抗核抗体测定.ppt

抗核抗体的测定 antinuclearantibody ANA 又称抗核酸抗原抗体 是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白 DNP DNA 可提取的核抗原 ENA 和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称 能与所有动物的细胞核发生反应 主要存在于血清中 也可存在于胸水 关节滑膜液和尿液中 在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质 激发机体产生许多抗不同核成分的抗体 抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程度的阳性率 如系统性红斑狼疮 SLE 95 100 类风湿性关节炎 RA 10 20 混合性结缔组织病 MCTD 80 100 干燥综合症 SS 10 40 全身性硬皮病 85 90 狼疮性肝炎 95 100 原发性胆汁性肝硬化 95 100 等 ANA主要是IgG 也有IgM IgA IgD和IgE ANA无器官特异性和种属特异性 ANA主要存在于血清中 将检出ANA作为AID存在的依据 抗DNA抗体 抗dsDNA 抗nDNA 抗ssDNA 抗dDNA等抗组蛋白抗体 AHA 抗H1 抗H2A 抗H2B 抗H3 抗H4抗体等抗非组蛋白抗体 抗nRNP 抗U1RNP 抗Scl 70 抗SSA 抗Sm 抗SSB 抗Jo 1 抗Rib抗体 AnuA 抗DNP 抗D E多肽抗体 抗DM53抗体抗RANA抗体 抗着丝点 抗Ku抗体等抗核仁抗体 抗PM Scl抗体 抗Th To抗体 抗U3 RNP 抗4 6 S RNA抗体等 一 ANA的类型和临床意义 ANA谱 抗天然DNA nativeDNA nDNA 抗体 又称抗双链DNA doublestrandedDNA dsDNA 抗体 抗变性DNA denaturedDNA dDNA 抗体 又称抗单链DNA singlestrandedDNA ssDNA 抗体 对SLE有高特异性 SLE诊断标准之一 缓解期降低 70 90 SLE活动期增高 药物疗效 抗dsDNA抗体 抗DNA抗体 抗组蛋白抗体 anti histonicantibody AHA 由H1 H2A H2B H3和H4五个亚单位 各自都有特异性抗体 AHA 检出百分率 抗dsDNA 50 70 90 100 药物诱导性狼疮只能检出此 SLE AHA AHA 抗组蛋白抗体 可提取性核抗原 extractablenuclearantigen ENA 是盐水或磷酸盐缓冲液可提取性核抗原的总称 是非组蛋白的核蛋白 属酸性核蛋白抗原 由许多小分子量的RNA和多肽组成 抗ENA抗体 有特异诊断价值的有以下七种 抗nRNP nuclearRNP nRNP 抗体 抗Sm抗体 抗SSA抗体 抗SSB抗体 抗Scl 70抗体 抗Jo 1抗体 抗核糖体抗体 抗Sm抗体 SLE标记性抗体 20 40 抗U1 RNP抗体 MCTD95 100 高滴度 抗SSA抗体 SS40 95 其它CTD 抗SSB抗体 SS40 90 其它CTD 抗Scl 70抗体 PSS25 70 标记性抗体 抗Jo 1抗体 PM DM25 标记性抗体 抗rRNP Rib 抗体 SLE特异性抗体 10 20 抗DNP抗体 抗核蛋白抗体 核蛋白 DNP 抗原由DNA和蛋白质组成 DNP抗原有不溶性和可溶性两种 可分别产生相应的抗体 检出百分率 抗DNP 20 40 60 80 SLE非活动期 SLE活动期 抗不溶性DNP抗体 抗DNP 抗DNP 100 RA滑膜液中 抗DNP 抗可溶性DNP抗体 抗DNP抗体 抗核小体抗体 anti nucleosomeantibody AnuA 是细胞核染色质的基本单位 细胞凋亡而致核小体大量蓄积 诱导B细胞产生的AnuA是SLE特异性的标志抗体 抗dsDNA抗体 抗核小体抗体 抗dsDNA和抗Sm阴性的SLE阳性率为60 80 特异性 97 抗核小体抗体 二 ANA的检测方法 将患者血清先进行稀释 可以做定量试验 在1 80稀释仍呈阳性时 对SLE的诊断有较大的参考价值 形成胞核基质 ANA 抗人Ig FITC 1 荧光免疫法 间接法 第一步 荧光素标记抗抗体第二步 已知Ag固定 待测Ab 洗涤再加入抗Ab 洗涤 镜检 特点 1 制备一种荧光抗体 可检测多种Ag或Ab 2 既可检测Ag 又可检测Ab 3 灵敏度高 但易产生非特异性荧