微生物的培养与应用--基础知识点复习ppt课件

选修1生物技术实践 专题34微生物的培养与应用基础知识点复习 遵化市堡子店中学生物组王海泉 基础自主复习 1 回扣教材自主梳理夯实基础 营养物质 生长繁殖 水 碳源 氮源 无机盐 特殊营养物质 氧气 液体 凝固剂 固体 天然 合成 选择 鉴别 温和 有害的微生物 芽孢 孢子 煮沸消毒法 巴氏消毒法 3 微生物培养的基本技术 1 配制培养基 称量 混合 溶化 调pH 分装 包扎 2 灭菌 加水 加培养基 密封 排冷气 维持压力 取出倒平板 或搁置斜面 二 微生物的利用1 菌种保藏 1 临时保藏 甘油管藏 20 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 复合 C1酶 CX酶和葡萄糖苷酶 纤维二糖 葡萄糖 刚果红染色 透明圈 纤维素粉 选择培养 梯度稀释 鉴别纤维素分解菌 产生透明圈 考点分类透析 2 解读考点拓展升华直面高考 一 微生物的营养要素及培养基配方基本营养要素 各种培养基一般都含有水 碳源 氮源 无机盐 此外还要满足不同微生物生长对pH 特殊营养物质以及氧气的需求 名师提醒 1 微生物最常用的碳源是糖类 尤其是葡萄糖 最常利用的氮源是铵盐 硝酸盐 2 对异养微生物来说 含C H O N的有机化合物既是碳源 又是氮源 能源 二 培养基的种类和用途 名师提醒 1 加入培养基中的凝固剂 如琼脂 一般不能被微生物利用 只起到凝固作用 2 选择培养基一般只生长具有特定特点的微生物 鉴别培养基可以存在其他微生物 而且能鉴别特定的微生物 三 比较消毒和灭菌 四 微生物的纯化培养及菌种的保藏1 原理在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞 使其长成单个的菌落 这个菌落就是一个纯化的细菌菌落 2 纯化分离的方法一 平板划线法 如图 3 纯化分离的方法二 稀释涂布平板法 系列稀释操作 如图 涂布平板操作如图所示 4 比较解读两种分离纯化方法 名师提醒 1 两种接种方法作用不完全相同 平板划线法和涂布平板法都能使细菌纯化 但平板划线法不易分离出单个菌落 不能计数 涂布平板法能使单菌落分离 便于计数 2 涂布平板法的缺点 涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低 这是因为当两个或多个细胞连在一起时 平板上观察到的只是一个菌落 一 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1 筛选菌株的原理微生物的选择培养 在选择培养基的配方中 把尿素作为培养基中的唯一氮源 原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长 2 统计菌落数目的方法 1 显微镜直接计数法 原理 利用特定细菌计数板或血细胞计数板 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量 方法 用计数板计算 缺点 不能区分死菌与活菌 2 间接计数法 活菌计数法 原理 当样品的稀释度足够高时 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌 通过统计平板上的菌落数 就能推测出样品中大约含有多少活菌 操作 a 设置重复组 增强实验的说服力与准确性 b 为了保证结果准确 一般选择菌落数在30 300的平板进行计数 计算公式 每克样品中的菌株数 C V M 其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 mL M代表稀释倍数 3 土壤中纤维素分解菌的筛选流程土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 名师提醒 1 分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基 因为菌落只能在固体培养基上形成 2 平板划线法只适合用于微生物的提纯 不适合进行计数 并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯 3 分离能分解纤维素