DB37T 3313-2018 肥料中壳聚糖含量测定 分光光度法

ICS71.040.40G20DB37山东省地方标准DB 37/T 33132018肥料中壳聚糖含量测定 分光光度法Determination of Chitosan in Fertilizer by Spectrophotometry2018 - 06 - 12发布2018 - 07 - 12实施山东省质量技术监督局发布DB37/T 33132018前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东化工标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、济南阿波罗甲壳素肥业有限公司、青岛海力源生物科技有限公司、山东洁晶集团股份有限公司、济南高新区阿波罗甲壳素工程技术研究中心、青岛海大生物集团有限公司。本标准主要起草人：刘金凤、焦毅、于晓菲、齐云、王景超、刘鹏飞、赵丽芳、商姗姗、张娟、刘有利、张守福、林成彬、王海华。3肥料中壳聚糖含量测定 分光光度法1 范围本标准规定了含壳聚糖肥料中壳聚糖含量的测定方法。本标准适用于由虾蟹壳为原料加工处理而成的水溶性壳聚糖的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法HG/T 2843 化肥产品 化学分析常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液3 方法原理肥料中壳聚糖经水解后生成氨基葡萄糖，与乙酰丙酮和对二甲氨基苯甲醛生成红色化合物，在525 nm波长处用分光光度计测定。4 试剂或材料本标准中所用试剂、水和溶液的配制，在未注明规格和配制方法时，应符合HG/T 2843的规定。4.1 盐酸：分析纯。4.2 无醛乙醇（或四无乙醇）：分析纯。4.3 氢氧化钠：分析纯。4.4 无水碳酸钠：分析纯。4.5 氢氧化钠溶液：400 g/L。称取分析纯氢氧化钠40 g，加水至100 mL。4.6 碳酸钠溶液：c（1/2Na2CO3）=1.0 mol/L。称取无水碳酸钠2.65 g，加水至50 mL。4.7 乙酰丙酮溶液：取乙酸丙酮3.5 mL，加入碳酸钠溶液（4.6）至50 mL，置冰箱中备用，应于使用前一日配制。4.8 对二甲氨基苯甲醛溶液：称取对二甲氨基苯甲醛0.8 g，加无醛乙醇（4.2）15 mL及盐酸（4.1）15 mL，摇匀。4.9 盐酸氨基葡萄糖标准品：99.9 %。4.10 盐酸氨基葡萄糖标准储备溶液：（盐酸氨基葡萄糖）=1.000 mg/mL。称取105 干燥至恒重的盐酸氨基葡萄糖0.1 g（准确至0.0002 g），置100 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。4.11 盐酸氨基葡萄糖标准溶液：（盐酸氨基葡萄糖）=0.1000 mg/mL。准确移取盐酸氨基葡萄糖标准储备溶液（4.7）10.00 mL，至100 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。5 仪器5.1 分光光度计，带有光程为1 cm的吸收池，可在525 nm处测量。5.2 恒温水浴锅。5.3 恒温干燥箱。5.4 分析天平：感量0.0001 g。6 分析步骤6.1 试样的制备固体样品缩分至约100 g，将其迅速研磨至全部通过0.50 mm孔径试验筛（如样品潮湿，可通过1.00 mm试验筛），混合均匀，置于洁净、干燥容器中；液体样品经多次摇动后，迅速取出约100 mL，置于洁净、干燥容器中。6.2 试样溶液的制备称取含壳聚糖约200 mg的试样（固体或液体）适量（称准至0.0002 g），置于50 mL 烧杯中加水溶解，定量转移到100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，如有必要干过滤，弃去初滤液。准确移取1.00 mL于25 mL具塞刻度试管中，加5 mL浓盐酸溶液，摇匀，盖上试管塞，于100水浴（或能达到同等水解温度的恒温干燥箱）水解2 h，冷却，用氢氧化钠溶液中和至7（用pH试纸检测），加水稀释至刻度，摇匀，作为试样溶液。6.3 标准曲线的绘制移取盐酸氨基葡萄糖标准溶液（4.11）0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL分别置于25 mL具塞刻度试管中，然后再分别加入5.00 mL、4.00 mL、3.00 mL、2.00 mL、1.00 mL、0.00 mL蒸馏水至5.00 mL，各加入乙酰丙酮溶液（4.7）2.00 mL，摇匀，于100水浴中（1 min后加盖）静置25 min，取出，用冰水迅速冷却后，加入无醛乙醇3.00 mL，于60水浴中静置10 min后，再加入对二甲氨基苯甲醛（4.8）2.00 mL，用力振摇后，由60水浴中静置1 h，取出立即用冷水冷却至室温，加蒸馏水定容至25mL，摇匀，配成一系列含盐酸氨基葡萄糖分别为0 mg、0.1 mg、0.2 mg、0.3 mg、0.4 mg、0.5 mg的标准工作溶液。在波长525 nm处，用1 cm比色皿，以试剂空白为参比液，测其吸光值，拟定标准曲线方程。比色过程在30 min内完成。6.4 试样的测定6.4.1 准确移取试样溶液2.00 mL（约含盐酸氨基葡萄糖300 g）置于具塞试管中，按6.3中“用蒸馏水稀释至5.00 mL”及其后面的步骤进行。对于颜色较深的样品，以1 mL盐酸（4.1）代替对二甲氨基苯甲醛溶液作为空白，其他操作同样品。6.4.2 将测得的吸光值带入标准曲线方程，求得氨基葡萄糖的质量。6.5 空白试验除不加试样外，其他步骤同试样溶液。7 分析结果的表达以质量分数表示的壳聚糖（以氨基葡萄糖计）的质量分数：(1)式中：m1 求得的试样盐酸氨基葡萄糖的质量，单位为毫克（mg）；m0 空白盐酸氨基葡萄糖的质量，单位为毫克（mg）；m试样的质量，单位为克（g）；0.8309盐酸氨基葡萄糖换算为氨基葡萄糖的系数。8 允许差平行测定