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XXX医院检验科微生物实验室抗酸染色标准操作规程编号：MYCH/ 版本：第1版 第0次修改页数：第 3 页 共 3 页抗酸染色标准操作规程1.目的规范抗酸染色标准操作规程。2.原理 抗酸菌具有耐受酸性介质脱色的生物性状，此类细菌在石碳酸（苯酚）的协同作用下，被复红染色剂着色，能够耐受酸性酒精脱色，显微镜观察时保持紫红色；而其他脱落细胞或标本中的非抗酸菌酸性酒精脱色，可被复染剂亚甲蓝染为蓝色。3.试剂3.1 Kinyoun溶液碱性品红，40克； 乙醇（95%），200毫升；石碳酸，80毫升； 蒸馏水，1000毫升3.2 Gabett溶液亚甲蓝，10克； 无水酒精，300毫升；硫酸，200毫升； 蒸馏水，500毫升4.质控每天用龟分支杆菌ATCC 93326做阳性对照，大肠埃希菌 ATCC 25922做阴性对照。5.操作步骤5.1 初染 涂片上滴加石碳酸复红液，用火焰加热至产生蒸汽，约5分钟水洗。5.2 脱色 第二液脱色约1分钟，轻轻摇匀玻片，无红色脱出或略呈粉红色时为止，水洗。5.3 复染 第三液复染30秒，水洗。自然干燥后镜检。6.结果判断抗酸杆菌呈红色。7.注意事项7.1 每张破片只能涂一份标本，禁止将2份或2份以上的标本涂抹在同一张载玻片上。7.2 为防止交叉感染，标本应先高压灭菌后再涂片染色。7.3 在涂抹痰标本时，严禁对载玻片进行加热。8.临床意义只针对用于结核病、麻风病等的细菌检查，初步诊断。9.安全防腐措施9.1 操作人员要戴口罩、手套和穿隔离衣。9.2 涂片制备 痰标本要高压灭菌或者在标本中加入等量0.5%“84”消毒液（含有效氯2500mg/L）后涂片。气管刷检送检的玻片，紫外灯下照射30分钟进行染色镜检。或者对行抗酸染色的痰标本（因使用的容器原因不能高压灭菌）。9.3 镜检后的玻片均浸泡在含有效氯1000 mg/L的消毒液中，高压灭菌后处理。9.4 所有标本、污染物丢弃之前，都需经高压灭菌、燃烧或浸泡杀菌剂中。参考文献1 周庭银编著。临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，20072 叶应妩，王 三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大学出版社，2006 编写人签名复审人签名审批人签名生效日期姓 名：XX编写日期:201
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