（外科学专业论文）手术切除联合alapdt治疗大鼠9l胶质瘤的实验研究.pdf

谢。 b y 18 0 1911 目录 中文摘要1 英文摘要一5 英文缩写1 1 研究论文手术切除联合a l a p d t 治疗大鼠9 l 胶质瘤的实验研究 引言1 2 第一部分9 l f i s c h e r3 4 4 大鼠原位脑胶质瘤模型及大鼠颅内脑胶质瘤 显微切除术模型的建立 前言1 4 另i j 舌 材料与方法15 结果2 1 附图”2 3 。 讨论3 0 小结3 3 参考文献3 4 第二部分a l a p d t 治疗f i s c h e r3 4 4 大鼠9 l 胶质瘤的亚急性反应研究 前言3 7 刚吾。 材料与方法3 8 结果5 0 附图5 2 附表5 7 讨论5 8 硝、结6 2 参考文献6 2 第三部分手术切除联合a l a p d t 治疗f i s c h e r3 4 4 大鼠颅内9 l 胶质瘤 的实验研究 前言6 6刖舌。o o 材料与方法6 6 结果7 3 附图- 7 5 附表7 9 讨论8 0 小结8 3 参考文献8 3 结论8 6 综述8 7 j 致谢- 10 3 个人简历”1 0 4 中文摘要 手术切除联合a l a p o t 治疗大鼠9 l 胶质瘤的实验研究 摘要 胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤，占全部颅内肿瘤的4 0 ，- - 5 0 ， 其中恶性胶质瘤占脑胶质瘤的6 0 。目前对于脑胶质瘤的治疗多为临床手 术，辅以术后的放疗、化疗。但脑胶质瘤细胞虽不向远处转移，却向正常 脑组织浸润性生长，与正常组织分界不清，故此手术很难完全切除。残存 的肿瘤细胞会造成术后肿瘤再次复发，从而严重影响患者的生存质量和生 存期。据统计目前恶性胶质瘤患者中位生存期仅为9 12 个月。虽然术后 的放疗、化疗可以有效地杀伤部分残存的肿瘤细胞，但同时亦会损伤正常 脑组织，并会出现严重的全身不良反应，治疗效果不甚满意。因此，积极 探索有效地治疗方法，寻求更佳的治疗方案及有效地控制术后脑胶质瘤的 复发将成为提高脑胶质瘤治疗效果的关键。 光动力学疗法( p d t ) 是一种新兴的治疗方法，其原理是利用光敏剂 可特异性的聚集于肿瘤组织内并可被特定波长的光所激活，从而产生一系 列有细胞毒性的活性分子，直接诱导肿瘤细胞坏死和凋亡，从而达到治疗 的目的。目前光动力学疗法已在多种肿瘤的实验研究与临床治疗当中应 用，这些实验和探索已初步表明p d t 是一种有效的肿瘤局部治疗手段。 目前，关于p d t 治疗脑瘤的相关报道并不多见，初步的临床应用表明 p d t 治疗恶性脑胶质瘤，可使肿瘤组织发生坏死，从而延长恶性胶质瘤患 者的生存时间，但多数患者最终还会因肿瘤复发而死亡。在动物实验的研 究水平上，迄今为止，有关p d t 治疗脑胶质瘤的研究多数是探讨p d t 治疗 后肿瘤及周围脑组织的急性反应( 一般是在治疗后的3 天之内) ，在此期间， p d t 可使肿瘤组织发生坏死和细胞凋亡。但p d t 对胶质瘤和正常脑组织的 影响远不止于此，在p d t 治疗后的亚急性期，肿瘤及周围脑组织会出现何 种反应，对此人们对却知之甚少，因此在评价p d t 在脑胶质瘤中的治疗作 用方面还有一些不足。 本研究通过建立9 l f i s c h e r3 4 4 大鼠原位脑胶质瘤模型，利用新型的 光敏n 5 氨基乙酰丙酸( a l a ) ，观察a l a p d t 的治疗效果并探讨其治病 机理；另外，我们还将研究在p d t 照射后的亚急性期，胶质瘤和正常脑组 中文摘要 织对p d t 的反应，为正确的评价p d t 在脑胶质瘤中的治疗作用提供完整的 理论依据；本研究还将积极探究有效地脑胶质瘤治疗方案，即利用显微外 科手术辅以术后a l a p d t 疗法治疗大鼠脑胶质瘤，观察其作用效果，并 就其作用机理进行深入探讨，从而为临床提供有效地治疗方案，并提供实 验、理论依据。本课题共分三部分进行： 第一部分采用立体定向技术，在f i s c h e r3 4 4 大鼠右侧额叶尾状核接 种经体外培养、定量的9 l 细胞。接种后动态观察大鼠生存状态及生存时 间；利用h e 染色法定期观测颅内肿瘤的生长情况及病理形态学特点；待 动物死亡后，解剖取脑，制作病理切片，再次观察肿瘤的大小及组织的形 态变化。另外，在建立大鼠9 l 脑膜瘤的基础上，应用神经外科显微技术 近全切除大鼠颅内胶质瘤，建立了9 l 大鼠恶性脑胶质瘤显微切除模型。 并观察术后大鼠的生存状态及生存时间；观测颅内肿瘤的生长情况及形态 学特点；待动物死亡后，再次观察肿瘤的大小及组织的形态变化。而且通 过免疫荧光双标法检测神经胶质酸性蛋白( g f a p ) 和中间丝蛋1 3 ( v i m e n t i n ) 在脑胶质瘤及切除后复发肿瘤组织中的表达情况。通过上述两个模型的建 立，为后续的肿瘤实验治疗研究提供可靠的动物实验平台。 第二部分利用新型的光敏剂5 氨基乙酰丙酸( a l a ) ，观察新的p d t 治疗手段( a l a p d t ) 在p d t 照射后的亚急性期的治疗效果及探讨其作 用效果。3 2 只大鼠颅内种植9 l 胶质瘤细胞。2 4 只接受p d t 治疗的荷瘤大鼠 在种植后第7 天，接受p d t 治疗前3h 腹腔注射3 0 0m g k g 的光敏剂a l a ，并 在2 4 小时后分别以4 0j c m 2 ( 8 只) ，8 0j c m 2 ( 8 p , ) 和12 0j c m 2 ( 只) 的不同激 光剂量进行治疗。其余8 只大鼠作为对照组。观察大鼠的一般生存状态； 在肿瘤植入1 4 天后，通过h - e 染色法检测颅内肿瘤的生长情况，在对其作 用机理的探讨中，利用免疫组化法检测肿瘤细胞的增殖活性( k i 6 7 ) 和 t u n e l 法测定肿瘤细胞的凋亡；另外本部分实验还将重点研究在p d t 照 射后的亚急性期，胶质瘤和周围相对正常的脑组织的反应，利用w e s t e r n b l o t 的方法分别检测肿瘤区和肿瘤邻近区域中血管内皮生长因子( v e g f ) 及缺氧诱导因子1 a ( h i f 1 a ) 的表达情况。 第三部分重点观察显微外科近全切除手术联合a l a p d t 治疗大鼠 原位9 l 脑胶质瘤的效果并对其作用机理进行探讨。3 2 只大鼠颅内种植9 l 脑胶质瘤细胞7 天后，随机分为对照组( 未治疗) 、手术组( 近全切除颅 2 一 中文摘要 内肿瘤) 、p d t 组( a l a ：3 0 0m g k g ，能量密度：8 0j c m 2 ) 和联合治疗 组( 手术切除+ p d t ) ，并给予相应治疗。治疗后7 天取出脑组织，利用h e 染色检测肿瘤体积及浸润瘤灶的情况，并分别通过免疫组化法和t u n e l 染色法分析胶质瘤细胞的增殖和凋亡的情况。 结果：第一部分通过立体定向接种体外培养细胞的技术成功建立了 大鼠颅内9 l 胶质瘤模型。大鼠接种后的初期无明显不良反应，随着肿瘤 的生长而逐渐出现相应的表现，其过程符合临床脑胶质瘤的发展过程。 h e 染色和免疫组化结果显示9 l 细胞所引起的脑胶质瘤具有该肿瘤的病 理形态学和生物学特点，并可在肿瘤周围引起胶质细胞的反应，免疫荧光 双标法检测显示脑胶质瘤细胞强表达特异性的蛋白v i m e n t i n ，周围反应性 的胶质细胞表达g f a p 。另外利用显微外科技术成功建立了近全切除脑胶 质瘤手术切除模型。手术切除后在一段时期内可提高大鼠的生存状态，延 长生存时间，但最终会因肿瘤复发而死亡。复发以后的肿瘤无论是在形 态学还是在生物学方面都未发生明显变化。 第二部分利用新的光敏剂a l a ，建立了新的p d t 治疗模式一 a l a - p d t 。不同剂量的a l a 。p d t 治疗后明显改善由于脑胶质瘤所引起的 大鼠生存状态的下降，并且减小脑胶质瘤的体积，其治疗效果在一定范围 内随着剂量的增大而增强，但8 0 和1 2 0 j c m 2 的治疗效果基本相同。通过 对肿瘤细胞增殖和凋亡的检测发现，a l a p d t 的治疗作用是通过诱导肿 瘤细胞的凋亡而实现的，对细胞的增殖没有影响，因此残存的处于增殖期 的肿瘤细胞仍可成为治疗后肿瘤复发的原因。另外在照射后的亚急性期， 通过w e s t e mb l o t 方法发现对照组及不同剂量的a l a p d t 组中肿瘤组织 内的h i f 1 a 和v e g f 的表达均很高，在肿瘤旁组织中，对照组的h i f 1 仅 和v e g f 略有表达，随着a l a p d t 治疗剂量的疗增高，h i f 1 a 和v e g f 的表达也逐渐增高，有以1 2 0 j c m 2 的照射剂量作用最为显著。 第三部分与对照组相比，手术切除组、单独a l a p d t 组和联合治 疗组在治疗7 天后均可明显缩小脑瘤体积( p 0 0 1 ) 。在3 个治疗组中， 以联合治疗组的治疗效果最佳，脑瘤体积比p d t 组和手术组分别减少约 8 2 ( 尸 0 0 0 1 ) 和5 4 俨 o 0 1 ) 。光镜下观察h e 切片发现，对照组和 p d t 组肿瘤体积大，无出血和坏死，肿瘤呈浸润性生长，周围有大量的 大小不的浸润灶。手术组和联合治疗组中的肿瘤绝大部分被切除，术后 中文摘要 “残腔”周围有少量的肿瘤浸润灶，但联合治疗组中的浸润灶为边界清楚 的小圆形病灶，且数量极少，浸润瘤灶面积也最小。另外，3 只联合治疗 组的大鼠和2 只手术组的大鼠在术后“残腔 周围有少量出血灶。t u n e l 染色显示手术组的阳性细胞和对照组相比无显著性差异，但a l a p d t 组 和联合治疗组的阳性细胞数却明显高于对照组，说明手术切除对肿瘤细胞 的凋亡无影响，但a l a p d t 和联合治疗却可以明显的促进肿瘤细胞的凋 亡。k i 6 7 免疫组化染色表明k i 6 7 指数在各组间比较无显著性差异。 结论：19 l f i s c h e r3 4 4 大鼠原位脑胶质瘤模型良好地模拟了人颅内 脑胶质瘤的发展过程，具备该肿瘤的形态学及生物学特性，模型成功。 2 运用显微外科技术近全切除脑胶质瘤可改善荷瘤大鼠的生存状态， 延长生存时间，但肿瘤仍可复发。 3a l a p d t 可通过诱导肿瘤细胞的凋亡来减少脑胶质瘤的体积，且 无明显不良反应。但a l a p d t 在治疗的同时可促进肿瘤旁组织中的 h i f 1 a 和v e g f 的表达增高，从而促进肿瘤的复发，影响治疗效果。 4 近全手术切除颅内肿瘤并联合a l a p d t 治疗明显提高了脑胶质瘤 的治疗效果，这与a l a p d t 促进手术后残存肿瘤细胞的凋亡，杀灭浸润 的肿瘤病灶有关，因此该联合治疗方案有可能成为临床治疗脑胶质瘤的新 途径。 关键词：脑胶质瘤；手术切除；光动力学治疗；5 氨基乙酰丙酸； 增殖：凋亡 英文摘要 e x p e r i m e n t a ls t u d yo fs u r g i c a lr e s e c i t o nc o m b i n e d w i t h a l a - p d tt r e a t m e n ti nr a t sw i t h9 lg l i o m a a b s t r a c t g l i o m a ，o n eo ft h em o s tc o m m o np r i m a r yb r a i nt u m o r s ，a c c o u n t sf o r 4 0 o fi n t r a c r a n i a lt u m o r sa n dm a l i g n a n tg l i o m aa c c o u n t sf o r6 0 o fg l i o m a a tp r e s e n t ，t h et r e a t m e n to fg l i o m ai sl i m i t e di n c l i n i c a ls u r g i c a lr e m o v a l ， a c c o m p a n i e dw i t hr a d i o t h e r a p yo rc h e m o t h e r a p ya f t e ro p e r a t i o n a l t h o u g h t u m o rc e l l sd o n tg r o wt ot h ed i s t a n ts i t e sb ym e t a s t a s i s ，t h e ys t i l ls h o wt h e i n v a s i v eg r o w t ht ot h es u r r o u n d i n gn o r m a lb r a i nw i t haf a s ts p e e d s oi ti sn o t p o s s i b l et or e m o v eg i l o m ac o m p l e t e l yb ys u r g i c a le x c i s i o n r e s i d u a lt u m o r c e l l sa f t e ro p e r a t i o nw i l lc a u s en e wt u m o rm a s sf o r m a t i o na g a i nw h i c hh a da b a de f f e c to nt h el i v i n gs t a t ea n ds u r v i v a lt i m eo fp a t i e n t s i th a sb e e ns h o w n t h a tt h em e d i a ns u r v i v a lt i m eo fp a t i e n t sw i t hm a li g n a n tg l i o m ai so n l y9t o12 m o n t h s a l t h o u g hr a d i o t h e r a p y o rc h e m o t h e r a p ya f t e r o p e r a t i o n c o u l d e f f e c t i v e l ye r a d i c a t ep a r to ft h er e m n a n t s ，i ta l s oc a u s e sd a m a g eo fn o r m a l b r a i nt i s s u ea n ds e r i o u ss y s t e m i ca d v e r s er e a c t i o n s s ot h et r e a t m e n ti sn o t s a t i s f a c t o r yu n t i ln o w t h e r e f o r e ，i ti s c r i t i c a lt oi m p r o v et h ee f f i c i e n c yo f t r e a t m e n tb ys e e k i n gb e t t e rt r e a t m e n tm e t h o da n dp r o g r a ma sw e l la sr e d u c i n g t h ep o s t o p e r a t i v er e c u r r e n c eo fg l i o m a p h o t o d y n a m i ct h e r a p y ( p d t ) i sak i n do fn e wt r e a t m e n tm e t h o da n dt h e m e c h a n i s mi st h a tt h ep h o t o s e n s i t i z e rw h i c hc o u l ds p e c i f i ca c c u m u l a t ei n t u m o rm i g h tb ea c t i v a t e db ys p e c i f i cw a v e l e n g t h so fl i g h ta n dp r o d u c e sa s e r i e so fc y t o t o x i cf r e er a d i c a lm o l e c u l e s ，d i r e c t l yl e a d i n gt ot u m o rc e l l st og e t n e c r o s i sa n da p o p t o s i s p h o t o d y n a m i ct h e r a p yh a sb e e ns t u d i e di nav a r i e t yo f t u m o r sa n dt h ed o c u m e n t ss h o wt h a tp d ti sa ne f f e c t i v et r e a t m e n tm e t h o d a tp r e s e n t ，t h er e p o r t sa b o u tt h ee f f e c to fp d tt r e a t m e n to nb r a i nt u m o r s a r en o tv e r yp r e v a l e n t ，b u tp r e l i m i n a r yc l i n i c a la p p l i c a t i o ns h o w st h a tp d t t r e a t m e n tc o u l di n d u c em a l i g n a n tg l i o m a st og e tn e c r o s i sa n dp r o l o n gs u r v i v a l t i m eo fp a t i e n t s h o w e v e r , t h i sc o u l dn o tp r e v e n tt u m o rr e c u r r e n c ea n d 5 liiiiiliiiiiiiii_i 英文摘要 p a t i e n t sd e a t h u pt od a t e ，p d tt r e a t m e n to nb r a i ng l i o m ai na n i m a ls t u d i e s a r ef o c u so nt h er e s p o n s e so ft u m o ra n ds u r r o u n d i n gb r a i nt i s s u ei ne a r l y p h a s e ( u s u a l l y3d a y sa f t e rt r e a t m e n t ) d u r i n gt h i ss t a g e ，p d ts t i m u l a t e s t u m o rt og e tn e c r o s i sa n da p o p t o s i s h o w e v e r , p d ts t i l lh a ss o m ee f f e c ta f t e r a c u t es t a g ew h i c hi sn o tk n o w n t h e r e f o r e ，t h e r ea r es o m ed r a w b a c k st o e v a l u a t et h ee f f e c to fp d t t h e r a p e u t i ct r e a t m e n to ng l i o m a i nt h i ss t u d y , u s i n g9 l f i s c h e r3 4 4g l i o m am o d e la n dan e wt y p eo f p h o t o s e n s i t i z e r - - 5 一a m i n o l e v u l i n i ca c i d ( a l a ) ，w ew i l l f i n d an e wp d t t r e a t m e n tm e t h o d so 地a p d t ) ，a n do b s e r v et h ee f f e c to fa l a p d to n g l i o m at r e a t m e n ta sw e l la se x p l o r ei t sp r e c i o u sm e c h a n i s m i na d d i t i o n ，w e w i l ld e t e c tt h er e s p o n s e so fg l i o m a sa n ds u r r o u n d i n gb r a i nt i s s u ei ns u b a c u t e p h a s ea f t e rp d t t og i v eac o r r e c t e de v a l u a t i o no fa l a p d t t h i ss t u d yw i l l a l s o e x p l o r et h e e f f e c t i v et r e a t m e n tp r o g r a m sw h i c hi ss u r g i c a lr e s e c t i o n c o m b i n e dw i t ha l a p d tt r e a t m e n ta n do b s e r v ei t se f f e c ta sw a l la s m e c h a n i s m t h ea i mo ft h i ss t u d yi st op r o v i d ee f f e c t i v et r e a t m e n tm e t h o d s a n dp r o g r a mo ng l i o m aw i t hc o m p l e t ee x p e r i m e n t a ld a t a t h es u b j e c ti s d i v i d e di n t ot h r e ep a r t s ： p a r tif i s c h e r3 4 4r a t sw e r ei n o c u l a t e dw i t hc u l t u r e d9 lc e l l s ( 5x10 4 ) t o t h ec a u d a t en u c l e u so fr i g h tf r o n t a ll o b eb yt h es t e r e o t a c t i ct e c h n i q u et o e s t a b l i s ht h e9 l f i s c h e r3 4 4g l i o m am o d e l a f t e ri n o c u l a t i o n ，s u r v i v a ls t a t u s a n dt i m eo fr a t sw e r es t u d i e d ；a n dd e v e l o p m e n to fi n t r a c r a n i a lg l i o m aa n d p a t h o l o g i c a lm o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c sw e r ed e t e c t e db yh e s t a i n i n g w h e nt h ea n i m a l sd i e d ，b r a i nw a sr e m o v e da n dc u ti n t os l i c e st oo b s e r v et h e t u m o rs i z ea n dm o r p h o l o g i c a lc h a n g e sa g a i n i na d d i t i o n ，w en e a r l yt o t a l l y r e m o v e dt h ei n t r a c r a n i a lg l i o m at i s s u eb yt h et e c h n i q u e so fn e u r o s u r g i c a l r e s e c t i o no fm a l i g n a n tg l i o m au n d e rm i c r o s c o p e a f t e ro p e r a t i o n ，s u r v i v a l s t a t u sa n dt i m eo fr a t sw e r es t u d i e d ；a n dd e v e l o p m e n to fi n t r a c r a n i a lg l i o m a a n dp a t h o l o g i c a lm o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c sw e r ed e t e c t e db yh e s t a i n i n g w h e nt h ea n i m a l sd i e d ，b r a i nw a sr e m o v e da n dt ob ec u ti n t os l i c e st oo b s e r v e t h et u m o rs i z ea n dm o r p h o l o g i c a lc h a n g e s i n t e r m e d i a t ef i l a m e n tp r o t e i n ( v i m e n t i n ) a n dg l i a l a c i d i c p r o t e i n ( g f a p ) w e r e a l s om e a s u r e d b y 6 英文摘要 d o u b l e l a b e l e di m m u n o f l u o r e s c e n c e s t a i n i n gb y i n g l i o m a s t i s s u ea n d r e c u r r e n c e dg l i o m aa f t e rr e s e c t i o n e s t a b l i s h m e n to ft h e s et w om o d e l s p r o v i d e sar e l i a b l ep l a t f o r mf o rt h ef o l l o w i n gs t u d i e s p a r ti iu s i n gan e wt y p eo fp h o t o s e n s i t i z e r - - 5 一a m i n o l e v u l i n i ca c i d ( a l a ) ，w eo b s e r v e dt h ee f f e c to fn e wp d tt r e a t m e n t ( a l a p d t ) o ng l i o m a i nt h es u b - a c u t ep h a s ea f t e rp d tt r e a t m e n ta n de x p l o r e di t sm e c h i n s m s 3 2 r a t sw e r ei m p l a n t e d9 lc e l l st ob r a i n d a y7a f t e ri m p l a n t a i o n ，2 4r a t sw i t h g l i o m aw e r ei n j e c t e da l a a tt h ed o s eo f3 0 0m e g k ga n dt h e nr e c e i v e dp d t t r e a t m e n tw i t h4 0j c m z ( 8c a s e s ) ，8 0j c m z ( 8c a s e s ) a n d12 0j c m z ( 8c a s e s ) 3 h o u r sl a t e r , r e s p e c t i v e l y t h eo t h e r8r a t ss e r v e da sc o n t r o l s a n i m a l sw e r e o b s e r v e df o r7 d a y sa f t e rp d ta n dt h el i v i n gs t a t u ew a ss t u d i e d 14d a y sa f t e r 9 lc e l l i m p l a n t a t i o n ，t h et u m o rs i z ew a sm e a s u r e db yh e s t a i n i n g t o e x p l o r et h ep o s s i b l em e c h a n i s m ，i m m u n o h i s t o c h e m i c a ls t a i n i n gf o rk i 6 7a n d t u n e ls t a i n i n gw e r eu s e dt od e t e c tt h ep r o l i f e r a t i o no ft u m o rc e l l sa n d a p o p t o s i sr e s p e c t i v e l y a n o t h e re x p e r i m e n ti n v o l v e di nt h i sp a r tw a sf o c u so n t h ee f f e c to fp d to nt h er e s p o n s e so fg l i o m aa n ds u r r o u n d i n gb r a i nt i s s u ei n s u b a c u t ep h a s ea f t e rp d tt r e a t m e n t t h ee x p r e s s i o n so fv a s c u l a re n d o t h e l i a l g r o w t hf a c t o r ( v e g f ) a n dh y p o x i a - i n d u c i b l ef a c t o r - la ( h i f la ) i ne i t h e r g l i o m at i s s u eo rs u r r o u n d i n gg l i o m at i s s u ew e r ed e t e c t e db yw e s t e r nb l o t p a r ti i it h et h i r d p a r t w a sf o c u so nt h ee f f e c to f n e a r l y t o t a l m i c r o s u r g i c a lr e s e c t i o nc o m b i n e dw i t ha l a p d tt r e a t m e n to n9 lg l i o m ai n r a t sa n dt h ep r e c i o u sm e c h a n i s mw a sa l s od i s c u s s e d 3 2r a t sw i t hi n t r a c r a n i a l 9 lg l i o m aw e r eo b s e r v e d ；a n d7d a y sa f t e ri m p l a n t a t i o n ，r a t sw e r er a n d o m l y d i v i d e di n t oc o n t r o lg r o u p ( n ot r e a t m e n t ) ，s u r g i c a lg r o u p ( n e a r - t o t a lr e s e c t i o n o fi n t r a c r a n i a lt u m o r s ) ，p d tg r o u p ( a l a ：30 0m g k g ，t h ee n e r g yd e n s i t y ：8 0 j c r n 2 ) a n dt h e c o m b i n e dt r e a t m e n tg r o u p ( s u r g e r y + p d t ) ，r e c e i v i n gt h e a p p r o p r i a t et r e a t m e n t 7d a y sa f t e rt r e a t m e n t ，b r a i nw a sr e m o v e da n dt u m o r s i z e sa sw e l la si n f i l t r a t e dt u m o rl o c iw e r ed e t e c t e du s i n gh e s t a i n i n g i m m u n o h i s t o c h e m i c a ls t a i n i n gf o rk i 6 7a n dt u n e ls t a i n i n gw e r eu s e dt o d e t e c tp r o l i f e r a t i o no ft u m o rc e l l sa n da p o p t o s i sr e s p e c t i v e l y r e s u l t s ：p a r tii n t r a c r a n i a l9 lg l i o m am o d e li nr a t sw a ss u c c e s s f u l l y 7 英文摘要 e s t a b l i s h e d b yi m p l a n t a t i o no f9 lc e l l sv i a t h es t e r e o t a c t i ci n o c u l a t i o n t e c h n i q u e s t h e r ew e r en os i g n i f i c a n ta d v e r s er e a c t i o n sa f t e ri n o c u l a t i o ni nt h e e a r l ys t a g e ，b u tt h ec o r r e s p o n d i n gb a dp e r f o r m a n c e sg r a d u a l l yo c c u r r e dw i t h t h ed e v e l o p m e n to ft u m o rg r o w t h t h ep r o c e s so ft u m o rd e v e l o p m e n ti s s i m i l a ra sc l i n i c a lg l i o m a t h ei n d u c e dg l i o m as h o w e dt h es a m e p a t h o l o g i c a l a n db i o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c sa sh u m a ng l i o m a u s i n gh e s t a i n i n ga n d i m m u n o h i s t o c h e m i s t r y , a n di tc o u l dc a u s et h ep r o l i f e r a t i o no fg l i a lc e l l sw h i c h a r ea r o u n dt h et u m o r u s i n gd o u b l e l a b e l e di m m u n o f l u o r e s c e n c ea s s a y , i t s h o w e dt h a tg l i o m at u m o rc e l l se x p r e s s e d s p e c i f i cp r o t e i n ( v i m e n t i n ) s t r o n g l y a n dt h es u r r o u n d i n gr e a c t i v eg l i a lc e l l se x p r e s s e dg f a pw h i c hi sam a r k e rf o r t h e m i na d d i t i o n ，i ts u c c e e d e dt or e m o v et h eg l i o m at i s s u ef r o mb r a i nn e a r l y t o t a l l yb yt h em i c r o s u r g i c a lt e c h n i q u e a f t e rs u r g i c a lo p e r a t i o n ，t h el i v i n gs t a t e o fr a t sw a s i m p r o v e da n ds u r v i v a lt i m ep r o l o n g e d ，b u tr a t se v e n t u a l l yd i e dd u e t ot u m o rr e c u r r e n c e c o m p a r e dw i t ho r i g i n a l g l i o m a ，t h er e c u r r e n tt u m o r k e e p ss a m ee i t h e ri nm o r p h o l o g yo ri nb i o l o g i c a lc h a r t e r s p a r ti it oe s t a b l i s han e wp d tt r e a t m e n tm o d a l ( a l a p d t ) u s i n gan e w p h o t o s e n s i t i z e r ( a l a ) d i f f e r e n td o s e so fa l a p d tt r e a t m e n ts i g n i f i c a n t l y i m p r o v e dt h ed e c r e a s e dl i v i n gs t a t u si n d u c e db yg l i o m a ，a n ds i g n i f i c a n t l y r e d