分光光度计的校正和检验.ppt

分光光度计的矫正和检验 madeby15340 721可见分光光度计 使用方法 721型分光光度计其波长范围360 800nm 色散元件为三角棱形 1 检查仪器各调节钮的起始位置是否正确 接通电源开关 打开样品室暗箱盖 使电表指针处于 0 位 预热20min后 再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档 用调 0 电位器调整电表为T 0 2 盖上样品室盖使光电管受光 推动试样架拉手 使参比溶液池 溶液装入4 5高度 置第一格 置于光路上 调节100 透射比调节器 使电表指针指T 100 3 重复进行打开样品室盖 调0 盖上样品室盖 调透射比为100 的操作至仪器稳定 4 盖上样品室盖 推动试样架拉手 使样品溶液池置于光路上 读出吸光度值 读数后应立即打开样品室盖 5 测量完毕 取出比色皿 洗净后倒置于滤纸上晾干 各旋钮置于原来位置 电源开关置于 关 拔下电源插头 6 放大器各档的灵敏度为 l 1倍 2 10倍 3 20倍 灵敏度依次增大 由于单色光波长不同时 光能量不同 需选不同的灵敏度档 选择原则是在能使参比溶液调到T 100 处时 尽量使用灵敏度较低的档 以提高仪器的稳定性 改变灵敏度档后 应重新调 0 和 100 4 盖上样品室盖 推动试样架拉手 使样品溶液池置于光路上 读出吸光度值 读数后应立即打开样品室盖 5 测量完毕 取出比色皿 洗净后倒置于滤纸上晾干 各旋钮置于原来位置 电源开关置于 关 拔下电源插头 6 放大器各档的灵敏度为 l 1倍 2 10倍 3 20倍 灵敏度依次增大 由于单色光波长不同时 光能量不同 需选不同的灵敏度档 选择原则是在能使参比溶液调到T 100 处时 尽量使用灵敏度较低的档 以提高仪器的稳定性 改变灵敏度档后 应重新调 0 和 100 1 波长校正 分光光度计常需要波长校正 检查仪器的波长刻度与实际波长是否能较好的保持一致 以减小误差 稀土玻璃 镨钕玻璃 钬玻璃 在相当宽的波长范围内特征吸收峰 如通常采用镨钕玻璃在573nm和586nm的双峰以及741nm和808nm等处的吸收峰来对分光光度计的波长刻度进行校正 一般情况下 可见分光光度计的波长误差允许在 3nm范围内 利用某些本身有较强特征谱线的光源也可对波长进行校正 如氘灯和汞灯广泛用于紫外线分光光度计的校正 此外 苯蒸汽在紫外区有很强的特征吸收峰 用它来校正波长也很方便 2 吸光度校正 在实际工作中 有时需要对仪器的吸光度标准进行检查和校正 校正的方法是将0 0303g干燥衡重的K2Cr2O7溶于1L0 05mol L 1的H2SO4溶液中 用1cm吸收池 在25 C测定不同波长下的吸光度 表3 6重铬酸钾溶液吸光度 3 散杂光的检验 由于仪器光源表面对光的反射和散射 单色光中有一定的杂散光 杂散光可影响摩尔吸光系数与吸光度之间的直线关系 在仪器的光路系统中 往往采用一定的措施避免杂散光的影响 如在721型分光光度计中就装有保护玻璃片 以减少杂散光的影响 杂散光的检验是在较短波长下 测定某选定溶液的透射比 药典规定用一定浓度的NaI或NaNO3溶液检查 其投射比应小于规定值 4 稳定性的检验 稳定性通常检验如下 将仪器预热后 精确调节投射比为0 在规定时间内观察其变