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文档简介
红曲菌的保存及红曲的制备斜面菌种培养1.PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)称取200g马铃薯,洗净去皮切碎,加水1000ml煮沸0.5h,纱布过滤,再加15g葡萄糖和15-20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5-10ml(视试管大小而定),121灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。2.麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备:干麦芽首先进行粉碎(不能太粗,也不必太细。太粗影响糖化效率,过细影响过滤速度),按麦芽重量的34倍加水,搅拌均匀后,37oC左右浸泡1小时,然后缓缓加温至5563(在升温过程中应不断搅拌使温度均匀),保温46小时(用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时),糖化结束。在糖化过程中,应每小时搅拌一次。取过滤后的清液,加1.8%琼脂,分装试管,每试管约5-10ml(视试管大小而定),121灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。红曲的制备1、 菌种培养1) 在250ml三角瓶中装入50g大米,洗净后浸泡2h,将水倒出并沥净多余的水,0.08MPa压力下灭菌20min,冷却后用无菌竹筷将米团轻轻打散,接斜面菌种,于28培养,待米粒开始发红后每天摇动三角瓶,将瓶壁上的水珠滚到米上,如此培养12天。2) 扩大培养菌种用500ml三角瓶,每瓶装大米100g,洗净后浸2h,将水倒出并沥净多余的水,0.08MPa压力下灭菌20min,冷却后接种1)中的种子(研碎后加0.3%醋酸液ml制成悬浮液)。每100g灭菌后的米接种子液10ml,用无菌竹筷搅拌均匀,于26下培养14天,培养期间每天需摇动三角瓶,将瓶壁上的水珠滚到米上。3) 将扩大培养种子用3%醋酸液制备成悬浮液。2、 泡米蒸饭例如250kg米浸泡5h,洗净后置于箩筐中沥净多余水分,入甑蒸饭10min,以米透心为度。摊平降温至35到40,拌种,250kg米饭需要300g三角瓶培养的种子,加3%醋酸溶液12.5L,混合均匀后为拌饭的种子,拌种时应将饭团弄碎拌均匀。3、 装入麻袋,置于通风池上保温,24h后米粒开始有红斑,打开麻袋。将米饭摊开,待红斑布满所有饭粒,将其平摊于尼龙布上。4、 如温度上升至45时,则打开鼓风机通风降温,保持温度在35405、 待全部米粒都呈深红色,约3天洗曲一次,所谓洗曲,就是向去上喷水
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