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文档简介

实验设计专题研究系列之 二十一 同位素标记法的实验应用 实验专项1 概述用同位素标记化合物 让它们一起运动 迁移 再用探测仪器进行追踪 可以明白化学反应的详细过程的方法 2 方法应用用来研究细胞内的元素或化合物的来源 组成 分布和去向等 进而了解细胞的结构和功能 化学物质的变化 反应机理等 3 应用分析 1 标记某元素 追踪其转移途径 如用18o标记h218o 光合作用只产生18o2 再用18o标记c18o2 光合作用只产生o2 证明光合作用产生的氧气中的氧原子全部来自于h2o 而不是来自co2 2 标记特征元素 探究化合物的作用 如t2噬菌体侵染细菌的实验中 用32p标记噬菌体的dna 大肠杆菌内发现放射性物质 35s标记蛋白质 大肠杆菌内未发现放射性物质 证明了dna是噬菌体的遗传物质 3 标记特征化合物 探究详细生理过程 研究生物学原理 如用3h标记胸腺嘧啶脱氧核苷酸 研究有丝分裂过程中染色体的变化规律 用15n标记dna 证明了dna复制的特点是半保留复制 典例示范 2010 北京理综 科学家以大肠杆菌为实验对象 运用同位素示踪技术及密度梯度离心方法进行了dna复制方式的探索实验 实验内容及结果见下表 请分析并回答 1 要得到dna中的n全部被放射性标记的大肠杆菌b 必须经过 代培养 且培养液中的 是唯一氮源 2 综合分析本实验的dna离心结果 第 组结果对得到结论起到了关键作用 但需把它与第 组和第 组的结果进行比较 才能说明dna分子的复制方式是 3 分析讨论 若子 代dna的离心结果为 轻 和 重 两条密度带 则 重带 dna来自于 据此可判断dna分子的复制方式不是 复制 若将子 代dna双链分开后再离心 其结果 选填 能 或 不能 判断dna的复制方式 若在同等条件下将子 代继续培养 子n代dna离心的结果是 密度带的数量和位置 放射性强度发生变化的是 带 若某次实验的结果中 子 代dna的 中带 比以往实验结果的 中带 略宽 可能的原因是新合成dna单链中的n尚有少部分为 思路分析 1 dna是半保留复制 若要dna中的n全部为15n 须在15n培养基中多代培养 2 第3组中双链为15n的dna b 在14n原料中复制1次 子代dna中一条链为14n 一条链为15n 说明dna为半保留复制 3 代dna离心后仅为中带 说明为半保留复制 否则不能说明 若将 代dna双链分开后离心 会出现轻带和重带 不能判断dna的复制方式 若将子 代继续培养 得到的子代dna仍是14n 15n 14n 14n 密度带的数量和位置不变 双链都是14n的dna分子 14n 14n 增多 14n 15ndna分子数不变 若子 代dna 中带 略宽 可能是新合成的链中有少部分15n所致 答案 1 多15n 15nh4cl 2 312半保留复制 3 b半保留 不能 没有变化轻 15n 实战演练 2010 吉林4月质检 结合遗传物质的相关实验 回答下列问题 1 艾弗里及其同事进行肺炎双球菌转化实验的一部分图解 该实验成功的最关键的实验设计思路是 2 上述实验证明了 3 后来 赫尔希和蔡斯用 方法 进一步表明dna才是真正的遗传物质 实验包括4个步骤 噬菌体与大肠杆菌混合培养 35s和32p分别标记噬菌体 放射性检测 离心分离 该实验步骤的正确顺序是 用数字表示 4 用被32p标记的噬菌体去侵染未被标记的大肠杆菌 离心后 发现放射性物质存在 上清液或沉淀物 中 5 噬菌体的dna连续复制n次后 含亲代噬菌体的dna链的子代噬菌体个体应占总数的 6 在蛋白质合成过程中 遗传信息的流动途径表达式是 解析 1 分离并提纯s型细菌的dna 蛋白质 多糖等物质才能单独地观察各自的作用 2 dna是遗传物质 是肺炎双球菌的转化因子 3 噬菌体侵染细菌是用了32p 35s同位素分别标记dna和蛋白质 去观察各自的作用 4 32p标

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