【毕业学位论文】（Word原稿）甘蓝显性雄性不育材料DGMS79-399-3不育性遗传效应分析及纯合不育株的离体保存蔬菜学博士论文

密级 论文编号： 中国农业科学院 学位论文 甘蓝显性雄性不育 材料 育 性遗传效应分析 及纯合不育株的 离体保存 of in of in of in of in 摘 要 甘蓝显性核基因雄性不育材料 下简称 是我国已成功应用于生产的雄性不育类型，但目前仍存在一些问题需要研究解决。（ 1）有些基因背景的 （ 2）影响 3）该材料不育性的遗传效应尚未开展研究；（ 4）长期离体保存的纯合 5）对某些基因型的 繁技术尚需改进；等等。为 此， 本研究以 料 为试材，进行了以下几个方面的研究： 验结果如下： 1进一步证明不同遗传背景的甘蓝 820、 129、 365等材料不育性稳定，应用前景好。而对于环境敏感型 度（主要是平均温度）是影响育性表达的主要环境因子 。不同环境敏感 致不育度降低的温度有差异。材料 806达到稳定不育的临界平均温度约为 20，材料 811、 813约为 19，材料 818为 22对温度敏感时段在开花前 1敏感时段在开花前 12 2降低环境温度可作为诱导 料出现有微量花粉的敏感不育株的一种方法。多年不出现微量花粉的 74在平均温度为 12左右 的塑料棚小气候条件下首次获得 2朵具有微量花粉的花朵。取微量花粉给 374不育株授粉获得少量种子，利用 0个单株进行分子检 测，初步检测存在 7个纯合显性不育株。 3用 个世代联合分析法两种不同的遗传分析模型研究了甘蓝 果表明，甘蓝 显性主基因 +加 性 显性 上位性多基因模型（ 主基因的遗传率为 微效基因的遗传率为 主基因的显性作用远远大于加性作用。以上两种遗传分析模型相互验证了：影响甘蓝 主效核基因的显性作用占主导地位，但是主 效基因的加性作用以及微效基因的作用对育性的影响也不容忽视。 遗传效应分析结果表明，纯合不育材料 523603它们配制的 5个不育系（组合）不育度平均值分别达 其中各有 3个组合整个开花期不育度为 100%，说明这两个纯合不育材料具有较好的应用前景。 4对已分别保存 10 年、 8 年和 7 年的纯合 料 969899 析，未发现 平上的变化。 对 离体 保存半年的 050505基化状态 的检测，发现 3 个材料保存 半年 后均发生 基化模式的改变以及甲基化和脱甲基化变化，但从整体上看甲基化程度降低。 对离体保存的甘蓝纯合 料进行 毒的检测结果表明，组培材料体内 毒带毒率与材料本身田间植株带毒状况有关，特别是与取材当年的 毒发生量有关；继代 2 次 未见带毒率增加 。 离体保存的甘蓝 料在保存过程中 虽然发生 甲基化状态的改变以及 毒在甘蓝组培材料体内存在，但尚未发现对组培材料的田间生长和植物学性状产生影响， 这说 明甘蓝 课题 组现有的离体保存程序对甘蓝 料的保存是可行的。 5在 18，研究了保存甘蓝纯合 料的适宜条件。单芽茎段适合 04保存， 2茎段适合 03保存。用封口膜 +塑料膜封口可减少 04 0303 +甘露醇 活性炭 蔗糖 3%的条件下， 04 + +蔗糖 7%的条件下长期保存后存活率最高。保存后的材料转入新鲜的培养基中， 98%以上的茎段均能恢复生长。 6以 040304个不同球型的甘蓝 料为试材，研究了适合它们组培快繁的方法。适合 04繁的培养基为： 糖 3%、合 03繁的培养基为： 糖 2.%、 合04繁的培养基为： 糖 2%、 养过程中封口膜作为封口材料最佳。在相同的培养条件下，由于基因型的不同增殖系数有很大的差别。圆球类型的甘蓝料 04殖系数最高，尖球类型的甘蓝 料 03殖系数最低。 关键词 ： 甘蓝，显性雄性不育，遗传效应，纯合不育株，离体保存 he 9in as in in : (1) to a so it is to ; (2) to be (3) of to be (4) of in (5) of in to be To as to of of in of of in as 1. It of 20、 129、 365 so a in as of on 00% in 06 0、9 11、 813 218 of -3 22 To a to a 74 a to a of 2 20 of 74 to in 0 3. of in I of to of in of of of of of of of of IV be of 2303of of of of 00% in so a in 4. of 15 (6989in 0、 8 NA 69899005 of de NA in of in in of of in of no in NA in in in of at in is to 5. of 820 ,4-3 3Z by of 34+% S+6+%, to 8% 6. 40344S+ + +.%、 3S+、 4is of 4308-1 in V 目 录 中文摘要 . I 英文摘要 . 一章 文献综述 . 1 1 1 植物雄性不育性的类型及遗传 . 1 1 1 1 雄性不育性的 定义和表现形式 . 1 1 1 2 芸薹属作物 雄性不育 的 类型和 遗传 . 2 1 2 植物数量性状遗传研究的进展与在育种上的应用 . 4 1 2 1 植物数量性状遗传研究方法的发展 . 4 1 2 2 植物数量遗传理论在育种中的应用 . 6 1 3 植物种质资源离体保存技术研究进展 . 7 1 3 1 一般保存 . 8 1 3 2 缓慢生长法离体保存 . 8 1 3 3 超低温保存 . 10 1 4 植物种质资源离体保存过程中遗传稳定性及病毒变化的研究 . 11 1 4 1 植物种质资源离体保存过程中遗传变异的研究 . 11 1 4 2 植物种质资源离体保存过程中病毒变化 的 检测 . 13 1 5 本研究的目的和意义 . 15 第二章 甘蓝 育性 表现 与环境条件的 关系 . 16 2 1 试验材料 . 16 2 2 试验方法 . 16 2 2 1 气象资料的获得 . 17 2 2 2 育性调查 . 17 2 2 3 统计分析 . 17 2 3 结果与分析 . 17 2 3 1 不同材料在各种小气候条件下的育性表达 . 17 2 3 2 气 象因子对甘蓝 . 18 2 4 讨论 . 24 2 4 1 甘蓝 . 24 2 4 2 影响甘蓝 . 24 2 4 3 甘蓝显性 . 25 2 5 本章小结 . 25 三 章 甘蓝 . 27 3 1 试验材料 . 27 3 2 试验方法 . 27 3 2 1 气象资料的获得 . 27 3 2 2 育性调查与自交或测交授粉处理 . 28 3 2 3 杂合不育材料测交后代纯合不育株的检测 . 28 3 3 结 果与分析 . 29 3 3 1 在日光温室小气候条件下 74的不育性表现 . 29 3 3 2 不同的栽培环境条件下 74不育性表现 . 29 3 3 3 杂合不育材料测交后代纯合不育株的检测 . 30 3 4 讨论 . 31 3 5 本章小结 . 32 第 四 章 甘蓝 遗传效应的 分析 . 34 4 1 材料与方法 . 34 4 1 1 利用双列杂交法研究遗传规律 . 34 4 1 2 利用 . 35 4 2 结果与分析 . 35 4 2 1 果与分析 . 35 4 2 2 6个世代联合分析的结果与分析 . 38 4 3 讨论 . 41 4 4 本章小结 . 42 第五 章 甘蓝 . 43 5 1 甘蓝 测 . 43 5 1 1 试验材料与方法 . 43 5 1 2 结果与分析 . 45 5 1 2 1 甘蓝 . 45 5 1 2 2 甘蓝 . 46 5 1 3 讨论 . 49 5 2 甘蓝 毒变化 的分子 检测 . 50 5 2 1 试验材料与方法 . 51 5 2 2 结果与分析 . 52 5 2 3 讨论 . 58 3 本章小结 . 59 第六 章 甘蓝显性 研究 . 61 6 1 试验材料 . 61 6 2 试验方法 . 61 6 2 1 封口材料和方式对甘蓝 . 61 6 2 2 不同接种茎段类型对甘蓝 . 62 6 2 3 改变培养基成分对甘蓝 . 62 6 2 4 蔗糖浓度对甘蓝 . 62 6 2 5 多种因素混合对甘蓝 . 62 6 3 结果与分析 . 62 6 3 1 不同封口材料和方式对甘蓝 . 62 6 3 2 不同接种茎段类型对甘蓝 . 63 6 3 3 改变培养基成分对甘蓝 . 64 6 3 4 蔗糖浓度对甘蓝 . 65 6 3 5 多种因素混合对甘蓝 . 66 6 3 讨论 . 71 6 4 本章小结 . 72 第七 章 提高甘蓝 . 74 7 1 试验材料 . 74 7 2 试验方法 . 74 7 2 1 不同激素类型对繁殖系数的影响 . 74 7 2 2 多种因素混合对快繁的影响 . 74 7 2 3 接种密度对快繁的影响 . 75 7 2 4 不同取材部位对快繁的影响 . 75 7 2 5 不同基因型对快繁的影响 . 75 7 3 结果与分析 . 75 7 3 1 6. 75 7 3 2 多种因素混合对 不同类型甘蓝 繁的影响 . 81 7 3 3 接种密度 对 不同类型甘蓝 繁的影响 . 86 7 3 4 不同取材部位对 不同类型甘蓝 繁的影响 . 86 7 3 5 不同基因型对快繁的影响 . 87 7 4 讨论 . 87 7 5 本章小结 . 89 结论 . 90 参考文献