疫检测。,.,3,一.体液免疫功能检测检测血清免疫球蛋白及其类别（尤其是IgG、IgA和IgM）和水平，可为诊断免疫缺陷性疾病和免疫增殖性疾病提供重要参数。检测针对疫苗或感染因子的特异性抗体及其水平，可较直接反映机体特异性体液免疫功能状态。,.,4,1免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig)具有抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由浆细胞产生，存在于血液、体液、外分泌液及部分细胞的表面。分五类：IGG、IGM、IGA、IGD、IGE。1.IgG、IgM、IgA的检测：IgG是血清中的主要抗体成分，占总Ig的75%是唯一能通过胎盘的Ig，通过自然被动免疫获得。IgM是Ig中分子量最大者，亦是最早出现的抗体为五聚体，在机体早期的免疫防御中起重要作用。IgA分血清型与分泌型，尤以分泌型IgA在局部抗感染、抗过敏起重要免疫屏障。,.,5,检测方法：免疫扩散法及免疫比浊法参考值：各个年龄阶段有差别临床意义：(1).Ig均增高常见于慢性肝病、淋巴瘤、SLE、RA、MM等(2).单一Ig增高：见于免疫增殖性疾病如MM（IGG），巨球蛋白血症（IGM）(3).Ig降低：反复呼吸道感染者常见IGA单一降低2.IgG亚类测定分四类：IgG1IgG2IgG3IgG4与免疫缺陷病和变态反应性疾病有关3.IgE测定血清含量低但与I型变态反应疾病有关,.,6,测定方法：ELISA法参考值：0.10.9mg/L意义：IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、重链病、肝脏病、结节病、RA和各种过敏性疾病。IgE降低：见于丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期用免疫抑制剂者和共济失调性毛细血管扩张症等。,.,7,二.血清M蛋白(monoclonalimmunoglobulins)测定测定方法：蛋白电泳法、免疫比浊法和免疫电泳法参考值：阴性意义：检测到M蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增殖性疾病。见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链病、轻链病和半分子病等,.,8,三.血清补体检测基本概念补体(complement)：是一组具有酶原活性的糖蛋白，由传统途径的9种成分C1-C9、旁路途径的3种成分及其衍生物组成，参与灭活病原体的免疫反应，也参与破坏自身组织和自身细胞而造成的免疫损伤。1.补体CH50方法：试管法参考值：50000-100000u/l意义：反映补体传统途径活化的活性程度。1、CH50增高见于急性炎症、组织损伤和某些恶性肿瘤；2、CH50降低见于肾小球肾炎、自身免疫病、感染性心内膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病。,.,9,2.补体C3方法：单向免疫扩散法(1.140.27g/L)免疫比浊法(0.85-1.70g/L)意义：1、增高见于急性炎症、传染病早期、肿瘤和排异反应；2、减低见于70%以上的急性肾小球肾炎、85%以上的链球菌感染后肾炎、78%狼疮性肾炎患者。还见于活动性SLE和类风湿性关节炎。,.,10,2.补体C4方法：单向免疫扩散法(0.553-0.109g/L)意义：1、升高见于急性风湿热、结节性动脉周围炎、皮肌炎、关节炎、和组织损伤等；2、降低见于自身免疫性肝炎、狼疮性肾炎、SLE、1型糖尿病、胰腺癌、多发性硬化症、类风湿性关节炎、IgA肾病和遗传性IgA缺乏症。3.补体C1q方法：单向免疫扩散法(0.197-0.04g/L)意义：1、增加见于骨髓炎、类风湿性关节炎、痛风、过敏性紫癜等；2、降低见于SLE和混合性结缔组织病等。,.,11,4.BF方法：单向免疫扩散法(0.1-0.4g/L)意义：增高见于某些自身免疫病、肾病综合征、慢性肾炎、恶性肿瘤；2、减低见于肝病、急性肾小球肾炎、自身免疫性溶血性贫血。第二节细胞免疫检测主要包括有T细胞、B细胞、K细胞、NK细胞及其亚群；临床常对淋巴细胞的数量，表面标志物及功能进行检测，以了解机体的细胞免疫功能.,.,12,T细胞免疫检测1.T细胞表面标志物检测(1).E-玫瑰花形成试验：用于检测T细胞的数量。其临床意义：降低；见于免疫缺陷性疾病，如恶性肿瘤、免疫性疾病、大面积烧伤、多发性神经炎等。升高：见于甲亢、甲状腺炎、重症肌无力、慢性活动性肝炎、SLE活动期和器官移植排斥反应等。（2）T细胞分化抗原测定CD3:参考值（IFA法）61%-85%意义：降低见于自身免疫性疾病，如SLE、RA等CD4:参考值（IFA法）28%-58%意义：降低见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、爱滋病、应用免疫抑制剂者,.,13,CD8+:参考值（IFA法）19%-48%意义：减低见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病CD4+/CD8+：参考值（IFA法）1.660.33意义：比值增高见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染、变态反应等；比值降低见于爱滋病；监测器官移植排斥反应时比值增高提示可能发生排斥反应。注：当CD1-8都增高可能为T细胞型急性淋巴细胞白血病,.,14,B细胞免疫检测1.B细胞表面标志物检测：B细胞表面有表面抗原(CD19、CD20、CD21、CD22、CD40等)与表面受体(BCR、CKR、CR、FC等)BCR又称B细胞表面免疫球蛋白（SmIg），是B细胞的特征性表面标志，其类别随B细胞发育阶段不同而变化。(1).B细胞表面免疫球蛋白（SmIg）测定：主要用于检测外周血B细胞的百分率。临床意义：SmIg减低见于免疫缺陷性疾病；SmIg升高见于慢性淋巴细胞性白血病、多毛细胞白血病和原发性巨球蛋白血症。原发性巨球蛋白血症患者SmIgM阳性细胞可占78%。,.,15,(2).B细胞分化抗原测定：临床意义：升高见于急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病和Burkitt淋巴瘤等；降低见于无丙种球蛋白血症、使用化疗或免疫抑制剂后。淋巴细胞功能检测(1).T细胞转化试验：反映T细胞的免疫功能。临床意义同T细胞花结形成试验。但Down综合征时明显增高。(2).混合淋巴细胞反应：反映机体整体的细胞免疫功能，还可用于HLA的细胞学分型,.,16,自然杀伤细胞免疫检测自然杀伤细胞活性测定：可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一。在血液系统肿瘤、实体瘤、免疫缺陷病，爱滋病和某些病毒感染者活性降低；宿主抗移植物反应者活性升高。中性粒细胞吞噬、杀菌功能检测反映机体抗感染免疫的能力,.,17,第四节感染免疫检测病原体及其代谢产物进入人体后刺激机体免疫系统，产生相应的免疫产物，免疫产物进入血液。临床多利用凝集试验、补体结合试验、沉淀试验、免疫荧光发（IFA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫法（RIA）等手段检测血清中的免疫产物或病原体的抗原成分，帮助某些感染性疾病的诊断或早期诊断。近年来随着分子生物学的发展，可以利用聚合酶链反应（PCR）或DNA探针分子杂交技术对病原体的核酸进行检测，帮助确定病原学诊断。一.细菌感染免疫检测,.,18,1.抗链球菌溶血素“O”测定病人感染A群溶血性链球菌一周后ASO开始升高，4-6周达高峰，可持续几个月或几年，见于活动性风湿热、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎、急性上呼吸道感染、皮肤软组织感染。抗体滴度逐步下降提示疾病缓解。2.肥达氏(Widal)反应：协助伤寒与副伤寒的诊断。参考值：O凝集价1：80伤寒H凝集价1：160副伤寒A、B、C凝集价1：40为阳性。最多见于未治疗的SLE，活动期SLE几乎100%阳性。也可见于其他自身免疫性疾病。抗核抗体共有4种荧光核型：均质型，见于SLE、SS、PSS、MCTD；边缘型，见于SLE、SS；颗粒型，见于SLE、RA；核仁型，见于PSS、Crest征。抗脱氧核糖核酸测定：分为抗双链DNA抗体（ds-DNA）、抗单链DNA抗体（ss-DNA）、抗Z-DNA抗体。抗双链DNA抗体的检测有重要的临床意义，它见于活动期的SLE，阳性率70%-90%。,.,26,组织和细胞抗体的检测：抗线粒体抗体（AMA）：正常人群阳性率低于10%。许多肝脏疾病可检出AMA，原发性胆汁性肝硬化无症状患者为90.5%，有症状患者为92.5%；慢性活动性肝炎可达90%以上；但胆总管和肝外胆管阻塞为阴性。抗甲状腺球蛋白抗体（抗-TG）：阳性见于90%-95%的桥本甲状腺炎，52%-58%的甲亢和35%的甲癌。此外，40岁以上的健康妇女检出率为18%。,.,27,抗甲状腺微粒体抗体（抗-TM）：抗-TM阳性检出率：桥本甲状腺炎为50%-100%，甲减为88.9%，甲状腺肿瘤为13.1%，单纯性甲状腺肿为8.6%，亚甲炎为17.2%-25%。抗乙酰胆碱受体抗体：对诊断重症肌无力有意义，敏感性和特异性高，大约90%患者阳性，其他眼肌障碍者全部阴性。可作为重症肌无力疗效的观察指标。抗平滑肌抗体：狼疮性肝炎患者阳性率高达80%，急性肝炎患者的阳性率70%，但在发病一周时出现，3个月后消逝失。,.,28,其它自身免疫抗体检测类风湿因子（RF）：正常为阴性。类风湿性关节炎（RA）的阳性率为70%，RF为RA病情活动程度的判断指标之一。其他自身免疫性疾病，如多肌炎、SLE、硬皮病、干燥综合征等可见阳性。，某些感染性疾病如传单、结核、感染性心内膜炎等多呈阳性。ACA检测：阳性见于SLE，PLT减少症，习惯性流产等ANCA检测：用于诊断血管炎狼疮细胞(LE)检测,.,29,第八节细胞因子的检测白细胞介素2（IL-2）活性和白细胞介素2受体（IL-2R）测定：IL-2随着年龄的增长有降低趋势。增高见于自身免疫性疾病、再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤和排斥反应等。降低见于免疫缺陷性疾病、恶性肿瘤、