凝血分析仪.ppt

汉方医疗器械有限公司 血凝分析仪 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 目前国内外各生产厂家生产的半自动血凝仪都是基于凝固法对血液凝固过程进行测量的 血液凝固是一系列凝血因子连锁性酶反应的结果 血液中的凝血因子以无活性酶原形式存在 当某一凝血因子被激活后 可使许多凝血因子按一定的次序先后被激活 彼此之间有复杂的催化作用 被称为 瀑布样学说 这种 瀑布样学说 产生的激变在血液的生物物理特性上表现为 电阻增大 电流法 粘度增强 磁珠法 浊度上升 光学法 由于电流法测量可靠性差 因此为磁珠法和光学法所替代 血凝分析仪原理 科技提供保障 专业引领飞跃 1 光学法 分类 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 光学法 光学法 比浊法 光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能 根据仪器不同的光学测量原理 又可分为散射比浊法和透射比浊法两类 光学法 散射比浊 透射比浊 血凝分析仪原理 散射比浊法 散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的 在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90O直角 当向样品中加入凝血激活剂后 随样品中纤维蛋白凝块的形成过程 样品的散射光强度逐步增加 当样品完全凝固以后 散射光的强度不再变化 通常是把凝固的起始点作为0 凝固终点作为100 把50 作为凝固时间 光探测器接收这一光学的变化 将其转化为电信号 经过放大再被传送到监测器上进行处理 描出凝固曲线 光学法 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 光学法 科技提供保障 专业引领飞跃 透射比浊法 透射比浊法 是根据待测样品在凝固过程中吸光度变化来确定凝固终点的 与散射比浊法不同的是该方法的光路同一般的比色法一样呈直线安排 来自光源的光线经过处理后变成平行光 透过待测样品后照射到光电管变成电信号 经过放大后监测处理 当向样品中加入凝血激活剂后 开始的吸光度非常弱 随着反应管中纤维蛋白凝块的形成 标本吸光度也逐渐增强 当凝块完全形成后 吸光度趋于恒定 血凝仪可以自动描绘吸光度的变化曲线并设定其中某一点对应的时间为凝固时间 血凝分析仪原理 磁珠法 科技提供保障 专业引领飞跃 磁珠法 磁珠法 光电探测 电磁探测 磁珠法是根据血浆凝固过程中粘度的变化来测量凝血功能的 根据仪器对磁珠运动测量原理的不同 又可分为光电探测法和电磁珠探测法 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 磁珠法 光电探测法 在磁珠法中光电探测器的作用与光学法中不同 它只测量血浆凝固过程中磁珠的运动规律 与血浆的浊度无关 在磁珠法中的一对电磁铁安放在测试杯的两端 它们产生恒定的交替磁场使磁珠在测试杯中摆动 在与磁珠摆动的垂直方向安放一对光电接收装置 当磁珠摆幅衰减到50 时确定凝固终点 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 磁珠法 电磁探测法 电磁探测法又可称为双磁路磁珠法 其中一对磁路用于吸引磁珠摆动 另一对磁路利用磁珠摆动过程中对磁力线的切割所产生的电信号 对磁珠摆动幅读度进行监控 当磁珠摆动幅度衰减到50 确定凝固终点 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 底物显色法 生物化学法 凝血仪使用产色底物检测血栓与止血指标的原理是 通过人工合成与天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序并还有特定作用位点的小肽 并将可水解产色的化学基因与作用位点的氨基酸相连 测定时由于凝血因子具有蛋白不解酶的活性 它不仅作用于天然蛋白质肽链 也能作用于人工合成的肽段底物 从而释放出产色基因 使溶液呈色 产生颜色的深浅与凝血因子活性成比例关系 故可进行精确的定量 目前人工合成的多肽底物有几十种 而最常用的是对硝基苯胺 PNA 呈黄色 可用405mm波长进行测定 底物显色法通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的 该方法又可称为生物化学法 检测通道由一个卤素灯为检测光源 波长一般为405nm 探测器与光源呈直线 与比色法相仿 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 免疫学法 在免疫学方法中以纯化的被检物质为抗原 制备相应的抗体 然后用抗原抗体反应对被检物进行定性和定量测定 常用方法有 免疫扩散法 火箭电泳 双向免疫电泳 酶联免疫吸附试验 ELISA法 免疫比浊法 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 比色法与磁珠法比较 光学法凝血测试的优点在于灵敏度高 仪器结构简单 易于自动化 缺点是样品的光学异常 测试杯的光洁度 加样中的气泡等都会成为测量的干扰因素 针对光学法血凝仪遇到有较高初始浊度的样品就无能为力的弱点 不同型号的光学法血凝仪采取了各种不同的措施 例如 有的用本底扣除的百分浊度法 这对中 低初始浊度有补偿作用 而不能解决高浊度样品的测试 又如 有的利用一阶微分的峰值作为凝固终点 但微分处理会引起重复性变差 光电磁珠法 的设计中 在待测样本中加入具有一定浊度的试剂和一粒钢珠 钢珠在磁场的作用下起搅拌作用 样本在凝固过程中产生的纤维蛋白丝不断缠绕于钢珠上 使液体反而逐渐变清 吸光度值逐渐降低 该方法重复性好 监测范围大 可以监测结果超高和低纤维蛋白原的各种异常血浆 从根本上解决溶血 高脂血症或乳糜微粒 浑浊等干扰物对检测的影响 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪原理 比色法与磁珠法比较 测试杯两侧的有一组驱动线圈 它们产生恒定的交替电磁场 使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅振荡运动 凝血激活剂加入后 随着纤维蛋白的产生增多 血浆的粘稠度增加 小钢珠的运动振幅逐渐减弱 仪器根据另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化 当运动幅度衰减到50 时确定凝固终点 光学法血凝仪的试剂用量只有手工测量的一半 而磁珠法的试剂用量只有光学法的一半 这是因为在比浊测定过程中 激发光束必须打在测试杯的中间 所以要有足够的试剂量 钢珠在测试杯的底部运动 因此试剂只要覆盖钢珠运动即可 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪检测项目 凝血因子 定义 一组参与凝血过程的血浆因子 多为蛋白质 人有13种 用罗马数字 编号 这些因子形成酶促级联反应 即前一个因子激活下一个因子 以此类推 最终导致凝血 生理作用 凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分 它的生理作用是 在血管出血时被激活 和血小板粘连在一起并且补塞血管上的漏口 这个过程被称为凝血 它们部分由肝生成 可以为香豆素所抑制 为统一命名 世界卫生组织按其被发现的先后次序用罗马数字编号 有凝血因子 i等 因子XIII以后被发现的凝血因子 经过多年验证 认为对于凝血功能 无决定性的影响 不再列入凝血因子的编号 因子VI事实上是活化的第五因子 已经取消因子VI的命名 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪检测项目 凝血因子 临床应用 PT延长通常认为PT延长代表凝血因子 的活性低于正常或抗凝物质的存在 肝功能轻度受损 PT仍可正常 它仅在肝实质细胞严重损害时才明显延长 仅以PT判断肝病患者凝血功能异常和肝细胞损伤程度是不够的 如同时测定凝血因子的活性 可能更有价值 肝病与凝血因子 大多数研究认为急性肝炎和慢性肝炎轻度患者 凝血因子 活性正常或轻度下降 慢性肝炎中度 重度和肝硬化患者 凝血因子 活性水平明显下降 说明它的降低程度与肝细胞损害程度密切相关 有研究认为异常凝血酶原 protein inducedbyvitaminKabsence PIVKA 可用于原发性肝癌的诊断 部分AFP阴性的原发性肝癌患者PIVKA 阳性 还有研究认为小肝癌患者PIVKA 阳性率高于AFP 它还有助于原发性肝癌的病情变化及疗效判断 在临床上应联合检测AFP与PIVKA 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪检测项目 凝血因子 凝血因子 凝血因子 不仅由肝细胞产生 而且由窦内皮细胞与库普弗细胞产生 其它组织如肾脏也可产生 当肝细胞合成功能减退时 窦内皮细胞及库普弗细胞仍维持凝血因子 的合成 肝脏清除功能减退 内毒素及免疫因素刺激使它的合成与释放增加 范威氏因子 vonwillebrandfactor vWF 主要由肝外合成 肝硬化患者可能由于内毒素血症 血管内皮细胞功能异常 使其释放增加 vWF分解蛋白酶对其分解减少 也使其血浆水平升高 在大多数病毒性肝炎患者凝血因子 活性 vWF均明显升高 但肝病合并DIC者 由于凝血因子大量消耗 使凝血因子 活性水平降低 故我国将凝血因子 活性小于正常50 作为诊断肝病合并DIC的必备条件之一 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪检测项目 凝血四项 血浆凝血酶原时间 PT 凝血酶时间 TT 血浆纤维蛋白原 FIB 部分活化凝血活酶时间 APTT 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪检测项目 凝血四项意义 血浆凝血酶原时间 PT PT是血检前状态 DIC及肝病诊断的重要指标 作为外源性凝血系统的过筛试验 也是临床口服抗凝治疗剂量控制的重要手段 延长见于 a 广泛而严重的肝脏实质性损伤 主要由于凝血酶原及有关各凝血因子生成障碍 b VitK不足 合成 因子均需VitK 当VitK不足时生成减少而致凝血酶原时间延长 亦见于阻塞性黄疸 c DIC 弥散性血管内凝血 因广泛微血管血栓而消耗大量凝血因子 d 新生儿自然出血症 先天性凝血酶原缺乏抗凝治疗 缩短见于 血液呈高凝状态时 为弥散性血管内凝血早期 心梗 脑血栓形成 凝血酶时间 TT 延长见于 肝素或类肝素物质增多 AT 活性增高 纤维蛋白原量和质异常 科技提供保障 专业引领飞跃 血凝分析仪检测项目 凝血四项意义 部分活化凝血活酶时间 APTT 反映血浆中凝血因子 水平 是内源性凝血系统的筛选试验 常用APTT对肝素抗凝治疗进行监控 延长见于 a 凝血因子 缺乏b 凝血因子 及纤维蛋白原减少c 有肝素等抗凝物质存在d 纤维蛋白原降解产物增多e DIC 血浆纤维蛋白原 Fib 增高 烧伤 糖尿病 急性感染 急性肺结核 癌肿 亚急性细菌性心内膜炎 妊娠 肺炎 胆囊炎 心包炎 败血症 肾病综合症 尿毒症 急性心肌梗塞后减少 先天性纤维蛋白原异常 弥散性血管内凝血和严重肝脏疾病 D 二聚体 D Dimer 测定的临床意D 二聚体是交联纤维蛋白的特异性降解产物 只有在血栓形成后才会在血浆中增高 所以它是诊断血栓形成的重要分子标志物 D 二聚体在原发性纤溶症亢进则显著增高 是二者鉴别的重要指标 增高见于深静脉血栓形成 肺栓塞 DIC继发性纤溶亢进等疾病 HF 6000血凝分析仪 科技提供保障 专业引领飞跃 主要特点 检测方法 光电磁珠法结果精确 重复性好抗干扰能力强 消除黄疸 溶血 乳糜 浑浊等