生物制药工艺学习题 第五章 沉淀法.doc

第六章 吸附分离法（习题）一、 填空1、吸附剂按其化学结构可分为两大类：一类是有机吸附剂，如 、 、 等；另一类是无机吸附剂，如 、 、 、 等。2、常用的吸附剂有 、 和 等。3、大孔网状聚合物吸附剂是在树脂聚合时加入 致孔剂，待网格骨架固化和链结构单元形成后，用溶剂萃取或蒸馏水洗将致孔剂去掉，形成不受外界环境条件影响的 ，其孔径远大于24nm，可达 ，故称“大孔”。4、大孔网状聚合物吸附剂按骨架的极性强弱，可分为 、 、 和 吸附剂四类。二、 选择题1、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱 （ ）A.水 B.高盐 C.低pH D. 高pH2、“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质 （ ）A.极性溶剂 B.非极性溶剂 C.水 D.溶剂3、“类似物容易吸附类似物”的原则, 一般非极性吸附剂适宜于从下列何种溶剂中吸附非极性物质。 （ ）A.极性溶剂 B.非极性溶剂 C.三氯甲烷 D.溶剂4、下列属于无机吸附剂的是： （ ） A.白陶土 B.活性炭 C.淀粉 D.纤维素 5、活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？ （ ） A.水 B.甲醇 C.乙醇 D.三氯甲烷 6、 关于大孔树脂洗脱条件的说法，错误的是： （ ） A .最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸。 B. 对弱酸性物质可用碱来解吸。 C. 对弱碱性物质可用酸来解吸。D.如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时，则常常仅用水洗就能解吸下来。三、 名词解释1、 吸附法(adsorption method)： 2、 大网格高聚物吸附剂（macroreticular adsorbent）： 四、 问答题1、 简述吸附法的定义和特点。2、 影响吸附的因素有哪些？第五章 沉淀法（答案）一.填空1.固相析出法主要包括盐析法，有机溶剂沉淀法，等电点沉淀法，结晶法及其它多种沉淀方法等。2.按照一般的习惯，析出物为晶体时称为结晶法，析出物为无定形固体则称为沉淀法。3.影响盐析的因素有：无机盐的种类、溶质（蛋白质等）种类的影响、蛋白质浓度的影响、温度的影响、pH的影响4. 结晶包括三个过程：(1) 形成过饱和溶液；(2) 晶核形成 ；(3) 晶体生长。5. 影晶体大小的主要因素，归纳起来与过饱和度、温度、搅拌速度、晶种等直接有关。6. 晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度等3个方面二选择1、 在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作 ( A )AKS盐析法 B盐析法 C重复盐析法 D分部盐析法2、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度 （ C ）A增大 B. 减小 C. 先增大，后减小 D. 先减小，后增大3、盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是 （ B ）A.分辨率高 B.变性作用小 C.杂质易除 D.沉淀易分离4、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度 （ C ）A增大 B. 减小 C. 先增大，后减小 D. 先减小，后增大5、盐析常数Ks是生物大分子的特征常数，它与下列哪种因素关系密切。 （ B ）A盐浓度 B. 盐种类 C. 溶质浓度 D介质pH6、 将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为 （ A）A亲和沉淀 B聚合物沉淀 C金属离子沉淀 D盐析沉淀7、 将四环素粗品溶于pH2的水中，用氨水调pH4.54.6，2830保温，即有四环素沉淀结晶析出 。此沉淀方法称为 （B ）A有机溶剂结晶法 B等电点法 C透析结晶法 D盐析结晶法8、影响体大小的主要因素与下列哪些因素无关 ( D )A过饱和度 B温度 C搅拌速度 D饱和度9、下列沉淀试剂不属于表面活性剂的是 （ D）ACTAB BCPC CSDS DPEG三 名词解释：1. 盐析法：是利用各种生物分子在浓盐溶液中溶解度的差异，通过向溶液中引入一定数量的中性盐，使目的物或杂蛋白以沉淀析出，达到纯化目的的方法。2. Ks盐析：在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作Ks盐析法。Ks盐析法多用于提取液的前期分离工作。3盐析：在一定离子强度下仅改变pH和温度进行盐析，称作盐析法。在分离的后期阶段，为了求得较好的分辨率，或者为了达到结晶的目的，有时应用盐析法。盐析法由于溶质溶解度变化缓慢且变化幅度小，沉淀分辨率比KS盐析法好。4亲和沉淀: 利用亲和反应原理，将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物（亲和沉淀剂），该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来。四 问答1.什么是盐析作用？盐析的原理是什么？答：盐析作用：向蛋白质溶液中逐渐加入中性盐，在高盐浓度时，蛋白质溶解度随之减小，发生了盐析作用。产生盐析作用的一个原因是由于盐离子与蛋白质表面具相反电性的离子基团结合，形成离子对，因此盐离子部分中和了蛋白质的电性，使蛋白质分子之间电排斥作用减弱而能相互靠拢，聚集起来。盐析作用的另一个原因是由于中性盐的亲水性比蛋白质大，盐离子在水中发生水化而使蛋白质脱去了水化膜，暴露出疏水区域，由于疏水区域的相互作用，使其沉淀。2.如何选择盐析所用中性盐？（1）盐析作用要强。一般来说多价阴离子的盐析作用强，有时多价阳离子反而使盐析作用降低。（2）盐析用盐要有足够大的溶解度，且溶解度受温度影响应尽可能小。这样便于获得高浓度盐溶液，有利于操作，尤其是在较低温度下的操作，不致造成盐结晶析出，影响盐析效果。（3）盐析用盐在生物学上是惰性的，不致影响蛋白质等生物分子的活性，最好不引入给分离或测定带来麻烦的杂质。（4）来源丰富、经济。3.有机溶剂沉淀的原理是什么？答：亲水性有机溶剂加入溶液后降低了介质的介电常数，使溶质分子之间的静电引力增加，聚集形成沉淀；水溶性有机溶剂本身的水