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金黄色葡萄球菌的生物学特性及鉴定要点 1 形态与染色 2 培养特性 金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色 周围有明显的 溶血环 部分菌落也可呈灰白色或柠檬色 在高盐甘露醇平板上呈淡黄色 革兰氏阳性 成单 双 短链接或不规则葡萄状排列 3 生化反应 金黄色葡萄球菌 触酶 DNA酶 血浆凝固酶 分解葡萄糖 麦芽糖 蔗糖和甘露醇 4 鉴别要点 4 1金黄葡萄球菌与表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌的鉴别 4 2葡萄球菌与微球菌的鉴别 4 3葡萄球菌与链球菌的鉴别 4 4主要凝固酶阳性葡萄球菌鉴别 5 葡萄球菌常规鉴定流程 革兰氏阳性球菌 触酶 葡萄糖发酵 链球菌科 血浆凝固酶 微球菌 金黄色葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌 6 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测 MRSA 临床和试验标准化研究所 CLSI 简称NCCLS 对MRSA的判定标准作了修改 取消用苯唑西林对MRSA的检测 现用头孢酊检测 判定标准如下 MRSA 头孢酊 20mm为敏感 19mm为耐药 用K B法 MRSA对多种光谱强效抗菌药物呈多重耐药性 MRSA表明对所有青霉素 头孢霉素 碳青霉烯类及 内酰胺药 内酰胺酶抑制剂类抗生素耐药 一旦被MRSA感染 对临床治疗是非常棘手的问题 已引起人们的高度重视 7 血浆凝固酶试验操作步骤 7 1玻片法 取人或兔血浆喝盐水各滴分别置清法载玻片上 挑取待检验菌菌落分别与血浆及盐水混合 如血浆中有明显的颗粒出现而盐水中无自凝现象的为阳性 7 2试管法 取试管2支 分别加入0 5ML血浆 经生理盐水1 4稀释 挑取菌落数个加入测定管充分研磨混匀 用已知阳性菌加入对照管 37 水浴3 4小时 血浆凝固为阳性 8 葡萄糖O F试管操作步骤 从平板上挑取少量细菌 同时穿刺接种于2支O F试管中 其中1支滴加液体石蜡 覆盖液面高度为0 3 0 5CM 经37 培养48小时后 观察结果 仅开放管产能为氧化反应 O 两管都产能为发酵反应 F 两管均不变为产碱性 9 新生霉素敏感试验操作步骤 将细菌制成0 5麦氏单位的菌液 用棉拭子沾取菌液密封涂布于普通琼脂平板表面或M H琼脂平板 待菌液稍干 以无菌镊子搁置于含5ug 片的新生霉素纸片 35 37 孵育16 20小时观察结果 抑菌圈直径 16mm为敏感 S 抑菌圈直径 16mm为耐药 R 10 甘露醇发酵试验操作步骤 将纯培养的细菌用接种针接种至甘露醇生化管中 置35 37 孵
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