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艾肯菌的分离与鉴定 北京医院陈东科 1 苛养菌 fastidiousmicroorganism 是一类生长需要特殊营养物质的细菌 与许多感染性疾病有关 其分离培养较为困难 由这些菌引起的感染发病率一直难以估计 因此 对苛养菌的分离鉴定和药敏试验不仅是临床迫切的需要 同时也是衡量一个细菌室技术水平的重要标志 2 其中 HACEK 细菌群生长缓慢且需CO2环境 所致感染有相关性 此群苛养菌系人类口腔 呼吸道 泌尿生殖道的正常菌群 在一定条件下可引起严重感染 H代表嗜血杆菌属 Haemophilus A代表放线杆菌属 Actinobacillus C代表心杆菌属 Cardiobacterium E代表艾肯菌属 Eikenella K代表金氏菌属 Kingella 3 1 概述 腐蚀艾肯菌 Eikenellacorrodens 系人类口腔及泌尿生殖道的正常菌群 是苛养菌群中的慢速生长菌 在一定条件下可引起严重感染 主要引起细菌性心内膜炎 菌血症和混合性细菌感染 尤其在人咬伤感染标本中多见 4 腐蚀艾肯菌是艾肯菌属中的唯一菌种 属奈瑟菌科 腐蚀艾肯菌是人类粘膜表面固有菌群的一部分 经常从上呼吸道标本中分离出该菌 也可从胃肠道或泌尿生殖道标本中分离到 通常不致病 只形成带菌状态 当机体免疫力下降或粘膜表面破损时 此菌进入周围组织引起感染 5 腐蚀艾肯菌可引起人类的多种感染 如软组织脓肿 中耳炎 鼻窦炎 肺炎 心内膜炎 脑膜炎 败血性关节炎及术后感染等 但该菌常与其他细菌一起引起混合感染 此类感染常发生在头颈部或腹部 在人咬伤感染标本中经常分离到此菌 6 2 镜下形态 取菌落涂片 革兰染色后镜下见到无芽孢的革兰阴性多形态小杆菌 7 8 9 3 生化特性 触酶试验阴性 氧化酶试验阳性 靛基质及尿素酶试验阴性 硝酸盐还原试验阳性 鸟氨酸脱羧酶阳性 葡萄糖O F阴性 10 4 培养特性 腐蚀艾肯菌是兼性厌氧菌 对营养要求较高 初代分离需要氯化血红素 在含3 10 CO2的环境中生长良好 腐蚀艾肯菌不能在MH HTM 营养琼脂及中国兰琼脂平板上生长 有文献报道 再添加了5mg L克林霉素 或5mg L氯洁霉素 的选择性培养基上可显著提高腐蚀艾肯菌的分离率 但要注意应与常规培养基一起使用 以免将其他致病菌丢失 11 5 菌落特征 在5 羊血琼脂平板上经24h培养后 可形成针尖大小的菌落 12 13 培养48h该菌是没有形态特点的 形成光滑 湿润 圆形 半透明的小菌落 不易与其它细菌相区别 14 15 经过72h以上培养后方呈现出该菌的典型菌落形态特征来 即较干燥 扁平 中心凸起 有扩散生长边缘的菌落 16 17 18 典型形态一 经96h培养后 在5 羊血琼脂平板上呈干燥 扁平 圆形 透明 中间突起 边缘呈扩散生长 直径2 4mm的斗笠样菌落 19 20 典型形态二 经96h培养后 在5 羊血琼脂平板上呈扁平 圆形 表面粗燥 半透明 中央凸起 边缘呈扩散生长 直径2 4mm的草帽样菌落 21 22 典型形态三 经96h培养后 在5 羊血琼脂平板上呈光滑 圆形 半透明 中央突起 直径1 3mm的菌落 23 24 形态四 经96h培养后 在5 羊血琼脂平板上呈光滑 圆形 半透明 淡黄色 直径2 3mm的菌落 25 26 培养时间较长时菌落周围培养基可呈草绿色 用棉签抹取菌苔可见黄色 该菌的纯培养物有一种类似发霉的口腔菌群的特殊气味 以上特点应在实际操做中加以注意 27 28 29 6 耐药性 腐蚀艾肯菌对克林霉素天然耐药 但对其他如青霉素类 头孢菌素类 碳青霉烯类 喹诺酮类 四环素类 氨基糖甙类 大环内酯类 氯霉素类 复方磺胺等抗生素多呈高
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