凝聚胺法在交叉配血试验结果的分析.doc

凝聚胺法在交叉配血试验结果的分析【摘要】对405名受血者标本与其同型献血员标本做交叉配血，谱细胞反应分别用抗人球蛋法和凝聚胺法测定。结果分析得出凝聚胺法具有操作简便、快速、敏感性强和结果清晰等优点,是目前基层医院急诊配血时交叉配血试验比较理想的方法。【关键词】凝聚胺检测技术 交叉配血中图分类号：r446.1 文献标识码：b 文章编号：1005-0515（2012）1-344-01交叉配血试验是临床上确保安全有效输血的重要手段。传统的盐水配血法虽然简便快捷，但只能检出不现相配合的完全抗体，而不能发现不完全抗体。抗人球蛋白法虽然能检出不完全抗体，但实验操作步骤繁琐、耗时长、易耽误危重病人的抢救时间。微柱凝胶技术融合了分子筛技术、离心技术和免疫反应技术，具有标本用量少，灵敏度高，特异性强，操作简便，结果可长期保持优点。凝聚胺法具有操作简便、快速、敏感性强和结果清晰等优点,是目前基层医院交叉配血理想的方法。需要注意的是出现配血不合的标本最好微柱凝胶法和凝聚胺法联合应用。现将凝聚胺检测技术在本血站应用的结果作一阐述与分析。1 材料与方法1.1 试剂polybrene试剂(包括低离子介质缓冲液、凝聚胺溶液和重新悬浮液) 珠海贝索生物技术有限公司产品；抗人球蛋白试剂、谱细胞由广州市血液中心提供。1.2 标本2005年至2010年大连市中心血站由各医院提供送检的标本共405例受血者标本与其同型献血员标本做交叉配血。1.3 方法凝聚胺检测技术：在主侧管内加受检血清2滴和献血员2%红细胞悬液2滴,次侧管加入献血员血清2滴和受检者2%红细胞悬液2滴；各管分别加入低离子介质0.6 ml,混匀,于室温下静置1 min；各管加入凝聚胺2滴,混匀,3 500 r/min离心15 s,移去上清液,观察管底红细胞有无凝块(如无凝块必须重做)；加重新悬浮液2滴,轻轻摇动观察凝块是否散开,若为凝聚胺引起的非免疫性凝集在1 min内即自然散开，若是特异性抗原抗体引起的凝集即不会散开,必要时可在显微镜下观察；常规法按全国临床检验操作规程第三版操作。2 结果检测中共发现29例冷凝集引起的假阳性。11例纤维蛋白网罗红细胞导致假阳性，4例自身抗体，3例同种抗体，2例在凝聚胺交叉配血中红细胞不出现非特异性可逆凝集。2.1 检测共发现29例冷凝集引起的假阳性受血者血清中含有冷凝集素，效价为4256，间接抗人球蛋白试验阳性。解决此类假阳性的方法可在最后将试管置入37 水浴中，轻轻摇晃试管使冷凝集散去，并在30 s内观察结果。2.2 检测共发现11例纤维蛋白网罗红细胞导致假阳性假阳性的凝集结果很容易与抗原抗体反应的凝集区分。为慎重起见，只须将标本置于37 20 min30 min，待血清自然析出，再重新做实验。2.3 检测共发现4例自身抗体。在凝聚胺法交叉配血试验中有2例主、次管均凝集，直接、间接抗人球蛋白试验阳性。2例次侧管凝集，直接抗人球蛋白试验阳性。证实为自身抗体。2.4 检测共发现3例同种抗体其中2例在交叉配血的主侧管凝集，后经谱细胞实验证实标本血清中分别含有抗e和抗c。凝聚胺法测得效价分别为14和116，抗人球蛋法分别为14和18。发现1例在新生儿红细胞放散液中发现抗体，证实为igg抗a。凝聚胺法测得效价为1128，抗人球蛋法为1128。2.5 检测共发现2例在凝聚胺交叉配血中红细胞不出现非特异性可逆凝集，考虑为药物干扰影响。解决方法是在凝聚胺法的第三步倒掉上清液，再加凝聚胺溶液离心,若出现非特异性可逆凝集便已消除干扰,若不行则要重新抽取不受药物干扰的标本。3 讨论以上结果说明凝聚胺交叉配血既可以检出完全抗体,又可以检出有临床意义的不完全抗体,有效地避免了迟发性溶血性输血反应的发生,给临床治疗诊断提供了有效的科学依据。虽然存在冷凝集、纤维蛋白和一些药物的干扰，只要在配血过程中多留心、多分析，这些问题还是比较容易解决的。在凝聚胺交叉配血中，加入的低离子介质缓冲液、凝聚胺溶液在离心后弃去对标本有稀释和洗涤作用，可使结果明显清晰，而无盐水法受血浆物质干扰的问题。上面解决药物的干扰也是基于此原理。传统的交叉配血法有盐水介质法、酶法、抗人球蛋白法。盐水介质法虽然简便快速,但不能发现不完全抗体,单用该法配血有危险性,需要增加酶法或抗人球蛋白法,才能避免不完全抗体引起的配血不合,达到安全输血。但酶法或抗人球蛋白法的实验步骤繁琐、试验反应时间长,一般需要20 min1 h,往往会耽误抢救治疗工作。国内一些大医院新近引进的微柱凝胶试验交叉配血同样存在配血时间长的问题。笔者从实验中得出，用凝聚胺法配一标本平均费时6 min，若同时作多份标本，平均费时则更短,满足临床急诊输血的需要。综上所述，凝聚胺法用于血型血清学检查的各项实验中，结果是令人满意的。它成功地降低了输血反应，节约了实验时间，其操作方法简便，快速，结果清晰,是目前基层医院交叉配血比较理想的方法。但有可能导致抗体的漏检，适用急诊配血。在出现配血不合的标本时最好凝聚胺法和微柱凝胶法联合应用。参考文献1胡建华，万向农，影响凝聚胺法交叉配血因素浅析j实验与检验医学，2008,26（6），689.2马利平,张建国.凝聚胺试验在交叉配血中的应用j.济宁医学院学报，2005,28(2):62.3姜华,李晓艳.影响凝聚胺交叉配血结果的4种药物j.实用医药杂志，2004,21(1):26.4